Skip to content
B-LCL-CDG3
Tissue
דם היקפי
Disease
הפרעות מולדות בגליקוזילציה
Metastatic site
לא רלוונטי (B-LCL שעבר טרנספורמציה על ידי EBV; ללא גרורות)

Documents

B-LCL-CDG3

Cell line · Product number 302014

B-LCL-CDG3 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a patient with PMM2-CDG, a congenital disorder of glycosylation (CDG) caused by mutat...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

B-LCL-CDG3 הוא קו תאים של לימפוציטים B שעברו שינוי על ידי EBV, שמקורו בחולה עם PMM2-CDG, הפרעה מולדת בגליקוזילציה (CDG) הנגרמת על ידי מוטציות בגן *PMM2*. PMM2 מקודד לפוספומנומוטאז 2, אנזים מפתח במסלול N-גליקוזילציה, האחראי להמרת מנוז-6-פוספט למנוז-1-פוספט. מחסור ב-PMM2 גורם לפגיעה בגליקוזילציה של גליקופרוטאינים וגליקוליפידים רבים, מה שמוביל למגוון רחב של תופעות קליניות, כולל תפקוד לקוי של מערכת העצבים, הכבד והמערכת האנדוקרינית.

כקו תאים B שהונצח על ידי EBV, B-LCL-CDG3 משמש כמודל חשוב במבחנה לחקר ההשפעות המולקולריות של מוטציות *PMM2*. קו תאים זה יכול לשמש לניתוח פגמים בגליקוזילציה, לחקר פעילות האנזים PMM2 ולבחינת אסטרטגיות טיפוליות פוטנציאליות, כגון טיפולים להגברת פעילות האנזים או תוספת מצע. B-LCL-CDG3, יחד עם מודלים תאיים אחרים שמקורם בחולי CDG, תורם לקידום המחקר על הפתופיזיולוגיה של CDG ופיתוח טיפולים.

Tissue
דם היקפי
Disease
הפרעות מולדות בגליקוזילציה
Metastatic site
לא רלוונטי (B-LCL שעבר טרנספורמציה על ידי EBV; ללא גרורות)
Applications
גנוטיפ של השפעות CDG בתאי חיסון, בדיקות תפקודיות (למשל, אנטיגנים על פני תאי B), בדיקות של תרופות ציטוטוקסיות. ניתוח מוטציות, ניתוח מנגנוני אפופטוזיס, סיווג HLA, השפעת גליקוזילציה פגומה של גליקופרוטאינים תאיים שונים על תפקודים מגוונים.

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
GMO status
GMO-S2
GMO status details
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
תאים עגולים
Cell type
לימפוציט B

04Identifiers

Citation
B-LCL-CDG3 (מספר קטלוגי Cytion 302014)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Expression and susceptibility

Viruses
טרנספורמנט: EBV

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS מנוטרל בחום
Subculturing
שמרו על התרבויות על ידי הוספה או החלפה תקופתית של המצע. התחילו את התרבויות בצפיפות של 2 x 105 תאים/מ"ל ושמרו על ריכוז התאים בטווח של 1 x 105 עד 5 x 105 תאים/מ"ל לצורך צמיחה מיטבית.
Fluid renewal
ברגע שהצבע הבינוני הפך לצהוב
Post-thaw recovery
בינוני
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Ethnicity
קווקזי