HK-CRISPR-Nup62-mEGFP

La lignée cellulaire HK-CRISPR-Nup62-mEGFP est un modèle cellulaire humain dans lequel le gène Nup62 est marqué par la protéine fluorescente verte améliorée monomérique (mEGFP). Cette modification permet la visualisation en temps réel de la protéine Nup62 au sein de l’enveloppe nucléaire, ce qui facilite les études sur le transport nucléaire, l’assemblage des canaux nucléaires (NPC) et leur dynamique. Une modification génomique précise a été réalisée à l’aide de la technologie CRISPR-Cas9, ce qui en fait un modèle fiable pour étudier le rôle de la protéine Nup62 dans les processus cellulaires.

Cette lignée cellulaire est précieuse pour la recherche sur le transport nucléocytoplasmique, la régulation du cycle cellulaire et l’architecture nucléaire. Le marquage fluorescent de la Nup62 permet une imagerie à haute résolution et le suivi en temps réel des cellules vivantes, facilitant ainsi la microscopie à fluorescence et d’autres techniques d’imagerie. Les chercheurs peuvent ainsi explorer les mécanismes moléculaires des échanges nucléo-cytoplasmiques et le rôle de la Nup62 dans des maladies telles que le cancer et les troubles neurodégénératifs.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.