Milieu F12K de Ham, contenant : 2,0 mM de L-glutamine, 2,0 mM de pyruvate de sodium, 2,5 g/L de NaHCO₃

Voici le milieu Ham's F-12K (Kaighn's), une version spécialisée du milieu Ham's F-12 conçue pour répondre aux exigences spécifiques de la recherche biologique. Ce milieu de pointe offre des avantages distincts, améliorant la culture des hépatocytes humains primaires, ainsi que des cellules hépatiques de rat et de poulet, en particulier dans des conditions de sérum réduit.

Le milieu Ham's F-12K (Kaighn's) est soigneusement formulé pour optimiser les conditions de culture cellulaire. Il se caractérise par une composition enrichie, fournissant des concentrations élevées de composants essentiels tels que les acides aminés et le pyruvate de sodium, ainsi que des éléments supplémentaires, notamment la putrescine, la thymidine, l’hypoxanthine et le zinc. Ces ajouts permettent aux chercheurs de compléter le milieu avec une quantité minimale de sérum ou des composants définis pour des types cellulaires spécifiques, facilitant ainsi la mise en place de conditions expérimentales précises.

Il convient de noter que le milieu F-12K (Kaighn) de Ham ne contient ni protéines ni facteurs de croissance. Par conséquent, un ajout de facteurs de croissance et de sérum fœtal bovin (FBS) est souvent nécessaire, ce qui permet aux chercheurs d’adapter le milieu aux besoins de leurs lignées cellulaires spécifiques. Pour des performances optimales, la concentration en FBS doit être soigneusement ajustée pour chaque lignée cellulaire, afin de garantir une croissance et un fonctionnement optimaux.

Pour maintenir un pH physiologique, le milieu F-12K (Kaighn) de Ham utilise un système tampon à base de bicarbonate de sodium (2,5 g/L), ce qui nécessite un environnement contrôlé à 5-10 % de CO₂ pendant la culture. Cela garantit que le pH du milieu reste dans la fourchette idéale pour la croissance et la viabilité cellulaires.

Contrôle qualité

• pH = 7,2 ± 0,02 à 20-25 °C.
• Chaque lot a été testé pour vérifier sa stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.

Conservation

• Conserver au réfrigérateur entre +2 °C et +8 °C, à l’abri de la lumière. La congélation ainsi que le réchauffement jusqu’à +37 °C altèrent la qualité du produit.
• Ne pas chauffer le milieu à plus de 37 °C ni utiliser de sources de chaleur non contrôlables (par exemple, un four à micro-ondes).
• Si seule une partie du milieu doit être utilisée, prélever cette quantité du flacon et la réchauffer à température ambiante.
• La durée de conservation de tous les milieux, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.

Composition

	Composants	mg/L
Sels inorganiques	Chlorure de calcium x 2H₂O	135,24
	Sulfate de cuivre(II) x 5H₂O	0,00
	Sulfate de fer (II) x 7H₂O	0,83
	Chlorure de magnésium x 6H₂O	105,72
	Sulfate de magnésium x 7H₂O	394,49
	Chlorure de potassium	283,29
	Dihydrogénophosphate de potassium	58,52
	Chlorure de sodium	7597,20
	Hydrogénophosphate disodique anhydre	115,02
	Sulfate de zinc heptahydraté	0,14
Autres composants	D(+)-glucose anhydre	1 260,00
	Hypoxanthine	4,08
	Acide DL-α-lipoïque	0,21
	Rouge de phénol	3,00
	Putrescine x 2HCl	0,32
	Pyruvate de sodium	220,00
	NaHCO₃	2 500,00
	Thymidine	0,73
Acides aminés	L-alanine	17,82
	L-arginine x HCl	421,40
	L-asparagine x H₂O	30,02
	Acide L-aspartique	26,62
	L-cystéine x HCl x H₂O	70,24
	L-glutamine	292,20
	Acide L-glutamique	29,42
	Glycine	15,01
	L-histidine x HCl x H₂O	41,92
	L-isoleucine	7,87
	L-Leucine	26,24
	L-lysine x HCl	73,04
	L-méthionine	8,95
	L-phénylalanine	9,91
	L-proline	69,06
	L-sérine	21,02
	L-thréonine	23,82
	L-tryptophane	4,08
	L-tyrosine	10,87
	L-valine	23,42
Vitamines	D(+)-biotine	0,07
	D-pantothénate de calcium	0,48
	Chlorure de choline	13,96
	Acide folique	1,32
	Myo-inositol	18,02
	Nicotinamide	0,04
	Pyridoxine x HCl	0,06
	Riboflavine	0,04
	Thiamine x HCl	0,34
	Vitamine B12	1,36