MCF 10A

375,00 €*

Produktnummer: 305026

Description	Brustkrebs ist weltweit eine der häufigsten Ursachen für krebsbedingte Todesfälle bei Frauen. Es wurden verschiedene Zellmodelle entwickelt, um die Tumorentstehung, Metastasierung und Medikamentenempfindlichkeit von Brustkrebs besser zu verstehen. Unter diesen Modellen ist die MCF10A-Zelllinie des menschlichen Brustepithels ein weit verbreitetes In-vitro-Modell zur Untersuchung der normalen Funktion und Transformation von Brustzellen. Die MCF10A-Zelllinie wurde 1984 aus der Brustdrüse einer weißen, 36-jährigen Frau mit fibrozystischen Brüsten isoliert. Diese Zelllinie wurde von der Michigan Cancer Foundation hinterlegt. Die menschliche Brustepithelzelllinie MCF10A ist wohl das am häufigsten verwendete Modell für normale Brustzellen. Diese Zellen wurden aus gutartigem, proliferativem Brustgewebe gewonnen und spontan ohne bestimmte Faktoren immortalisiert. Die MCF 10A-Zelllinie ist eine nicht-tumorigene Epithelzelllinie. Sie weisen ein dreidimensionales Wachstum in Kollagen auf und bilden in konfluenten Kulturen Kuppeln. Die Zellen sind positiv für epitheliale Sialomucine, Cytokeratine und Milchfettkügelchen-Antigene. Sie exprimieren auch brustspezifische Antigene, wie durch positive Reaktion mit den monoklonalen Antikörpern MFA-Breast und MC-5 nachgewiesen wird. Die Linie reagiert auf Insulin, Glukokortikoide, Cholera-Enterotoxin und den epidermalen Wachstumsfaktor (EGF). Elektronenmikroskopisch zeigen die Zellen luminal-duktale Merkmale, aber keine myoepithelialen Zellen. Der Kalziumgehalt des Mediums hat einen erheblichen Einfluss auf die Morphologie der Zellen. Die MCF10A-Zellen zeigen keine Anzeichen von terminaler Differenzierung oder Seneszenz. MCF10A-Zellen sind weit verbreitete, nicht bösartige Brustepithelzellen. Sie weisen einige Merkmale des normalen Brustepithels auf, darunter das Fehlen eines verankerungsunabhängigen Wachstums und die Abhängigkeit von Wachstumsfaktoren und Hormonen für Proliferation und Überleben. Sie können in 3D-Kultur azinäre Strukturen bilden, was sie zu einem hervorragenden Modell für die Analyse der Auswirkungen von Onkogenen macht. MCF10A-Zellen weisen einen basalen Phänotyp auf, exprimieren aber in 2D-Kultur luminale und stammartige Marker und weisen ein einzigartiges Expressionsprofil für Epithelzellen auf.
Organism	Menschen
Tissue	Brustdrüse, Brust
Synonyms	MCF 10A, MCF.10A, MCF10A, MCF10-A, MCF10a, MCF-10 Attached, Michigan Cancer Foundation-10A

Culture Medium	MEGM
Medium supplements	100 ng/ml Choleratoxin
Passaging solution	Accutase
Subculturing	Medium entfernen und die anhaftenden Zellen mit PBS ohne Kalzium und Magnesium spülen (3-5 ml PBS für T25-, 5-10 ml für T75-Zellkulturflaschen). Accutase zugeben (1-2 ml pro T25-, 2,5 ml pro T75-Zellkulturflasche), die Zellschicht muss vollständig bedeckt sein. 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren. Die Zellen vorsichtig mit Medium (10 ml) resuspendieren, 3 Minuten bei 300 g zentrifugieren, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Flaschen mit frischem Medium geben.
Split ratio	1:2 bis 1:4
Fluid renewal	2 bis 3 Mal pro Woche
Freeze medium	CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100)
Handling of cryopreserved cultures	Die Zellen werden tiefgefroren auf Trockeneis versandt. Bitte stellen Sie sicher, dass das Fläschchen noch gefroren ist. Wenn eine sofortige Kultivierung nicht beabsichtigt ist, muss das Kryovial nach der Ankunft unter -150 Grad Celsius gelagert werden. Wenn eine sofortige Kultivierung beabsichtigt ist, befolgen Sie bitte die nachstehenden Anweisungen: Schnelles Auftauen durch schnelles Schütteln in einem 37 Grad Celsius warmen Wasserbad innerhalb von 40-60 Sekunden. Das Wasserbad sollte sauberes Wasser enthalten, das ein antimikrobielles Mittel enthält. Sobald die Probe aufgetaut ist, nehmen Sie das Kryovial aus dem Wasserbad. Es sollte noch ein kleiner Eisklumpen zurückbleiben und das Fläschchen sollte noch kalt sein. Von nun an sollten alle Operationen unter aseptischen Bedingungen durchgeführt werden. Überführen Sie das Kryovial in einen sterilen Durchflussschrank und wischen Sie es mit 70%igem Alkohol ab. Das Fläschchen vorsichtig öffnen und die Zellsuspension in ein 15-ml-Zentrifugenröhrchen mit 8 ml Kulturmedium (Raumtemperatur) überführen. Die Zellen vorsichtig resuspendieren. Zentrifugieren Sie bei 300 x g für 3 Minuten und verwerfen Sie den Überstand. Der Zentrifugationsschritt kann ausgelassen werden, aber in diesem Fall müssen die Reste des Gefriermediums 24 Stunden später entfernt werden. Die Zellen vorsichtig in 10 ml frischem Zellkulturmedium resuspendieren und in zwei T25-Zellkulturflaschen überführen. Alle weiteren Schritte sind im Abschnitt Subkultur beschrieben.
Handling of proliferating cultures	Eine oder zwei Zellkulturflaschen werden mit Zellkulturmedium gefüllt. Fangen Sie das gesamte Medium in 1 bzw. 2 x 50 ml Zentrifugenröhrchen auf. Geben Sie vorsichtig 5 ml Zellkulturmedium in jede T25-Zellkulturflasche. Kontrollieren Sie die Zellmorphologie und den Konfluenzgrad unter dem Mikroskop. Mindestens 24 Stunden lang bei 37 Grad Celsius inkubieren. Schleudern Sie das gesammelte Medium 3 Minuten lang bei 300 x g, um die Zellen zu sammeln, die sich während des Transports abgelöst haben könnten. Wenn ein Zellpellet sichtbar ist, die Zellen in 5 ml Zellkulturmedium resuspendieren und in eine T25-Zellkulturflasche überführen. Bei 37 Grad Celsius mindestens 24 Stunden lang bebrüten.

Sterility	Mykoplasmen-Kontaminationen werden durch PCR- und Lumineszenz-basierte Mykoplasmen-Assays ausgeschlossen. Das Nichtvorhandensein von Bakterien-, Pilz- oder Hefekontaminationen wird durch tägliche visuelle Zellüberwachung kontrolliert.
STR profile	Amelogenin: x CSF1PO: 10,12 D13S317: 8,9 D16S539: 11,12 D5S818: 10,13 D7S820: 10,11 TH01: 8,9.3 TPOX: 9,11 vWA: 15,17 D3S1358: 14,18 D21S11: 28,30 D18S51: 18,19 Penta E: 13,14 Penta D: 10,12 D8S1179: 14,16 FGA: 22,24 D6S1043: 12,18 D2S1338: 21,26 D12S391: 17,20 D19S433: 13,15

Kontaminationsfreie Zellen

Zur Identifizierung von Mykoplasmen-Kontaminationen führen wir PCR- und Lumineszenz-basierte Mykoplasmen-Tests durch. Darüber hinaus bestimmen wir jegliche bakterielle oder pilzliche Kontamination durch unsere standardisierten Herstellungsprozesse.

Kundenspezifische Projekte

Neben genomischer DNA, RNA, Zellpellets und Zelllysaten können wir auch große Mengen assayfähiger Zellen, plattierte Zellen in verschiedenen Formaten sowie gefrorene oder wachsende Zellen anbieten. Kontaktieren Sie uns, um ein Angebot zu erhalten.

Authentifizierte Zellen

Jede hergestellte Charge von Zelllinien* wird mittels STR-Analyse authentifiziert. Kontaktieren Sie uns, wenn Sie einen zur Veröffentlichung bereiten STR-Bericht für Ihre Zellen benötigen (*Human-, Hamster-, Maus-, Ratten- und Hundezellen).

HLA-Allele

Eine HLA-Charakterisierung ist für mehr als 200 Zelllinien verfügbar. HLA Klasse I -A, B, C und Klasse II HLA-DPA1, -DPB1, -DQA1, DQB1 und DRB1 Allele wurden durch Next-Generation-Sequencing-Methoden (NGS) für Klasse I und Klasse II Allele erhalten.

Age	36 Jahre
Gender	Weiblich
Morphology	Epithelial
Growth properties	Adhärent

MCF 10A

Allgemeine Informationen

Merkmale

Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation

Expression / Mutation

Handhabung

Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA

Citation	MCF 10A (Cytion-Katalognummer 305026)
Biosafety level	1