
- Tissue
- Sangre periférica
- Disease
- Línea celular linfoblastoide B transformada por el VEB (B-LCL); donante con cáncer gástrico
Documents
B-LCL-HROG17
Cell line · Product number 302112
B-LCL-HROG17 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) derived from the peripheral blood of a 70-year-old Caucasi...
01General information
- Description
B-LCL-HROG17 es una línea celular linfoblastoide B (B-LCL) transformada por el virus de Epstein-Barr (VEB) humano, derivada de la sangre periférica de un paciente caucásico de 70 años con cáncer gástrico, perteneciente a la serie del biobanco HROG. La transformación in vitro con el VEB de linfocitos B primarios de sangre periférica produjo una línea celular inmortalizada de manera estable y capaz de crecer en suspensión. Las células HROG17 presentan una morfología similar a la de los linfoblastos y expresan de manera constitutiva las proteínas de latencia del VEB, así como altos niveles de HLA de clase I y II, las moléculas coestimuladoras CD80 y CD86, las moléculas de adhesión CD54 y CD58, y los antígenos de superficie de las células B CD19, CD20 y CD23, lo que respalda una potente función de célula presentadora de antígenos.
La línea B-LCL-HROG17 se utiliza en ensayos de células T y células NK, tipificación de HLA, reacciones de linfocitos mixtos, estudios de presentación de antígenos y protocolos de linfocitos T citotóxicos (CTL). Como parte del biobanco HROG emparejado con pacientes, proporciona una referencia inmunológica definida para la investigación inmunológica del cáncer gástrico. El contexto del donante, un hombre de 70 años, es adecuado para estudios sobre la función inmunológica relacionada con la edad en el contexto del cáncer gástrico, incluyendo análisis de la capacidad de respuesta de las células T y la eficiencia de las células presentadoras de antígenos (APC) en pacientes varones de edad avanzada.
- Tissue
- Sangre periférica
- Disease
- Línea celular linfoblastoide B transformada por el VEB (B-LCL); donante con cáncer gástrico
- Applications
- Investigación en inmunología; ensayos con células T y células NK; tipificación del HLA; estudios sobre la presentación de antígenos; reacciones linfocíticas mixtas; células diana para ensayos de linfocitos T citotóxicos (CTL); inmunología del cáncer gástrico
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- GMO status
- GMO-S2
- GMO status details
- GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- De tipo linfoblástico
- Cell type
- Linfoblasto B
- Doubling time
- De 24 a 48 horas
04Identifiers
- Citation
- B-LCL-HROG17 (número de catálogo de Cytion 302112)
- NCBI TaxID
- 9606
05Expression and susceptibility
- Viruses
- Transformante: EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 15–20 % de FBS
- Subculturing
- Diluye el cultivo a 2–5 × 10⁵ células/ml con medio completo fresco y precalentado cada 2–3 días. Cuenta las células viables antes de realizar el pasaje para mantener una densidad óptima. No permita que los cultivos superen las 2 × 10⁶ células/ml. Se puede utilizar la centrifugación (300 × g, 5 min) para cambiar el medio cuando sea necesario. No se requiere disociación enzimática.
- Split ratio
- Del 1 al 4
- Seeding density
- De 2 a 5 × 10⁵ células/ml
- Fluid renewal
- Cada 2 o 3 días
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo con un 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 70 años
- Ethnicity
- caucásico
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Third-party agreements apply
- Yes