CTLA4 Ig-24

375,00 €*

Produktnummer: 305014

Description	CTLA4 Ig-24-Zellen, die von einem adulten weiblichen chinesischen Hamster (Cricetulus griseus) stammen, sind eine spontan immortalisierte Zelllinie, die durch die Einführung des menschlichen CTLA-4-Gens genetisch verändert wurde, was zur Expression eines Fusionsproteins führt. Das Fusionsprotein besitzt eine dominante Eigenschaft von CTLA4Ig, was CTLA4 Ig-24-Zellen zu einem einzigartigen und unverzichtbaren Instrument in der immunologischen Forschung macht. CTLA-4, ein Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie, wird hauptsächlich in aktivierten T-Zellen exprimiert und wirkt als hemmender Signalübermittler zur Regulierung der T-Zellfunktion. Es hat eine gemeinsame Homologie mit CD28, einem ko-stimulatorischen Protein der T-Zellen, und beide Moleküle binden an die Proteine CD80 (B7-1) und CD86 (B7-2) auf Antigen-präsentierenden Zellen. CTLA-4 weist eine größere Affinität und Avidität für CD80 und CD86 auf als CD28, wodurch es CD28 bei der Bindung an diese Liganden übertrumpfen kann. Auf diese Weise sendet CTLA-4 ein hemmendes Signal an T-Zellen, während CD28 ein stimulierendes Signal sendet. Dieser komplizierte Regulationsmechanismus ist entscheidend für die Aufrechterhaltung des Immungleichgewichts und die Verhinderung übermäßiger Immunreaktionen. Interessanterweise ist CTLA-4 auch in regulatorischen T-Zellen (Tregs) zu finden und trägt zu deren hemmender Funktion bei. Wenn T-Zellen über den T-Zell-Rezeptor (TCR) und CD28 aktiviert werden, steigt die Expression von CTLA-4. Außerdem kann CTLA-4 die Zellmotilität und die Signalübertragung über den PI3-Kinase-Signalweg beeinflussen.
Organism	Hamster
Tissue	Eierstock
Synonyms	CTLA4Ig-24

Gender	Weiblich
Morphology	Epithelial
Growth properties	Adhärent

Citation	CTLA4 Ig-24 (Cytion Katalognummer 305014)
Biosafety level	1

Culture Medium	DMEM
Medium supplements	10% FBS, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, 0,2 mM Prolin, 0,001 mM Methotrexat
Passaging solution	Accutase
Subculturing	Medium entfernen und die anhaftenden Zellen mit PBS ohne Kalzium und Magnesium spülen (3-5 ml PBS für T25-, 5-10 ml für T75-Zellkulturflaschen). Accutase zugeben (1-2 ml pro T25-, 2,5 ml pro T75-Zellkulturflasche), die Zellschicht muss vollständig bedeckt sein. 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren. Die Zellen vorsichtig mit Medium (10 ml) resuspendieren, 3 Minuten bei 300 g zentrifugieren, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Flaschen mit frischem Medium geben.
Split ratio	1: 3 bis 1: 4
Fluid renewal	2 bis 3 Mal pro Woche
Freeze medium	CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100)
Handling of cryopreserved cultures	Die Zellen werden tiefgefroren auf Trockeneis versandt. Bitte stellen Sie sicher, dass das Fläschchen noch gefroren ist. Wenn eine sofortige Kultivierung nicht beabsichtigt ist, muss das Kryovial nach der Ankunft unter -150 Grad Celsius gelagert werden. Wenn eine sofortige Kultivierung beabsichtigt ist, befolgen Sie bitte die nachstehenden Anweisungen: Schnelles Auftauen durch schnelles Schütteln in einem 37 Grad Celsius warmen Wasserbad innerhalb von 40-60 Sekunden. Das Wasserbad sollte sauberes Wasser enthalten, das ein antimikrobielles Mittel enthält. Sobald die Probe aufgetaut ist, nehmen Sie das Kryovial aus dem Wasserbad. Es sollte noch ein kleiner Eisklumpen zurückbleiben und das Fläschchen sollte noch kalt sein. Von nun an sollten alle Operationen unter aseptischen Bedingungen durchgeführt werden. Überführen Sie das Kryovial in einen sterilen Durchflussschrank und wischen Sie es mit 70%igem Alkohol ab. Das Fläschchen vorsichtig öffnen und die Zellsuspension in ein 15-ml-Zentrifugenröhrchen mit 8 ml Kulturmedium (Raumtemperatur) überführen. Die Zellen vorsichtig resuspendieren. Zentrifugieren Sie bei 300 x g für 3 Minuten und verwerfen Sie den Überstand. Der Zentrifugationsschritt kann ausgelassen werden, aber in diesem Fall müssen die Reste des Gefriermediums 24 Stunden später entfernt werden. Die Zellen vorsichtig in 10 ml frischem Zellkulturmedium resuspendieren und in zwei T25-Zellkulturflaschen überführen. Alle weiteren Schritte sind im Abschnitt Subkultur beschrieben.
Handling of proliferating cultures	Eine oder zwei Zellkulturflaschen werden mit Zellkulturmedium gefüllt. Fangen Sie das gesamte Medium in 1 bzw. 2 x 50 ml Zentrifugenröhrchen auf. Geben Sie vorsichtig 5 ml Zellkulturmedium in jede T25-Zellkulturflasche. Kontrollieren Sie die Zellmorphologie und den Konfluenzgrad unter dem Mikroskop. Mindestens 24 Stunden lang bei 37 Grad Celsius inkubieren. Schleudern Sie das gesammelte Medium 3 Minuten lang bei 300 x g, um die Zellen zu sammeln, die sich während des Transports abgelöst haben könnten. Wenn ein Zellpellet sichtbar ist, die Zellen in 5 ml Zellkulturmedium resuspendieren und in eine T25-Zellkulturflasche überführen. Bei 37 Grad Celsius mindestens 24 Stunden lang bebrüten.

Sterility	Mykoplasmen-Kontaminationen werden durch PCR- und Lumineszenz-basierte Mykoplasmen-Assays ausgeschlossen. Das Nichtvorhandensein von Bakterien-, Pilz- oder Hefekontaminationen wird durch tägliche visuelle Zellüberwachung kontrolliert.

Kontaminationsfreie Zellen

Zur Identifizierung von Mykoplasmen-Kontaminationen führen wir PCR- und Lumineszenz-basierte Mykoplasmen-Tests durch. Darüber hinaus bestimmen wir jegliche bakterielle oder pilzliche Kontamination durch unsere standardisierten Herstellungsprozesse.

Kundenspezifische Projekte

Neben genomischer DNA, RNA, Zellpellets und Zelllysaten können wir auch große Mengen assayfähiger Zellen, plattierte Zellen in verschiedenen Formaten sowie gefrorene oder wachsende Zellen anbieten. Kontaktieren Sie uns, um ein Angebot zu erhalten.

Authentifizierte Zellen

Jede hergestellte Charge von Zelllinien* wird mittels STR-Analyse authentifiziert. Kontaktieren Sie uns, wenn Sie einen zur Veröffentlichung bereiten STR-Bericht für Ihre Zellen benötigen (*Human-, Hamster-, Maus-, Ratten- und Hundezellen).

HLA-Allele

Eine HLA-Charakterisierung ist für mehr als 200 Zelllinien verfügbar. HLA Klasse I -A, B, C und Klasse II HLA-DPA1, -DPB1, -DQA1, DQB1 und DRB1 Allele wurden durch Next-Generation-Sequencing-Methoden (NGS) für Klasse I und Klasse II Allele erhalten.

CTLA4 Ig-24

Allgemeine Informationen

Merkmale

Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation

Expression / Mutation

Handhabung

Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA