RPMI 1640، مع: 2.0 مليمول/لتر من الجلوتامين المستقر، مع: 2.0 غ/لتر من NaHCO₃

وسط RPMI 1640، المعروف أيضًا باسم وسط RPMI، هو وسط زراعة خلايا متعدد الاستخدامات يُستخدم على نطاق واسع في الأبحاث البيولوجية لزراعة خلايا الثدييات المختلفة. وقد طوره جورج إي. مور، وروبرت إي. جيرنر، وإتش. أديسون فرانكلين في عام 1966 في مركز روزويل بارك الشامل للسرطان الشهير، وقد استمد هذا الوسط اسمه من أصله في معهد روزويل بارك التذكاري (RPMI).

صُممت وسط RPMI 1640 في البداية لدعم نمو خلايا اللوكيميا البشرية في كل من المزارع المعلقة والمزارع أحادية الطبقة، وقد تطورت من خلال التعديلات التي أجراها الباحثون والموردون التجاريون لتصبح مناسبة لمجموعة متنوعة من خلايا الثدييات. وهي متوافقة بشكل استثنائي مع سلالات خلوية مثل HeLa و Jurkat و MCF-7 و PC12 و PBMC والخلايا النجمية والأورام السرطانية.

يتميز وسط RPMI 1640 عن وسائط زراعة الخلايا الأخرى بتركيبته الفريدة. فهو يحتوي على كمية كبيرة من الفوسفات والأحماض الأمينية والفيتامينات. والجدير بالذكر أنه يشمل البيوتين وفيتامين B12 وPABA، وهي عناصر غير موجودة في وسط إيجل الأساسي الأدنى (Eagle's Minimal Essential Medium) أو وسط إيجل المعدل من دولبيكو (Dulbecco's Modified Eagle Medium). علاوة على ذلك، تتميز وسط RPMI 1640 بتركيزات مرتفعة بشكل ملحوظ من فيتامينات الإينوزيتول والكولين. ومع ذلك، فهي لا تحتوي على بروتينات أو دهون أو عوامل نمو. وبالتالي، غالبًا ما يتطلب الأمر إضافة 10% من مصل الأبقار الجنيني (FBS) لتوفير الظروف المثلى لنمو الخلايا.

يعتمد نظام التخزين المؤقت لوسط RPMI 1640 على بيكربونات الصوديوم ويتطلب بيئة تحتوي على 5-10٪ من ثاني أكسيد الكربون (CO₂) للحفاظ على درجة حموضة مناسبة من الناحية الفسيولوجية. كما أن إضافة عامل الاختزال «الجلوتاثيون» يميز هذا الوسط عن غيره.

مراقبة الجودة

• مُرشَّح معقم

التخزين ومدة الصلاحية

• يُخزن عند درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجة مئوية، بعيدًا عن الضوء.
• بمجرد فتح العبوة، يُخزن عند درجة حرارة 4°C ويُستخدم في غضون 6–8 أسابيع.

شروط الشحن

• درجة الحرارة المحيطة

التخزين

• يُحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة تتراوح بين +2 درجة مئوية و+8 درجة مئوية في مكان مظلم. تجنب التجميد والتسخين المتكرر إلى +37 درجة مئوية، لأن ذلك يقلل من جودة المنتج.
• لا تقم بتسخين الوسط إلى ما يزيد عن 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة غير خاضعة للرقابة مثل أجهزة الميكروويف.
• إذا كان سيتم استخدام جزء فقط من الوسط، فقم بسحب الكمية المطلوبة وتسخينها إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.

التركيب

الفئة	المكونات	التركيز (ملغم/لتر)
الأحماض الأمينية	الجليسين	10.00
	L-ألانيل-L-جلوتامين	434.40
	L-أرجينين	200.00
	L-أسباراجينH2O	56.82
	حمض L-الأسبارتيك	20.00
	L-سيستين 2HCl	65.20
	حمض L-الجلوتاميك	20.00
	L-هيستيدين HClH₂O	20.27
	L-هيدروكسي-L-برولين	20.00
	L-إيزولوسين	50.00
	L-ليوسين	50.00
	L-ليسين هيدروكلوريد	40.00
	L-ميثيونين	15.00
	L-فينيل ألانين	15.00
	L-برولين	20.00
	L-سيرين	30.00
	L-ثريونين	20.00
	L-تريبتوفان	5.00
	L-تيروزين 2Na2H₂O	28.83
	L-فالين	20.00
الفيتامينات	حمض p-أمينو بنزويك	1.00
	دي-بيوتين	0.20
	كلوريد الكولين	3.00
	بانتوثينات الكالسيوم D	0.25
	حمض الفوليك	1.00
	ميو-إينوزيتول	35.00
	النيكوتيناميد	1.00
	بيريدوكسين هيدروكلوريد	1.00
	الريبوفلافين	0.20
	ثيامين هيدروكلوريد	1.00
	فيتامينب12	0.005
الأملاح غير العضوية	Ca(NO₃)₂4H₂O	100.00
	KCl	400.00
	MgSO₄7H₂O	100.00
	NaCl	6000.00
	NaHCO₃	2000.00
	Na₂HPO₄	800.00
مكونات أخرى	D-جلوكوز	2000.00
	L-جلوتاثيون المختزل	1.00
	ملح الصوديوم للفينول الأحمر	5.30