פורסם: 17 באוקטובר 2023 | נבדק לאחרונה: מאי 2026

תאי A431: מקור, תנאי גידול ויישומים מחקריים

A431 הוא קו תאים של קרצינומה אפידרמואידית אנושית שמקורו בעורה של מטופלת בת 85. זהו אחד מקווי התאים הנפוצים ביותר במחקר ביו-רפואי, במיוחד בביולוגיה של הסרטן, באימונו-אונקולוגיה, בדרמטולוגיה ובגילוי תרופות. תאי A431 מבטאים באופן מוגבר את קולטן גורם הגדילה האפידרמלי (EGFR) — עם כ-2–3 מיליון קולטנים לכל תא, פי 20–50 יותר מתאי אפיתל נורמליים — מה שהופך אותם למודל המבחנה המוביל במחקרים על איתות EGFR ובבדיקת טיפולים המכוונים ל-EGFR, כגון צטוקסימאב וארלוטיניב. תאי A431 זמינים באופן בלעדי מ-Cytion, בנק התאים האירופי העצמאי שלכם.

תאי A431: מאפיינים כלליים ומקור

סעיף זה סוקר את המאפיינים הביולוגיים העיקריים של קו התאים A431 — כולל מקורו, המורפולוגיה, הקריוטיפ והביטוי-היתר של EGFR, שהופכים אותו לבעל ערך ייחודי למחקר.

מקור והיסטוריה של קו התאים A431

• A431, קו תאים של סרטן עור אנושי, הושג מהאפידרמיס של אישה בת 85 שחלתה בקרצינומה אפידרמואידית [1]. הוא הוקם על ידי D.J. Giard et al., שפיתחו מספר קווי תאים נוספים מגידולים מוצקים.
• קו התאים הופץ באופן נרחב ואומת על ידי בנקים תאיים עצמאיים ברחבי העולם, כולל Cytion, כמודל מחקר אמין וניתן לשחזור.

מורפולוגיה וקריוטיפ של A431

• לתאי A-431 מורפולוגיה אפיתלית. הם מתאגדים ויוצרים אשכולות תאים בתנאי תרבית סטנדרטיים.
• קו התאים A431 של סרטן העור הוא היפרטריפלואידי. מספר הכרומוזומים המודאלי הוא 74, המופיע בכ-36% מהתאים. פליואידיות גבוהות יותר קיימות גם בכ-1% מאוכלוסיית התאים.

ביטוי EGFR בתאי A431

ביטוי-יתר של EGFR הוא המאפיין המגדיר של תאי A431 והסיבה העיקרית לשימוש הנרחב בהם. תאי A431 נושאים הגברה גנומית של לוקוס הגן EGFR, מה שמביא לכ-2–3 מיליון קולטני EGFR לכל תא — פי 20 עד 50 יותר מתאים אפיתל נורמליים. זה הופך את A431 לבקרה החיובית הסטנדרטית עבור:

• אימות נוגדני EGFR באמצעות Western blot, ציטומטריית זרימה ואימונופלואורסצנציה
• בדיקת נוגדנים מונוקלונליים המכוונים ל-EGFR, כגון צטוקסימאב ופאניטומומאב
• הערכת מעכבי טירוזין קינאז (TKI) של EGFR כגון ארלוטיניב, גפיטיניב ואפטיניב
• מחקר מסלולי איתות במורד הזרם, כולל PI3K/AKT/mTOR ו-RAS/MAPK/ERK

גידול המתפתח מתחת לעור וחודר לרקמות שמתחתיו — איור של מודל השתלת רקמה זרה A431.

► תיאור הסרטון (תמלול)

אנימציה זו מתארת את צמיחתם של תאי סרטן העור A431 (קרצינומה אפידרמואידית) מתחת לפני השטח של רקמת העור האנושי. מסת הגידול מתפשטת וחודרת לשכבות העור הסובבות, מה שממחיש את האופי הפולשני של קו תאים סרטניים זה ואת השימושיות שלו כמודל של שתל זר in vivo.

קו תאים A431: מידע על גידול

היכרות עם דרישות התרבית של קו תאים מאפשרת טיפול ללא בעיות. סעיף זה מפרט את זמן הכפלה, מצע הגידול, העברה, שימור בקירור ודרישות הבטיחות הביולוגית עבור קו התאים A431.

נקודות מרכזיות לגידול תאי A431

זמן הכפלה:

זמן הכפלת האוכלוסייה של תאי A431 נע בין 80 ל-100 שעות.

תאים דבקים או בתמיסה:

A431 הוא קו תאים דבק.

צפיפות זריעה:

1 x 10⁴ תאים/סמ^"ר הוא הצפיפות האידיאלית עבור קו התאים A431. תאים מגיעים לקונפלואנטיות תוך כ-4 ימים בצפיפות זו. תאים דבקים נשטפים ב-PBS (1×) ומוחבאים עם תמיסת מעבר Accutase, לאחר מכן מושעים מחדש במדיום תרבית, נצנטריפוגים ומועברים לצלחות חדשות.

מדיום גידול:

מדיום DMEM בתוספת 10% סרום עגלי (FBS), 4.5 גרם/ליטר גלוקוז, 1.0 מ"מ פירובט נתרן, 1.5 גרם/ליטר NaHCO₃ ו-4 מ"מ L-גלוטמין. יש להחליף את המדיום כל 2–3 ימים.

תנאי גידול:

תאי הסרטן A431 מגודלים באינקובטור לח עם 5% CO₂ בטמפרטורה של 37°C.

אחסון:

יש לאחסן במקפיא חשמלי או בשלב אדי של חנקן נוזלי בטמפרטורה הנמוכה מ-150°C- כדי לשמור על חיוניות התאים.

תהליך הקפאה ומצע:

CM-1 או CM-ACF הם המדיומים המומלצים להקפאת תאי A431. יש להשתמש בשיטת הקפאה איטית בקצב מבוקר (−1°C/min).

תהליך ההפשרה:

הפשיר תאי A431 קפואים במהירות באמבט מים בטמפרטורה של 37°C (40–60 שניות). כאשר נותרת גוש קרח קטן, הוסף מדיום תרבית וצנטריפוג. השב את התאים שנאספו לתמיסה והעבר אותם לצלחות תרבית.

רמת בטיחות ביולוגית:

רמת בטיחות ביולוגית 1 (BSL-1) מומלצת לטיפול בתרבויות A431.

תאי קרצינומה אפידרמואידית A431 היוצרים ספרואידים בצפיפות תאים שונה.

---

הזמינו תאי A431 למחקר
שלכם איכות מוסמכת • תואם תקן ISO • משלוח מהיר לכל העולם

יתרונות וחסרונות של קו התאים A431

קו התאים A431 בעל מאפיינים ייחודיים שהופכים אותו לשימושי ביותר אך גם מוגבל בהקשר מסוים. להלן סיכום מאוזן.

יתרונות

היתרונות העיקריים של קו התאים הסרטניים A431 הם:

ביטוי-יתר של EGFR

תאי A431 מבטאים יתר של EGFR בקצב של 2–3 מיליון קולטנים לכל תא, ומשמשים כבקרה חיובית סטנדרטית למחקרים על איתות EGFR ולאימות תרופות נגד EGFR (צטוקסימאב, ארלוטיניב, גפיטיניב).

יכולת גידול

תאי A431 הם טומוגניים ויוצרים בקלות גידולים בעכברים עם מערכת חיסונית מוחלשת, מה שהופך אותם לכלי אמין למודלים של סרטן בהשתלה זרה (xenograft) לחקר הדינמיקה של צמיחת הגידול ולהערכת טיפולים חדשים בסרטן in vivo.

מאופיינים היטב

עשרות שנים של מחקרים שפורסמו פירושם שתאי A431 מאופיינים בהרחבה ברמה הגנומית, הפרוטאומית והפנוטיפית, מה שמספק בסיס מדעי איתן לתכנון ניסויים.

היווצרות ספרואידים תלת-ממדיים

תאי A431 יוצרים בקלות ספרואידים תלת-ממדיים קומפקטיים בתנאי היצמדות נמוכים במיוחד, מה שהופך אותם לתואמים לפלטפורמות מודרניות לסינון אורגנואידים וספרואידים לצורך מחקרים על חדירת תרופות ויעילותן.

חסרונות

החסרונות של תאי A431 הם:

חריגות גנטיות

A431 הוא קו תאים סרטניים עם מוטציות גנטיות מצטברות ושינויים כרומוזומליים (היפרטריפלואידי, מספר מודאלי 74) שעשויים שלא לשקף באופן מלא את מאפייני הגידול המקוריים.

סיכון לזיהום מיקרוביאלי

A431 נוטה לזיהום חיידקי. שמירה על טכניקה אספטית קפדנית וביצוע בדיקות מיקופלסמה שגרתיות חיוניים לקבלת תוצאות אמינות.

אינו מייצג את כל הגידולים עם EGFR

מכיוון שהביטוי של EGFR ב-A431 נובע מהגברה גנטית ולא ממוטציה (כמו בסרטן ריאות), ייתכן שהממצאים אינם ניתנים ליישום ישיר בהקשרים של גידולים עם מוטציה ב-EGFR, כגון סרטן ריאות תאים לא קטנים (NSCLC).

יישומים מחקריים של תאי A431

קו התאים A431 נמצא בשימוש נרחב במגוון תחומי מחקר. הביולוגיה הייחודית של EGFR, היכולת לגרום לגידולים והגנום המאופיין היטב שלו הופכים אותו לאחד מקווי התאים הסרטניים האנושיים המגוונים ביותר הקיימים.

• ביולוגיה של הסרטן: A431 הוא כלי רב עוצמה לחקר המנגנונים התאיים והמולקולריים המניעים את צמיחת הסרטן, את הגרורות ואת הפלישה. מחקרים מיפו את מסלולי האיתות PI3K/AKT/mTOR ו-RAS/MAPK/ERK בקו תאים זה, והראו כי עיכובם גורם לאפופטוזיס בתאי הגידול העוריים של A431 [2, 3].
• בדיקת טיפול המכוון ל-EGFR: תאי A431 מהווים את תקן הייחוס להערכת תרופות נגד EGFR — נוגדנים מונוקלונליים (צטוקסימאב, פאניטומומאב) ו-TKI מולקולריים קטנים (ארלוטיניב, גפיטיניב, אפטניב, אוסימרטיניב).
• בדיקת תרופות והערכתן: תאי A431 משמשים להערכת תרופות אנטי-סרטניות חדשות. מחקר משנת 2022 שנערך על ידי Rahim et al. הדגים השפעות אנטי-פרוליפרטיביות חזקות של חלקיקי כסף ננו-מטריים שסונתזו ביוגנית מ-Alstonia angustiloba על תאי A431 [4].
• מודלים של שתלי גידול: תאי A431 הם ממאירים בעכברים עם חוסר חיסוני, מה שמאפשר מודלים של שתלים תת-עוריים ואורתוטופיים למחקרי יעילות in vivo. Lim et al. השתמשו בשתלים שמקורם ב-A431 כדי להעריך את ההשפעות הרדיוסנסיטיביות של EGF אקסוגני in vivo [5].
• מחקר בנושא רעילות לעור ודרמטולוגיה: תאי A431 נמצאים בשימוש נרחב על ידי חברות תרופות וקוסמטיקה להערכת רעילות עורית, חדירת העור ופרופילי הבטיחות של תרכובות למריחה מקומית.
• מודלים תלת-ממדיים של ספרואידים ואורגנואידים: תאי A431 יוצרים ספרואידים תלת-ממדיים קומפקטיים בתנאי היצמדות נמוכה במיוחד או טיפה תלויה, מה שמאפשר מחקרים רלוונטיים יותר מבחינה פיזיולוגית על חדירת תרופות ועמידות.
• אימות נוגדני EGFR: בשל צפיפות ה-EGFR הגבוהה במיוחד שלהם, תאי A431 מהווים את הביקורת החיובית הסטנדרטית לאימות נוגדני אנטי-EGFR ב-Western blot, אימונופלואורסצנציה, IHC וציטומטריית זרימה.

A431 לעומת קווי תאים אחרים של סרטן העור

בחירת קו התאים הנכון היא קריטית לתוקף הניסוי. להלן השוואה בין A431 לקווי תאים אחרים הנפוצים בסרטן העור ובסרטן הקשקשי:

מאפיין	A431	A375 (מלנומה)	SCC-25 (SCC אוראלי)	HaCaT (קרטינוציטים)
סוג הסרטן	קרצינומה אפידרמואידית	מלנומה ממאירה	קרצינומה של תאי קשקש אוראליים	קרטינוציט מהונדס
ביטוי EGFR	+++ (~2–3 מיליון לתא)	+ (נמוך)	++ (בינוני)	++ (בינוני)
יכולת גידול	כן	כן	כן	לא
מורפולוגיה	אפיתליאלי, דבק	בצורת ציר, דבק	אפיתליאלי, דבק	אפיתליאלי, דבק
BSL	1	1	1	1
שימוש עיקרי	מחקר EGFR, בדיקת תרופות נגד סרטן	ביולוגיה של מלנומה, מעכבי BRAF	סרטן הראש והצוואר, מחקרים בתחום הקרינה	ביולוגיה של העור, תפקוד המחסום

פרסומים מחקריים העוסקים בתאי A431

להלן מספר פרסומים משמעותיים שעברו ביקורת עמיתים המציגים את קו התאים A431 של קרצינומה בעור.

יעילותם של ננו-סיבים אלקטרוספונים העמוסים ב-PVA-AuNPs וב-PCL-Curcumin ביולוגיים ופעילותם האנטי-סרטנית כנגד קו תאי סרטן העור A431

פורסם ב-Materials Today Communications (2020). הערכת הפוטנציאל האנטי-סרטני של ננו-סיבים המכילים פולי-ε-קפרולקטון וכורכומין ו-AuNPs המכילים אלכוהול פוליוויניל נגד תאי סרטן A431.

miRNA-221 מקדם התקדמות של קרצינומה של תאי קשקש בעור על ידי מיקוד ב-PTEN

פורסם ב-Cellular & Molecular Biology Letters (2019). הוצע כי microRNA-221 ממלא תפקיד אונקוגני בקרצינומה של תאי קשקש בעור על ידי מיקוד בגן מדכא הגידול PTEN.

וינקריסטין פטרייתי מ-Eutypella spp-CrP14 המבודד מ-Catharanthus roseus גורם לאפופטוזיס בקו תאים A431 של קרצינומה קשקשית אנושית

פורסם ב-BMC Complementary Medicine and Therapies (2016). הוכח כי וינקריסטין מהפטרייה Eutypella spp–CrP14 גורם לאפופטוזיס בתאי A431.

ביטוי-יתר של CDC42SE1 בתאי A431 הפחית את התרבות התאים על ידי עיכוב מסלול Akt

פורסם ב-Cells (2019). זיהה את CDC42SE1 כסמן ביולוגי פוטנציאלי להתקדמות סרטן העור, כאשר דיכויו מקל על התפתחות הגידול בתאי A431.

מטפורמין מעכב את התרבות תאי A431 על ידי ויסות מסלול האיתות PI3K/Akt

פורסם ב-Experimental and Therapeutic Medicine (2015). הוכח כי מטפורמין מדכא את התרבות תאי A431 על ידי ויסות מסלול האיתות PI3K/Akt.

משאבים עבור קו תאים A431: פרוטוקולים, סרטונים ועוד

המשאבים הבאים מספקים הנחיות מעשיות לעבודה עם תאי A431 במעבדה.

• טרנספקציה של תאי A-431 — מדריך וידאו שלב אחר שלב לטרנספקציה של תאי סרטן A431.
• קו תאי הסרטן A431 — דף המוצר של Cytion — מידע מלא על תרבית תאים: מצע גידול, צפיפות זריעה, העברה, שימור בקריו ותעודות איכות.
• פרוטוקול לגידול תאי A431 — פרוטוקול חיצוני תמציתי לגידול קו התאים A431 מ-Bio-Protocol.
• עיון בכל קווי התאים של סרטן העור מ-Cytion — גלו את המגוון המלא של קווי התאים של סרטן העור הזמינים מ-Cytion.