Премини към съдържанието
HROC32 T3 M1
Тъкан
Colon ascendens, UICC IV, Създаден от ксенографт на първична тъкан на CRC, получен от пациент (Colon ascendens, TNM стадий T4N2M1R0L0V1, степен G2, Lk(n) + 9, Σ Lk(n) 14)
Заболяване
Аденокарцином
Място на метастазите
Отдалечени метастази (стадий IV по класификацията на UICC; TNM T4N2M1; конкретното място на отдалечените метастази не е документирано)
Синоними
HROC32x

Документи

HROC32 T3 M1

Cell line · Номер на продукта 300819

This is one cell line of a series of tumor cell lines which have been established by PD Dr. Michael Linnebacher from Primary CRC resection specimens since 20...

€800.00без ДДС и доставка
Наличността е ниска
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание
Това е една клетъчна линия от поредица туморни клетъчни линии, създадени от д-р Майкъл Линебахер от 2006 г. насам от първични резекционни проби от CRC. Тази клетъчна линия е получена от тумор в късен стадий на HROC32.
Тъкан
Colon ascendens, UICC IV, Създаден от ксенографт на първична тъкан на CRC, получен от пациент (Colon ascendens, TNM стадий T4N2M1R0L0V1, степен G2, Lk(n) + 9, Σ Lk(n) 14)
Заболяване
Аденокарцином
Място на метастазите
Отдалечени метастази (стадий IV по класификацията на UICC; TNM T4N2M1; конкретното място на отдалечените метастази не е документирано)
Приложения
Изследвания в областта на колоректалния рак; моделиране на колоректален рак в късен стадий; биология на PTEN-негативния колоректален рак; оценка на химиотерапията и целевата терапия; имунология на колоректалния рак; проучвания с ксенографти, получени от пациенти
Синоними
  • HROC32x

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
Без ГМО
Подробности относно статуса на ГМО
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line established by PD Dr. Linnebacher
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителни клетки
Туморогенен
Да, при имуносупресирани голи мишки
Плоидност
Анеуплоидни
Статус на MSI
MSS
Време за удвояване
30 часа

04Идентификатори

Източник
HROC32 T3 M1 (каталожен номер 300819 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1D07

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
PTEN
Експресия на антигена
CD15 +, CD24 +, CD44 +, CD55 +, CD58 +, CD50 +, CD 54 +, CD66acde +, CD71 +, CD102 +, CD326 + , CD80 - , CD86-, EpCAM +, HLA-A2 +
Мутационен профил
APCwt, p53R282W, K-RasG12A, N-Raswt, H-Raswt SNP rs12628 в кодон 27, PIK3CAst, BRafwt
Вируси
Не съдържа човешки патогенни вируси SV40, JC/BK, HBV, HCV, HIV.

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 3
Плътност на засяването
2 x 104 клетки/см2
Обновяване на течността
На всеки 3 до 5 дни
Възстановяване след размразяване
1 до 2 седмици
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
82 години
Етническа принадлежност
Кавказки