الانتقال إلى المحتوى
B-LCL-HROC130
الأنسجة
الدم المحيطي
المرض
الورم السرطاني
المرادفات
Bc HROC130

المستندات

B-LCL-HROC130

Cell line · رقم المنتج 302032

B-LCL-[اسم النموذج] هو خط خلوي ليمفوبلاستويدي بائي بشري تم إضفاء الخلود عليه بواسطة فيروس إبشتاين-بار (EBV)، وقد تم إنشاؤه من خلايا ليمفاوية بائية معزولة إما من ورم ...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

مخزون منخفض
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

B-LCL-[اسم النموذج] هو خط خلايا ليمفوبلاستويدية بشرية خالدة بفيروس إبشتاين-بار (EBV) تم إنشاؤه من خلايا ليمفاوية بائية معزولة من نسيج ورم أو دم محيطي لمريض بالغ. تم إنتاج الخلايا عن طريق العدوى خارج الجسم الحي بواسطة طبقة سطحية تحتوي على فيروس إبشتاين-بار مشتقة من خط خلايا المرموسيت B95/8 في وجود سيكلوسبورين A لقمع نمو الخلايا التائية والخلايا القاتلة الطبيعية. بعد عدة أسابيع من الاستزراع، تم تحقيق نمو مستقر للخلايا اللمفاوية، مما أدى إلى تكاثر مستمر لخلايا B أحادية النسيلة أو قليلة النسيلة مناسبة للتوسع طويل الأمد في المختبر.

من الناحية المناعية، يُظهر B-LCL-[MODEL NAME] ملفًا خلويًا ناضجًا ومُنشطًا يتميز بتعبير CD19 و CD20، إلى جانب مستويات عالية من علامات التنشيط والنضج مثل CD23 و CD80. يشير التعبير القوي لجزيئات MHC من الفئة الأولى والثانية إلى الحفاظ على القدرة على تقديم المستضد. اعتمادًا على النسخة الفردية، يمكن ملاحظة تعبير متغير لعلامات التمايز مثل CD27 أو CD38 أو CD138، مما يعكس مراحل مختلفة من نضج الخلايا البائية. الخلايا سلبية بالنسبة لعلامات الخلايا التائية، مما يؤكد خصوصية السلالة.

من الناحية الوظيفية، يفرز B-LCL-[MODEL NAME] غلوبولين مناعي من نوع محدد (مثل IgG أو IgM أو IgA)، والذي يظل مستقرًا خلال فترة الاستزراع الطويلة. يمكن جمع الأجسام المضادة المفرزة من طبقات السائل الفوقي للثقافة واستخدامها في تطبيقات لاحقة، بما في ذلك اختبارات ربط المستضدات، ودراسات التعرف على الخلايا السرطانية، أو تحديد المستضدات المرتبطة بالمرض. كنموذج للخلايا البائية المخلدة بفيروس EBV، يوفر B-LCL-[اسم النموذج] منصة قوية في المختبر لدراسة الاستجابات المناعية الخلطية، وتنشيط الخلايا البائية وتمايزها، والآليات التي تتوسطها الأجسام المضادة في سياق مناعة الأورام أو الاستجابات المناعية الجهازية.

الأنسجة
الدم المحيطي
المرض
الورم السرطاني
المرادفات
  • Bc HROC130

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
2

03الخصائص

المورفولوجيا
الخلايا الدائرية
نوع الخلية
أرومة لمفاوية ب

04المعرّفات

المرجع
B-LCL-HROC130 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 302032)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_B7FG

05التعبير والقابلية للإصابة

المستضدات السطحية
CD19
الفيروسات
المتحول: فيروس الورم الحليمي البشري

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
إضافة 10% من FBS المعطل بالحرارة إلى الوسط
إعادة الاستنبات
قم بتجانس معلق الخلايا في القارورة برفق عن طريق السحب لأعلى ولأسفل باستخدام الماصة، ثم خذ عينة تمثيلية لتحديد كثافة الخلايا لكل مل. قم بتخفيف المعلق للحصول على تركيز خلايا يبلغ 1 × 105 خلية/مل باستخدام وسط استزراع جديد، وقم بتقسيم المعلق المعدل إلى قوارير جديدة لمزيد من الاستزراع.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
العمر غير محدد
الأصل العرقي
قوقازي