B-LCL-HROC277

B-LCL-HROC277 הוא קו תאים לימפוציטואידיים אנושיים שהונצחו על ידי נגיף אפשטיין-בר (EBV) והוקמו מתאי B לימפוציטים שהופקו מרקמת גידול או מדם היקפי של חולה בוגר. התאים נוצרו על ידי זיהום ex vivo עם supernatant המכיל EBV שמקורו בקו תאים B95/8 marmoset בנוכחות cyclosporin A כדי לדכא את צמיחת תאי T ו-NK. לאחר מספר שבועות של תרבית, הושגה צמיחה לימפוציטית יציבה, שהובילה לאוכלוסיית תאי B מונוקלונליים או אוליגוקלונליים המתפשטת ברציפות, המתאימה להרחבה ארוכת טווח במבחנה.

מבחינה אימונופנוטיפית, B-LCL-HROC277 מציג פרופיל של תאי B בוגרים ומופעלים, המאופיין בביטוי של CD19 ו-CD20, יחד עם רמות גבוהות של סמנים להפעלה ולהתבגרות כגון CD23 ו-CD80. ביטוי חזק של מולקולות MHC מסוג I ו-II מעיד על שמירה על יכולת הצגת אנטיגנים. בהתאם לשכפול הבודד, ניתן להבחין בביטוי משתנה של סמנים הקשורים להבחנה כגון CD27, CD38 או CD138, המשקפים שלבים שונים של התבגרות תאי B. התאים שליליים לסמני תאי T, מה שמאשר את הספציפיות של השושלת.

מבחינה תפקודית, B-LCL-HROC277 מפריש אימונוגלובולינים מסוג איזוטופ מוגדר (למשל, IgG, IgM או IgA), אשר נשארים יציבים במהלך תרבית ממושכת. הנוגדנים המופרשים ניתנים לאיסוף מתוצרי התרבית ומשמשים ליישומים במורד הזרם, כולל בדיקות קשירת אנטיגן, מחקרים לזיהוי תאי גידול או זיהוי אנטיגנים הקשורים למחלות. כמודל של תאי B שהונצחו על ידי EBV, B-LCL-HROC277 מספק פלטפורמה חזקה במבחנה לחקר תגובות חיסוניות הומורליות, הפעלה והבחנה של תאי B ומנגנונים המתווכים על ידי נוגדנים בהקשר של אימונולוגיה של גידולים או תגובות חיסוניות מערכתיות.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו