
- Tissue
- Cuello uterino
- Disease
- Carcinoma de células escamosas
- Synonyms
- HCC-94, HCC 94, HCC941122
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HCC94
Cell line · Product number 305462
The HCC94 cell line is a model used for studying cervical cancer, a condition commonly linked to human papillomavirus (HPV) infection. This cell line has ...
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01General information
- Description
La línea celular HCC94 es un modelo utilizado para estudiar el cáncer de cuello uterino, una enfermedad que suele estar relacionada con la infección por el virus del papiloma humano (VPH). Esta línea celular ha sido fundamental para comprender los mecanismos que subyacen a la resistencia a la quimioterapia, especialmente a través de las vías metabólicas. Estudios recientes han demostrado que, en las células madre del cáncer de cuello uterino (CSC) derivadas de HCC94, las enzimas involucradas en el metabolismo del glucógeno, como la PCK1 y la glucógeno fosforilasa fosforilada (pPYGL), facilitan la degradación del glucógeno. Este proceso dirige la glucosa hacia la vía de las pentosas fosfato (PPP), produciendo NADPH y contribuyendo a la eliminación de las especies reactivas de oxígeno (ROS). Este mecanismo contribuye a la supervivencia de la célula bajo quimioterapia, lo que fomenta la resistencia.
Investigaciones posteriores han demostrado que la inhibición de la PCK1 en las CSC de HCC94 puede reducir la producción de NADPH y afectar la capacidad de las células para eliminar las ROS, lo que aumenta su sensibilidad a la quimioterapia. Estos hallazgos resaltan el potencial de enfocarse en vías metabólicas como la PPP y la degradación del glucógeno como estrategias para superar la resistencia a los medicamentos en el cáncer de cuello uterino. Esta comprensión podría allanar el camino para nuevos enfoques terapéuticos destinados a alterar los mecanismos de gestión de las ROS con el fin de mejorar los resultados del tratamiento en el cáncer de cuello uterino.
- Tissue
- Cuello uterino
- Disease
- Carcinoma de células escamosas
- Synonyms
- HCC-94
- HCC 94
- HCC941122
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- HCC94 (número de catálogo de Cytion 305462)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6945
04Expression and susceptibility
- Viruses
- Transformante: Virus del papiloma humano tipo 16 (VPH16)
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Seeding density
- 1-3*10^4/cm²
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
07Donor
- Donor age
- 37 años
08Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes