الانتقال إلى المحتوى
خلايا CLS-439
الأنسجة
المثانة
المرض
الورم السرطاني
المرادفات
CLS439

المستندات

خلايا CLS-439

Cell line · رقم المنتج 300150

تم تحضيرها في عام 1998 بواسطة CLS من ورم سرطاني أولي في المثانة لرجل يبلغ من العمر 61 عامًا.

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف
تم إنشاؤه من سرطان المثانة الأولي لرجل يبلغ من العمر 61 عامًا في عام 1998 بواسطة CLS.
الأنسجة
المثانة
المرض
الورم السرطاني
المرادفات
  • CLS439

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية
زمن المضاعفة
35 ساعة

04المعرّفات

المرجع
CLS-439 (كتالوج سيليكون رقم 300150)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_5982

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
مكويز 5 أ، ث: 3.0 جم/لتر جلوكوز، ث: جلوتامين مستقر، ث: 2.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820200 أ)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
أزل الوسط واشطف الخلايا الملتصقة باستخدام PBS بدون الكالسيوم والمغنيسيوم (3-5 مل من PBS لكل T25، 5-10 مل لقوارير زراعة الخلايا T75). أضف TrypleExpress (1-2 مل لكل T25، 2.5 مل لكل قارورة زراعة خلايا T75)، ويجب تغطية صفيحة الخلية بالكامل. احتضنها في درجة الحرارة المحيطة لمدة 10 دقائق. يُعاد ترسيب الخلايا بعناية، وتكون إضافة الوسط اختيارية ولكنها ليست ضرورية، ويتم توزيعها في قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2 ستؤدي إلى طبقة متقاربة في حوالي 3 أيام
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
يجب أن ترتاح الخلايا لمدة لا تقل عن 24 ساعة بعد إذابة الجليد في درجة حرارة 37 درجة مئوية/5% من ثاني أكسيد الكربون
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
61 عامًا
الأصل العرقي
قوقازي