Медии и реагенти

40 продукти

Сортиране

Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

без ДДС и доставка

Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

€310.00

без ДДС и доставка

Cytion Endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850006

Усъвършенствана среда за растеж на ендотелиални клетки

Средата за растеж на ендотелиални клетки „Advanced“ се използва за култивиране на човешки ендотелиални клетки от големи съдове. Определени човешки рекомбинантни растежни фактори, включително VEGF и Long R3 IGF-1, заменят суровата добавка за растеж на ендотелиални клетки. Пълната среда съдържа фетално телешко серум, L-глутамин, хепарин, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, аскорбинова киселина и хидрокортизон. За по-бързо размножаване с по-високо съдържание на серум изберете среда за пролиферация на ендотелиални клетки. За формула без VEGF изберете „Среда за растеж на ендотелиални клетки“. Предлагаме средата като 500 мл базова среда, самостоятелно или заедно с добавките, като отделни компоненти или като предварително смесена „Supplement-Mix“. Отделните компоненти позволяват отделните фактори да бъдат регулирани или изключени, докато „Supplement-Mix“ се добавя в една стъпка. Базовата среда се предлага и без фенол червено в същите формати, което предотвратява смущения при флуоресцентни и колориметрични измервания, както и слабата естрогенподобна активност на фенол червеното. Добавките са необходими за употреба, като и двата формата на добавките се предлагат и поотделно. След добавянето им пълната среда съдържа 2 % FCS (10 мл на 500 мл базова среда).

€180.00

без ДДС и доставка

Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850019

Усъвършенствана среда за растеж на микросъдови ендотелни клетки

Средата за растеж на микросъдови ендотелни клетки „Advanced Microvascular Endothelial Cell Growth Medium“ се използва за култивиране на човешки микросъдови ендотелни клетки, например от дермата, белия дроб или сърцето. Определени човешки рекомбинантни растежни фактори заменят суровата добавка за растеж на ендотелни клетки. Пълната среда съдържа фетално телешко серум, L-глутамин, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, аскорбинова киселина и хидрокортизон. За формула с ECGS/H и без VEGF изберете среда за растеж на микросъдови ендотелиални клетки. Предлагаме средата като 500 мл базова среда, самостоятелно или заедно с добавките, като отделни компоненти или като предварително смесена „Supplement-Mix“. Отделните компоненти позволяват отделните фактори да бъдат регулирани или изключени, докато „Supplement-Mix“ се добавя в една стъпка. Базовата среда се предлага и без фенол червено в същите формати, което предотвратява смущения при флуоресцентни и колориметрични измервания, както и слабата естрогенподобна активност на фенол червеното. Добавките са необходими за употреба, като и двата формата на добавките се предлагат и поотделно. След добавяне на добавките пълната среда съдържа 5 % FCS (25 мл на 500 мл базова среда).

€200.00

без ДДС и доставка

Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

без ДДС и доставка

Cytion Chondrocyte growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850048

Среда за отглеждане на хондроцити

Средата за растеж на хондроцити се използва за размножаване на монослой от човешки и говежди хондроцити, например преди прехвърлянето им в култура върху пелети или скафолд. Предлагаме средата като 500 мл базова среда – самостоятелно или заедно с добавките, като отделни компоненти или като предварително смесена „Supplement-Mix“. Отделните компоненти позволяват отделните фактори да бъдат регулирани или изключени, докато „Supplement-Mix“ се добавя в една стъпка. Базовата среда се предлага и без фенол червено в същите формати, което предотвратява интерференция с флуоресцентни и колориметрични измервания, както и слабата естрогенподобна активност на фенол червеното. Добавките са необходими за употреба, като и двата формата на добавките се предлагат и поотделно. След добавянето им пълната среда съдържа 10 % FCS (50 мл на 500 мл базова среда).

€310.00

без ДДС и доставка

Cytion Defined fibroblast growth medium-maintenance, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850143

Определена среда за поддържане на фибробласти

Определената среда за поддържане на фибробласти е безсерумна, напълно дефинирана среда, която поддържа човешките фибробласти в стабилно състояние, вместо да стимулира бързото им размножаване. Тя е подходяща за изследвания на секретома, екстрацелуларната матрица и тестване на съединения, при които серумът би попречил. Пълната среда съдържа L-глутамин, човешки рекомбинантен bFGF и човешки рекомбинантен инсулин. За размножаване на фибробласти изберете среда за растеж на фибробласти. Предлагаме средата като 500 мл базова среда, самостоятелно или заедно с безсерумните добавки, като отделни компоненти или като предварително смесена „Supplement-Mix“. Отделните компоненти позволяват отделните фактори да бъдат регулирани или изключени, докато „Supplement-Mix“ се добавя в една стъпка. Добавките са необходими за употреба, като и двата формата на добавките се предлагат и поотделно.

€170.00

без ДДС и доставка

D-Glucose Solution (Dextrose Solution), 250 g/L

Volume: 50 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered D-(+)-Glucose Solution (Dextrose Solution) is a sterile, ready-to-use supplement containing the naturally occurring sugar D-(+)-glucose, a central component of cellular metabolism. Glucose is involved in essential biological processes such as energy production, glycosylation, and the formation of glycans that contribute to cellular structure and function. Application and Benefits This glucose solution is widely used as a supplement in cell culture media and in numerous cellular and molecular biology applications. As a primary carbon and energy source, glucose supports cell growth, proliferation, and metabolic activity. Its involvement in biosynthetic pathways also makes it critical for maintaining normal cellular physiology and experimental consistency. Formulation and Usage The solution is supplied at a high concentration of 250 g/L glucose, allowing flexible dilution into culture media according to experimental requirements. It is sterile-filtered to ensure suitability for contamination-sensitive applications. Store at +2°C to +8°C and handle aseptically to maintain product quality and stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€32.00

без ДДС и доставка

DMEM:Ham's F12 (1:1), тегл.: 3,1 g/L глюкоза, тегл.: 2,5 mM L-глутамин, тегл.: 15 mM HEPES, тегл.: 0,5 mM натриев пируват, тегл.: 1,2 g/L NaHCO3

DMEM:Ham's F12 е широко призната и широко използвана базова среда в клетъчните култури за биологични изследвания. Тя служи като основен източник на хранителни вещества за растежа на различни клетъчни линии от бозайници, особено когато се допълва с фетално телешко серум (FBS). Тази уникална формула съчетава модифицираната среда на Дълбеко (DMEM) и Ham's F-12 (Хранителна смес F-12 на Хам) в точно съотношение 1:1. Добавянето на L-глутамин допълнително подобрява състава ѝ. DMEM, произхождаща от минималната есенциална среда на Игъл (EMEM), предлага по-висока концентрация на аминокиселини и витамини в сравнение с предшественика си. За разлика от нея, средата на Хам F-12 се базира на средата на Хам F-10, като осигурява допълващ набор от есенциални компоненти. За да се подпомогне оптималният клетъчен растеж, обичайна практика е DMEM:Ham's F12 да се допълва с FBS при типична концентрация от 5–10%. Това добавяне е необходимо, тъй като средата не съдържа растежни хормони, липиди и протеини, които са от решаващо значение за клетъчното развитие. DMEM:Ham's F12 съдържа система за буфериране на рН и често се допълва с фенол червено – индикатор за рН. Култивираните клетки в DMEM:Ham's F12 или във всяка друга среда, използваща бикарбонатна буферна система, изискват контролирана среда с 5–10% CO₂, за да се поддържат подходящи нива на рН. Контрол на качеството • Стерилно филтрирана Съхранение и срок на годност • Съхранявайте при температура от +2 °C до +8 °C, защитено от светлина. • След отваряне съхранявайте при 4 °C и използвайте в рамките на 6–8 седмици. Условия за транспортиране • Околна температура Съхранение • Съхранявайте в хладилник при температура от +2 °C до +8 °C на тъмно. Избягвайте замразяване и често затопляне до +37 °C, тъй като това намалява качеството на продукта. • Не загрявайте средата над 37 °C и не използвайте неконтролирани източници на топлина, като например микровълнови печки. • Ако ще се използва само част от средата, извадете необходимото количество и го затоплете до стайна температура преди употреба. Състав Категория Съставки Концентрация (mg/L) Аминокиселини Глицин 18,75 L-аланин 4,45 L-аргинин HCl 147,50 L-аспарагин H₂O 7,50 L-аспарагинова киселина 6,65 L-цистеин HCl H₂O 17,56 L-цистин 2 HCl 31,29 L-глутаминова киселина 7,35 L-глутамин 365,00 L-хистидин HCl H₂O 31,48 L-изолевцин 54,47 L-лейцин 59,05 L-лизин HCl 91,25 L-метионин 17,24 L-фенилаланин 35,48 L-пролин 17,25 L-серин 26,25 L-треонин 53,45 L-триптофан 9,02 L-тирозин 2 Na 2 H₂O 55,79 L-валин 52,85 Витамини D-биотин 0,0035 Холин хлорид 8,98 D-калциев пантотенат 2,24 Фолиева киселина 2,66 мио-инозитол 12,60 Никотинамид 2,02 Пиридоксин HCl 0,031 Пиридоксал HCl 2,00 Рибофлавин 0,219 Тиамин HCl 2,17 Витамин В12 0,68 Неорганични соли CaCl₂·2 H₂O 154,50 CuSO₄·5 H₂O 0,0013 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,05 FeSO₄ 7 H₂O 0,417 KCl 311,80 MgCl₂ 6 H₂O 61,20 MgSO₄ 7 H₂O 100,00 NaCl 6996,00 NaHCO₃ 1200,00 Na₂HPO₄ 71,02 NaH₂PO₄·2 H₂O 70,87 ZnSO₄ 7 H₂O 0,432 Други компоненти D-глюкоза 3151,00 Хипоксантин 2,40 HEPES 3574,50 Линоленова киселина 0,042 Липоева киселина 0,105 Натриева сол на фенол червено 8,63 Путресцин 2 HCl 0,081 Натриев пируват 55,00 Тимидин 0,365

€25.00

без ДДС и доставка

DMEM, тегл.: 4,5 г/л глюкоза, тегл.: 4 мМ L-глутамин, тегл.: 3,7 г/л NaHCO₃, тегл.: 1,0 мМ натриев пируват

DMEM (модифицирана среда на Дълбеко) е изключително универсална и широко използвана базова среда, предназначена да подпомага растежа на разнообразен спектър от клетки на бозайници в биологичните изследвания. Тя служи като идеална среда за култивиране на първични фибробласти, неврони, глиални клетки, HUVEC, гладкомускулни клетки, както и популярни клетъчни линии като HeLa, 293, Cos-7 и PC-12. Това, което отличава DMEM от другите среди, е уникалният ѝ състав. Тя съдържа впечатляващо четирикратно увеличение на концентрацията на аминокиселини и витамини в сравнение с оригиналната минимална есенциална среда на Игъл. Първоначално разработена с ниско съдържание на глюкоза (1 g/L) и натриев пируват, DMEM често се използва с по-високи нива на глюкоза, със или без натриев пируват. Важно е да се отбележи, че DMEM не съдържа протеини, липиди или растежни фактори, което налага добавянето на допълнителни съставки. За да се постигне оптимален растеж, обичайният подход е DMEM да се допълва с 10% фетално телешко серум (FBS). Освен това DMEM използва буферна система на базата на натриев бикарбонат, което изисква среда с 5–10% CO₂, за да се поддържа физиологичното pH. Модифицираната среда на Дълбеко (DMEM) е високо ценена сред дефинираните среди за клетъчна и тъканна култура, като отговаря на нуждите за растеж на различни фенотипи на адхезивни клетки. Тя надминава оригиналната среда на Игъл, разработена през 50-те години на миналия век за култивиране на пилешки клетки, благодарение на подобрената допълнителна формула, известна като модификацията на Дълбеко. Тази модификация значително повишава съдържанието на избрани аминокиселини и витамини до четири пъти в сравнение с оригиналната среда. В областта на клетъчната култура DMEM играе жизненоважна роля като среда за растеж на различни видове клетки, включително първични клетки, стволови клетки и трансформирани клетки. Изследователите също така използват модифицираната версия на DMEM за широк спектър от изследователски приложения, като откриване на лекарства, тъканно инженерство и изучаване на клетъчните сигнални пътища. Контрол на качеството • Стерилно филтрирана Съхранение и срок на годност • Съхранявайте при температура от +2 °C до +8 °C, защитено от светлина. • След отваряне съхранявайте при 4 °C и използвайте в рамките на 6–8 седмици. Условия за транспортиране • Околна температура Съхранение • Съхранявайте в хладилник при температура от +2 °C до +8 °C на тъмно. Избягвайте замразяване и често затопляне до +37 °C, тъй като това намалява качеството на продукта. • Не загрявайте средата над 37 °C и не използвайте неконтролирани източници на топлина, като например микровълнови печки. • Ако ще се използва само част от средата, извадете необходимото количество и го затоплете до стайна температура преди употреба. Състав Категория Съставки Концентрация (mg/L) Аминокиселини Глицин 30,00 L-аргинин HCl 84,00 L-цистин 2 HCl 62,57 L-глутамин 584,00 L-хистидин HCl H₂O 42,00 L-изолевцин 105,00 L-лейцин 105,00 L-лизин HCl 146,00 L-метионин 30,00 L-фенилаланин 66,00 L-серин 42,00 L-треонин 95,00 L-триптофан 16,00 L-тирозин 2 Na 2H2O 103,79 L-валин 94,00 Витамини Холин хлорид 4,00 D-калциев пантотенат 4,00 Фолиева киселина 4,00 мио-инозитол 7,20 Никотинамид 4,00 Пиридоксал HCl 4,00 Рибофлавин 0,40 Тиамин HCl 4,00 Неорганични соли CaCl₂·2 H₂O 265,00 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,10 KCl 400,00 MgSO₄ 7H₂O 200,10 NaCl 6400,00 NaHCO₃ 3700,00 NaH₂PO₄·2H₂O 141,73 Други компоненти D-глюкоза 4500,00 Натриева сол на фенол червено 15,90 Натриев пируват 110,00

€25.00

без ДДС и доставка

EMEM (MEM Eagle), съдържание: 2 mM L-глутамин, съдържание: 2,2 g/L NaHCO₃, съдържание: EBSS

Минималната есенциална среда на Игъл (EMEM) е една от най-широко използваните базови среди за култивиране на широк спектър от клетки на бозайници, по-специално адхезивни клетъчни линии. Първоначално разработена от Хари Игъл, тази класическа формула съдържа незаменимите аминокиселини, витамини и неорганични соли, необходими за поддържане на растежа както на първични клетки, така и на установени клетъчни линии при стандартни условия на култивиране. Тази готова за употреба, стерилно филтрирана течна формула е допълнена с балансиран солен разтвор на Ърл (EBSS), 2 mM L-глутамин, D-глюкоза (1,0 g/L) и 2,2 g/L натриев бикарбонат (NaHCO₃), което я прави подходяща за употреба в инкубатор с контролирана атмосфера от CO₂ (обикновено 5 % CO₂). Включеният фенол червен действа като индикатор за рН, което позволява удобно визуално наблюдение на състоянието на средата по време на клетъчната култура. Основни характеристики • Класическа формула на MEM на Игъл с балансиран солен разтвор на Ърл (EBSS) • Включен 2 mM L-глутамин – готов за незабавна употреба • 2,2 g/L натриев бикарбонат – буфериран за инкубация при 5 % CO₂ • С D-глюкоза (1,0 g/L) като основен източник на въглерод • С фенол червено като индикатор за pH • Без HEPES и без натриев пируват • Стерилно филтрирана течна среда, готова за употреба • pH 7,0 – 7,6 Типични приложения EMEM поддържа култивирането на голямо разнообразие от клетъчни линии на бозайници, включително HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 и много първични клетки. Често срещани приложения включват: • Рутинна поддръжка и размножаване на адхезивни клетъчни линии • Работни процеси за размножаване на вируси и производство на ваксини • Приложения за цитотоксичност и биологични тестове • Изследвания за трансфекция и експресия на протеини • Фундаментални изследвания в клетъчната и молекулярната биология За оптимален клетъчен растеж EMEM обикновено се допълва с 5–10 % фетално телешко серум (FBS) и, в зависимост от клетъчната линия, с неесенциални аминокиселини (NEAA) и антибиотици като пеницилин/стрептомицин. Работна практика и съхранение Съхранявайте затворената бутилка при температура от +2 °C до +8 °C, защитена от светлина. След отваряне използвайте при асептични условия. L-глутаминът в разтвор подлежи на постепенно разграждане – за най-добри резултати препоръчваме средата да се използва в рамките на 4 седмици след отваряне или да се допълва с пресен L-глутамин преди употреба, ако се съхранява за по-дълъг период. Оставете средата да се затопли до 37 °C, преди да я добавите към клетките. Качество Произведено съгласно строги стандарти за качество. Всяка партида се тества за стерилност, рН, осмолалност и нива на ендотоксини, за да се гарантира постоянна ефективност при приложения в клетъчни култури. Технически характеристики Спецификация Подробности Тип на продуктаMEM Категория на продуктаСреди за клетъчна култура ФорматТечност СтерилниДа Размер500 мл L-глутаминС L-глутамин (2 mM) ГлюкозаС глюкоза (1,0 g/L) Натриев бикарбонатС NaHCO₃ (2,2 g/L) HEPESБез HEPES Натриев пируватБез натриев пируват Фенол червеноС фенол червено Солев разтворБалансиран солев разтвор на Ърл (EBSS) pH7,0 – 7,6 Съдържание на ендотоксиниНе е посочено Съхранениеот +2 °C до +8 °C Състав (състав на литър)

€25.00

без ДДС и доставка

Cytion Endothelial cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850176

Среда за растеж на ендотелиални клетки

Средата за растеж на ендотелиални клетки е стандартната среда за култивиране на човешки ендотелиални клетки от големи съдове, като пъпната вена, пъпната артерия, сафената вена и аортата. Пълната среда съдържа фетално телешко серум, L-глутамин, ECGS/H (добавка за растеж на ендотелиални клетки с хепарин), EGF, bFGF и хидрокортизон. За дефинирани рекомбинантни растежни фактори, включително VEGF вместо ECGS/H, изберете „Advanced Endothelial Cell Growth Medium“. Предлагаме средата като 500 мл базова среда, самостоятелно или заедно с добавките, като отделни компоненти или като предварително смесена „Supplement-Mix“. Отделните компоненти позволяват отделните фактори да бъдат коригирани или премахнати, докато „Supplement-Mix“ се добавя в една стъпка. Базовата среда се предлага и без фенол червено в същите формати, което предотвратява смущения при флуоресцентни и колориметрични измервания, както и слабата естрогенподобна активност на фенол червеното. Добавките са необходими за употреба, като и двата формата на добавките се предлагат и поотделно. След добавяне на добавките пълната среда съдържа 2 % FCS (10 мл на 500 мл базова среда).

€200.00

без ДДС и доставка

Cytion Endothelial cell proliferation medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850002

Среда за пролиферация на ендотелни клетки

Средата за пролиферация на ендотелиални клетки е предназначена за бързо размножаване на човешки ендотелиални клетки от големи съдове, като пъпната вена, пъпната артерия, сафената вена, аортата, коронарната и белодробната артерия. Пълната среда съдържа фетално телешко серум, L-глутамин, хепарин, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, аскорбинова киселина и хидрокортизон. За по-ниско съдържание на серум изберете усъвършенстваната среда за растеж на ендотелиални клетки. Предлагаме средата като 500 мл базова среда, самостоятелно или заедно с добавките, като отделни компоненти или като предварително смесена „Supplement-Mix“. Отделните компоненти позволяват отделните фактори да бъдат регулирани или изключени, докато „Supplement-Mix“ се добавя в една стъпка. Базовата среда се предлага и без фенол червено в същите формати, което предотвратява смущения при флуоресцентни и колориметрични измервания, както и слабата естрогенподобна активност на фенол червеното. Добавките са необходими за употреба, като и двата формата на добавките се предлагат и поотделно. След добавяне на добавките пълната среда съдържа 7 % FCS (35 мл на 500 мл базова среда).

€170.00

без ДДС и доставка

500 ml bottle Fetal Bovine Serum South America Origin (FBS)

FBS Южна Америка 500 мл

Произведено от южноамерикански говеда, това стерилно филтрирано фетално говеждо серум (FBS) осигурява стабилни резултати при клетъчни култури. Преди пускането на пазара всяка партида се тества за стерилност, микоплазма и говежди вируси. Освен това всяка партида се оценява, за да се потвърди способността ѝ да поддържа растежа на HEK293 и CHO клетки. Серумът се предлага в обеми от 50 мл и 500 мл, а при поискване може да бъде предоставен сертификат за анализ (CoA), специфичен за съответната партида.

€310.00

без ДДС и доставка

50 ml bottle Fetal Bovine Serum South America Origin (FBS)

FBS South Origin 50 мл

€32.00

без ДДС и доставка

FBS US 500 мл

Това стерилно филтрирано фетално телешко серум (FBS), произведено в Съединените щати, осигурява стабилна основа за приложения в областта на клетъчните култури. Всяка партида преминава през проверка за качество по отношение на стерилност, микоплазма и телешки вируси. Освен това всяка партида е биологично валидирана, за да се потвърди способността ѝ да поддържа растежа на клетъчните линии CHO и HEK293. Серумът се предлага в опаковки с обем 50 мл и 500 мл. Сертификати за анализ (CoA) за конкретната партида се предоставят при поискване.

€506.00

без ДДС и доставка

500 ml bottle Fetal Bovine Serum US Origin (FBS)

FBS US Origin 50 мл

€52.00

без ДДС и доставка

Cytion Fibroblast growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850066

Среда за растеж на фибробласти

Средата за растеж на фибробласти се използва за култивиране на човешки фибробласти, например от дермата или венците. За безсерумна поддръжка при определени условия изберете „Определена среда за поддръжка на фибробласти“. Предлагаме средата като 500 мл базова среда, самостоятелно или заедно с добавките, като отделни компоненти или като предварително смесена „Supplement-Mix“. Отделните компоненти позволяват отделните фактори да бъдат регулирани или изключени, докато „Supplement-Mix“ се добавя в една стъпка. Базовата среда се предлага и без фенол червено в същите формати, което предотвратява смущения при флуоресцентни и колориметрични измервания, както и слабата естрогенподобна активност на фенол червеното. Добавките са необходими за употреба, като и двата формата на добавките се предлагат и поотделно. След добавяне на добавките пълната среда съдържа 10 % FCS (50 мл на 500 мл базова среда).

€180.00

без ДДС и доставка

Среда за замразяване CM-1 – 100 мл

Freeze Medium CM-1 на Cytion е най-съвременна среда за криоконсервация, разработена да гарантира най-високо ниво на жизнеспособност и функционалност на клетките след размразяване. Тази универсална среда е подходяща за широк спектър от клетъчни типове, включително както човешки, така и животински клетки, което я превръща в незаменим инструмент за разнообразни изследователски приложения. Създадена с прецизно балансирана комбинация от криопротективи и основни хранителни вещества, Freeze Medium CM-1 минимизира образуването на ледени кристали и клетъчния стрес по време на процеса на замразяване, като по този начин запазва клетъчната цялост. Основните характеристики на Freeze Medium CM-1 включват: • Широка съвместимост: Ефективна за широк спектър от видове клетки, включително първични клетки, стволови клетки и установени клетъчни линии. • Висока жизнеспособност: Оптимизирана за максимално възстановяване и жизнеспособност на клетките след размразяване, което гарантира надеждни експериментални резултати. • Готов за употреба: Удобно подготвен и стерилизиран за незабавно приложение, което намалява времето за подготовка и риска от замърсяване. • Повишена стабилност: Поддържа постоянни характеристики при стандартни условия на криоконсервация, като гарантира възпроизводими резултати. • Дълъг срок на годност: CM-1 е готова за употреба среда за криоконсервация, съдържаща серум, която може да се съхранява в хладилник до една година. Използване на CM-1 за замразяване на клетки За да използвате CM-1 за замразяване както на адхезивни, така и на суспензионни клетки, следвайте следните стъпки: • За адхезивни клетки ги измийте и отделете от културалния субстрат. За клетки в суспензия преминете директно към следващата стъпка. • Пребройте клетките, за да се уверите, че са в подходяща концентрация. • Центрофугирайте клетките, за да ги утаите, след което ги ресуспендирайте в средата за замразяване CM-1. • Прехвърлете ресуспендираните клетки в криовиали. • Използвайте метод за бавно замразяване, преди да прехвърлите клетките за дългосрочно съхранение. Метод Описание Стъпки ❄️ Ръчно замразяване Метод, при който стъпка по стъпка се намалява температурата, за да се гарантира жизнеспособността на клетките. 1️⃣ Поставете клетките в замразяваща среда във фризер при 4 °C за 40 минути. 2️⃣ Прехвърлете ги във фризер при -80 °C за 24 часа. 3️⃣ Съхранявайте клетките в течен азот за дългосрочно съхранение. ❄️ Използване на Mr. Frosty Удобно устройство, което позволява контролирана скорост на замразяване без електроенергия. 1️⃣ Подгответе клетките в криоепруветки със среда за замразяване. 2️⃣ Поставете криоепруветките в контейнера на Mr. Frosty. 3️⃣ Съхранявайте при -80°C в продължение на 24 часа, преди да ги преместите в течен азот. ❄️ Фризер с контролирана скорост на замразяване Високопрецизен фризер на Thermo Fisher или други производители, предназначен за контролирано понижаване на температурата. 1️⃣ Програмирайте устройството да понижава температурата постепенно. 2️⃣ Поставете подготвените клетки във фризера. 3️⃣ След цикъла на замразяване прехвърлете клетките в течен азот. • Съхранявайте криовиалите при температури под -130 °C или в течен азот за дългосрочно съхранение. Съставки • Съдържа FBS, DMSO, глюкоза, соли • Буферираща способност: pH = 7,2 до 7,6 Средата за замразяване CM-1 на Cytion предлага надеждно решение за криоконсервация, осигуряващо висока жизнеспособност и функционалност на клетките след размразяване за широк спектър от изследователски приложения.

€99.00

без ДДС и доставка

Среда за замразяване CM-1 – 50 мл

Freeze Medium CM-1 на Cytion е най-съвременна среда за криоконсервация, разработена да гарантира най-високо ниво на жизнеспособност и функционалност на клетките след размразяване. Тази универсална среда е подходяща за широк спектър от клетъчни типове, включително както човешки, така и животински клетки, което я превръща в незаменим инструмент за разнообразни изследователски приложения. Създадена с прецизно балансирана комбинация от криопротективи и основни хранителни вещества, Freeze Medium CM-1 минимизира образуването на ледени кристали и клетъчния стрес по време на процеса на замразяване, като по този начин запазва клетъчната цялост. Основните характеристики на Freeze Medium CM-1 включват: • Широка съвместимост: Ефективна за широк спектър от видове клетки, включително първични клетки, стволови клетки и установени клетъчни линии. • Висока жизнеспособност: Оптимизирана за максимално възстановяване и жизнеспособност на клетките след размразяване, което гарантира надеждни експериментални резултати. • Готов за употреба: Удобно подготвен и стерилизиран за незабавно приложение, което намалява времето за подготовка и риска от замърсяване. • Повишена стабилност: Поддържа постоянни характеристики при стандартни условия на криоконсервация, като осигурява възпроизводими резултати. • Дълъг срок на годност: CM-1 е готова за употреба среда за криоконсервация, съдържаща серум, която може да се съхранява в хладилник до една година. Използване на CM-1 за замразяване на клетки За да използвате CM-1 за замразяване както на адхезивни, така и на суспензионни клетки, следвайте следните стъпки: • За адхезивни клетки ги измийте и отделете от културалния субстрат. За клетки в суспензия преминете директно към следващата стъпка. • Пребройте клетките, за да се уверите, че са в подходяща концентрация. • Центрофугирайте клетките, за да ги утаите, след което ги ресуспендирайте в средата за замразяване CM-1. • Прехвърлете ресуспендираните клетки в криовиали. • Използвайте метод за бавно замразяване, преди да прехвърлите клетките за дългосрочно съхранение. Метод Описание Стъпки ❄️ Ръчно замразяване Метод, при който стъпка по стъпка се намалява температурата, за да се гарантира жизнеспособността на клетките. 1️⃣ Поставете клетките в замразяваща среда във фризер при 4 °C за 40 минути. 2️⃣ Прехвърлете ги във фризер при -80 °C за 24 часа. 3️⃣ Съхранявайте клетките в течен азот за дългосрочно съхранение. ❄️ Използване на Mr. Frosty Удобно устройство, което позволява контролирана скорост на замразяване без електроенергия. 1️⃣ Подгответе клетките в криоепруветки със среда за замразяване. 2️⃣ Поставете криоепруветките в контейнера на Mr. Frosty. 3️⃣ Съхранявайте при -80°C в продължение на 24 часа, преди да ги прехвърлите в течен азот. ❄️ Фризер с контролирана скорост Високопрецизен фризер на Thermo Fisher или други производители, предназначен за контролирано понижаване на температурата. 1️⃣ Програмирайте устройството да понижава температурата постепенно. 2️⃣ Поставете подготвените клетки във фризера. 3️⃣ След цикъла на замразяване прехвърлете клетките в течен азот. • Съхранявайте криовиалите при температури под -130 °C или в течен азот за дългосрочно съхранение. Съставки • Съдържа FBS, DMSO, глюкоза, соли • Буферираща способност: pH = 7,2 до 7,6 Средата за замразяване CM-1 на Cytion предлага надеждно решение за криоконсервация, осигуряващо висока жизнеспособност и функционалност на клетките след размразяване за широк спектър от изследователски приложения.

€59.00

без ДДС и доставка

Ham's F12K Medium, съдържание: 2,0 mM L-глутамин, съдържание: 2,0 mM натриев пируват, съдържание: 2,5 g/L NaHCO₃

Представяме средата „Ham’s F-12K (Kaighn’s)“, специализирана модификация на средата „Ham’s F-12“, разработена, за да отговори на специфичните изисквания на биологичните изследвания. Тази усъвършенствана среда предлага явни предимства, като подобрява култивирането на първични човешки хепатоцити, както и на чернодробни клетки от плъхове и пилета, особено в условия с намалено съдържание на серум. Средата Ham's F-12K (Kaighn's) е внимателно формулирана за оптимизиране на условията за клетъчна култура. Тя се отличава с обогатен състав, осигуряващ повишени нива на основни компоненти като аминокиселини и натриев пируват, както и допълнителни елементи, включително путресцин, тимидин, хипоксантин и цинк. Тези добавки позволяват на изследователите да допълват средата с минимално количество серум или с дефинирани компоненти за конкретни видове клетки, което улеснява създаването на прецизни експериментални условия. Важно е да се отбележи, че средата на Хам F-12K (на Кайн) не съдържа протеини или растежни фактори. Следователно често е необходимо добавянето на растежни фактори и фетално телешко серум (FBS), което позволява на изследователите да адаптират средата към изискванията на конкретните си клетъчни линии. За оптимални резултати концентрацията на FBS трябва да бъде внимателно оптимизирана за всяка клетъчна линия, като по този начин се осигуряват оптимален растеж и функционалност. За поддържане на физиологичното pH средата на Хам F-12K (на Кайн) използва буферна система на базата на натриев бикарбонат (2,5 g/L), което налага поддържането на контролирана среда с 5–10% CO₂ по време на култивирането. Това гарантира, че pH на средата остава в идеалния диапазон за клетъчен растеж и жизнеспособност. Контрол на качеството • pH = 7,2 ± 0,02 при 20–25 °C. • Всяка партида е тествана за стерилност и липса на микоплазма и бактерии. Съхранение • Съхранявайте в хладилник при температура от +2 °C до +8 °C на тъмно. Замразяването, както и затоплянето до +37 °C, намаляват качеството на продукта. • Не загрявайте средата до температура над 37 °C и не използвайте неконтролируеми източници на топлина (например микровълнови печки). • Ако ще се използва само част от средата, извадете това количество от бутилката и го затоплете до стайна температура. • Срокът на годност за всички среди, с изключение на основната среда, е 8 седмици от датата на производство. Състав Съставки mg/L Неорганични соли Калциев хлорид x 2H₂O 135,24 Меден(II) сулфат х 5H₂O 0,00 Железен(II) сулфат x 7H₂O 0,83 Магнезиев хлорид х 6H₂O 105,72 Магнезиев сулфат х 7H₂O 394,49 Калиев хлорид 283,29 Калиев дихидрогенфосфат 58,52 Натриев хлорид 7597,20 безводен динатриев хидрогенфосфат 115,02 Цинков сулфат х 7H₂O 0,14 Други съставки D(+)-глюкоза безводна 1260,00 Хипоксантин 4,08 DL-α-липоева киселина 0,21 Фенол червено 3,00 Путресцин х 2HCl 0,32 Натриев пируват 220,00 NaHCO₃ 2500,00 Тимидин 0,73 Аминокиселини L-аланин 17,82 L-аргинин x HCl 421,40 L-аспарагин x H₂O 30,02 L-аспарагинова киселина 26,62 L-цистеин x HCl x H₂O 70,24 L-глутамин 292,20 L-глутаминова киселина 29,42 Глицин 15,01 L-хистидин x HCl x H₂O 41,92 L-изолевцин 7,87 L-лейцин 26,24 L-лизин x HCl 73,04 L-метионин 8,95 L-фенилаланин 9,91 L-пролин 69,06 L-серин 21,02 L-треонин 23,82 L-триптофан 4,08 L-тирозин 10,87 L-валин 23,42 Витамини D(+)-биотин 0,07 D-калциев пантотенат 0,48 Холин хлорид 13,96 Фолиева киселина 1,32 мио-инозитол 18,02 Никотинамид 0,04 Пиридоксин х HCl 0,06 Рибофлавин 0,04 Тиамин х HCl 0,34 Витамин В12 1,36

€108.00

без ДДС и доставка

Ham's F12 Medium, съдържание: 1,0 mM стабилен глутамин, съдържание: 1,0 mM натриев пируват, съдържание: 1,176 g/L NaHCO₃

Средата „Ham’s F-12“, известна още като „Ham’s F-12 Nutrient Mix“, е широко използвана базова среда, разработена специално за клетъчни култури. Тя се използва широко за безсерумно засяване на единични клетки от яйчници на китайски хамстер (CHO), белодробни клетки и L-клетки от мишки. Освен това Ham’s F-12 е предпочитаната среда за тест за клонална токсичност (CTA). Едно от забележителните му предимства е способността да поддържа клетъчния растеж без необходимост от добавяне на серум. Това елиминира потенциалната интерференция, причинена от серумните компоненти, като гарантира последователни и надеждни експериментални резултати. Чрез осигуряването на безсерумна културална среда средата Ham's F-12 предоставя на изследователите по-голям контрол върху техните изследвания. Друга ключова характеристика на средата Ham’s F-12 е нейната пригодност за засяване на единични клетки. Това я прави отличен избор за разнообразни клетъчни линии, включително CHO-клетки, белодробни клетки и L-клетки от мишки. Оптимизираният хранителен състав на средата улеснява ефективното прикрепване и растеж на отделните клетки, което позволява създаването на хомогенни клетъчни култури с подобрена възпроизводимост. Освен това средата Ham's F-12 е призната като предпочитаната среда за теста за клонална токсичност (CTA). Този тест играе решаваща роля при оценката на цитотоксичните ефекти на веществата върху клетките. Чрез използването на средата Ham's F-12 в CTA изследователите могат точно да оценят въздействието на различни съединения или лечения върху отделни клетки, което предоставя ценна информация за токсикологичните профили. Контрол на качеството • pH = 7,2 ± 0,02 при 20–25 °C. • Всяка партида е тествана за стерилност и липса на микоплазма и бактерии. Съхранение • Съхранявайте в хладилник при температура от +2 °C до +8 °C на тъмно. Замразяването и затоплянето до +37 °C намаляват качеството на продукта. • Не загрявайте средата до температура над 37°C и не използвайте неконтролируеми източници на топлина (например микровълнови печки). • Ако ще се използва само част от средата, извадете това количество от бутилката и го затоплете до стайна температура. • Срокът на годност за всички среди, с изключение на основната среда, е 8 седмици от датата на производство. Състав Съставки mg/L Неорганични соли Калциев хлорид х 2H₂O 44,00 Меден(II) сулфат х 5H₂O 0,00 Железен(II) сулфат x 7H₂O 0,83 Магнезиев хлорид х 6H₂O 122,00 Калиев хлорид 223,65 Натриев хлорид 7599,00 безводен динатриев хидрогенфосфат 142,04 Цинков сулфат х 7H₂O 0,86 Други съставки D(+)-глюкоза безводна 1801,60 Хипоксантин 4,08 Линоленова киселина 0,08 DL-α-липоева киселина 0,21 Фенол червено 1,20 Путресцин х 2HCl 0,16 Натриев пируват 110,00 Тимидин 0,73 NaHCO₃ 1176,00 Аминокиселини L-аланин 8,91 L-аргинин x HCl 210,70 L-аспарагин x H₂O 15,01 L-аспарагинова киселина 13,31 L-цистеин x HCl x H₂O 35,12 L-аланил-L-глутамин 217,30 L-глутаминова киселина 14,71 Глицин 7,51 L-хистидин x HCl x H₂O 20,96 L-изолевцин 3,94 L-лейцин 13,12 L-лизин x HCl 36,54 L-метионин 4,48 L-фенилаланин 4,96 L-пролин 34,53 L-серин 10,51 L-треонин 11,91 L-триптофан 2,04 L-тирозин 5,44 L-валин 11,71 Витамини D(+)-биотин 0,01 D-калциев пантотенат 0,24 Холин хлорид 13,96 Фолиева киселина 1,32 мио-инозитол 18,02 Никотинамид 0,04 Пиридоксин х HCl 0,06 Рибофлавин 0,04 Тиамин х HCl 0,34 Витамин В12 1,36

€25.00

без ДДС и доставка

HEPES Buffer Solution (1M)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered HEPES Buffer Solution (1 M), also known as N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid, is a zwitterionic organic buffering agent widely used in cell culture media. It is designed to maintain stable pH conditions in the physiological range of 6.7 to 8.6, supporting optimal cellular function during in vitro applications. Application and Benefits HEPES provides reliable buffering capacity in cell culture systems, particularly when cells are handled outside a CO₂ incubator. The addition of 10–25 mM HEPES to culture media offers enhanced pH stability during extended manipulation periods, helping to maintain consistent experimental conditions. This buffer is membrane-impermeable, has minimal interference with biochemical reactions, and demonstrates strong chemical and enzymatic stability. These properties make it suitable for a wide range of cell culture and biochemical applications. Formulation and Usage The solution is supplied as a 1 M concentrate prepared in cell culture–grade water and is sterile-filtered for use in contamination-sensitive environments. It can be diluted to the desired working concentration depending on application requirements. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to preserve product integrity. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

без ДДС и доставка

IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

без ДДС и доставка

Среди за клетъчни култури: Общ преглед

В областта на биологичните науки една от най-важните методики е клетъчната култура. Под „клетъчна култура“ се разбира извличането на клетки, тъкани или органи от животно или растение и последващото им имплантиране в изкуствена среда, благоприятна за тяхното оцеляване и/или растеж. Основните изисквания към средата за оптимално развитие на клетките са контролирана температура, субстрат за прикрепване на клетките, подходяща среда за растеж и инкубатор, който поддържа оптималното pH и осмолалност. Клетките трябва да разполагат с тези условия, за да могат да се развият до пълния си потенциал.

Изборът на подходяща среда за растеж за култивиране in vitro е етапът в клетъчната култура, който е едновременно най-критичен и най-важен. Средата за растеж, известна още като културална среда, е течност или гел, формулиран така, че да стимулира развитието на организмите на микроскопично, клетъчно или растително ниво. Средата, използвана за култивиране на клетки, често съдържа достатъчно количество енергия и вещества, които регулират клетъчния цикъл. Основните компоненти на културалната среда включват аминокиселини, витамини, неорганични соли, глюкоза и серум. Серумът се добавя към средата, тъй като действа като източник на растежни фактори, хормони и фактори за прикрепване. Освен че осигурява хранителни вещества, средата допринася и за поддържането на нивата на рН и осмолалността.

Видове среди, използвани в клетъчната култура

Както човешките, така и животинските клетки могат да се отглеждат както в изкуствена или синтетична среда, така и в изцяло естествена среда, допълнена с природни елементи. По-долу ще ви представим обзор на различните видове среди, които са налични към момента.

Естествени среди

В естествените среди се срещат само биологични течности, които съществуват в естественото си състояние. Естествените среди са много полезни и лесни за култивирането на широка гама от видове животински клетки. Липсата на разбиране за точните компоненти, съставляващи естествените среди, е основният фактор, допринасящ за ниската повторяемост на резултатите, получени при използването на естествени среди.

Изкуствени среди

Приготвянето на изкуствени или синтетични среди включва добавянето на хранителни вещества (както органични, така и неорганични), серумни протеини, въглехидрати, кофактори, витамини и соли, както и газови фази на O₂ и CO₂ [1].

Разработени са различни видове изкуствени среди, за да изпълняват една или повече от следните функции: 1) Незабавно оцеляване (балансиран солев разтвор с точно определено рН и осмотично налягане). 2) Продължително оцеляване (балансиран солев разтвор, допълнен с различни състави от органични химикали и/или серум). 3) Неограничено развитие. 4) Специализирани функции.

Съществуват четири различни класификации на изкуствените среди:

Среди, съдържащи серум

Най-често срещаният вид добавка в средите, използвани за отглеждане на животински клетки, е фетално телешко серум. То се добавя към културалната среда като евтина добавка, за да се постигнат възможно най-добрите условия за растеж. Освен че действа като преносител или хелатор на нестабилни или неразтворими във вода хранителни вещества, хормони и растежни фактори, инхибитори на протеази и други вещества, серумът също така свързва и неутрализира вредни молекули.

Среда без серум

Наличието на серум в средите има редица недостатъци и може да доведе до сериозни грешки при интерпретацията на резултатите в имунологичните изследвания [2, 3]. Създадени са различни видове безсерумни среди [4, 5]. Тези среди обикновено са специално формулирани, за да поддържат култивирането на един-единствен тип клетки, като например Knockout Serum Replacement и Knockout DMEM от Thermo Fisher Scientific, както и средата mTESR от Stem Cell Technologies [6], предназначена за стволови клетки [7].

Освен това тези среди съдържат определени количества пречистени растежни фактори, липопротеини и други протеини, които иначе обикновено се осигуряват от серума [8]. Тези среди често се наричат „дефинирани културални среди“, тъй като съставните им компоненти са добре изучени.

Химически дефинирани среди

Тези среди включват ултрачисти неорганични и органични компоненти, които не са били замърсени по никакъв начин. Те могат да включват и добавки от чисти протеини, като например растежни фактори.

Генетичната модификация на бактерии или дрожди, заедно с добавянето на определени мастни киселини, витамини, холестерол и аминокиселини, води до производството на техните съставни части [9].

Среди без протеини

Безпротеиновите среди са тези, които изобщо не съдържат протеини, а вместо това включват само непротеинови елементи. В сравнение със средите с добавен серум, използването на среди без добавени протеини спомага за по-голяма клетъчна пролиферация и протеинова експресия и улеснява пречистването на всеки продукт, получен в последващ процес [10–12]. Протеинът не се включва в формулировки като MEM и RPMI-1640. При необходимост обаче може да се добави протеинова добавка.

Културални среди и техните основни компоненти

Търговските културални среди могат да се закупят под формата на прах или течност и често съдържат разнообразни хранителни вещества, като аминокиселини, глюкоза, соли, витамини и други хранителни добавки.

Нуждите от тези компоненти са различни за всяка клетъчна линия, а тези различия са причината за голямото разнообразие от формулировки на среди. Всеки компонент отговаря за определена функция, която ще бъде описана в следващите параграфи:

Буферни системи

За да се поддържат оптимални условия за растеж, pH трябва да се контролира, което често се извършва чрез една от двете буферни системи:

Естествена буферна система

Съотношението CO₂/H₂CO₃ в атмосферата е равно на това в средата, което създава естествен буферен механизъм. За да се запази този естествен буферен механизъм, културите трябва да се поддържат във въздушна среда с 5–10% CO₂, което често се постига чрез използване на CO₂ инкубатор. Едно от най-големите предимства на използването на естествен буфер е, че той е евтин и безопасен.

HEPES

Химичното буфериране с помощта на цвитериона HEPES има по-голяма буферна способност в диапазона на pH 7,2–7,4 и не изисква регулирана газова среда. За определени видове клетки по-голяма доза HEPES може да бъде вредна. Средите, съдържащи HEPES, са също така много по-податливи на фототоксичните ефекти на флуоресцентната светлина [13].

Фенол червено

Индикаторът за рН фенол червено често се включва в търговски достъпните културални среди, което позволява непрекъснато наблюдение на рН. При размножаването на клетките метаболитите, произвеждани от тях, предизвикват промяна в рН и съответно промяна в цвета на средата. Фенол червено оказва двоен ефект върху цвета на средата, като я оцветява в жълто при кисело pH и в лилаво при алкално pH. pH 7,4, оптималната стойност за клетъчна култура, кара средата да изглежда флуоресцентно червена.

Фенол червено обаче има няколко недостатъка: Първо, фенол червено може да имитира действието на редица стероидни хормони, предимно естроген [14]. Поради това при изследване на естроген-чувствителни клетки, като например тъкан от млечната жлеза, се препоръчва среда без фенол червено. Натриево-калиевият баланс се нарушава от присъствието на фенол червено в няколко безсерумни формулировки. Добавянето на серум или говежди хипофизен хормон към средите може да неутрализира този ефект [15]. На трето място, откриването при експерименти с проточна цитометрия се затруднява от присъствието на фенол червено.

Неорганични соли

Средите, съдържащи неорганични соли, като натриеви, калиеви и калциеви йони, спомагат за поддържането на осмотичното равновесие и регулират мембранния потенциал.

Аминокиселини

Тъй като аминокиселините са основните съставни части на протеините, те са незаменим компонент на всяка културална среда за клетъчен растеж, която някога е била създадена. Тъй като клетките не са в състояние сами да произвеждат определени аминокиселини, е важно културалната среда да съдържа незаменими аминокиселини. Те са необходими за пролиферацията на клетките, а концентрацията, в която се съдържат, определя максималната клетъчна плътност, която може да бъде постигната. По-специално, L-глутаминът, една незаменима аминокиселина, е от особено голямо значение.

L-глутаминът функционира като вторичен източник на енергия за метаболизма и доставя азот за производството на NAD, NADPH и нуклеотиди. Тъй като L-глутаминът е нестабилна аминокиселина, която с времето се превръща във форма, която клетките не могат да усвоят, той трябва да се добавя към средата.

Освен това в средата могат да се добавят неесенциални аминокиселини, за да се възстановят тези, които са били изразходвани по време на процеса на растеж. Растежът на клетките се ускорява, а жизнеспособността им се повишава, когато средата за растеж се допълва с неесенциални аминокиселини.

Въглехидрати

Въглехидратите под формата на захари са основният източник на енергия. Много от средите съдържат също малтоза и фруктоза, в допълнение към по-разпространените захари – глюкоза и галактоза.

Протеини и пептиди

Албуминът, трансферинът и фибронектинът са най-често използваните протеини и пептиди. Те са особено важни в среди, които не съдържат серум. Албуминът, трансферинът, апротининът, фетуинът и фибронектинът са някои от протеините, които могат да се открият в серума, който е богат източник на протеини.

Албуминът е основният протеин в кръвта и неговата функция е да свързва и транспортира различни вещества, включително вода, соли, свободни мастни киселини, хормони и витамини, между различните органи и клетки. Способността на албумина да се свързва с химични вещества го прави ефективен кандидат за отстраняване на вредни съединения от средата, в която се култивират клетките.

Апротининът е защитен агент в системите за клетъчна култура, тъй като е стабилен при неутрално и кисело рН, както и устойчив на високи температури и на разрушаването, което може да бъде причинено от протеолитични ензими. Той е способен да инхибира редица серинови протеази, включително трипсин, наред с други.

Фетуинът е гликопротеин, който може да бъде открит в по-големи количества в серума на плода и новородените животни в сравнение със серума на възрастните. В допълнение към това той действа като инхибитор на сериновите протеази. Протеинът фибронектин е основен компонент в процеса на клетъчната адхезия. Трансферинът е протеин, който транспортира желязо и отговаря за доставянето на желязо до клетъчните мембрани.

Мастни киселини и липиди

Те играят решаваща роля в безсерумната среда, когато липсва серум.

Витамини

Многобройни витамини са необходими за развитието и пролиферацията на клетките. Витамините не могат да се произвеждат в достатъчни количества от клетките и затова са незаменими в тъканните култури като хранителни добавки.

При клетъчната култура серумът е основният източник на витамини; обаче средите се обогатяват и с различни витамини, за да бъдат подходящи за конкретен тип клетки. Най-често витамините от група В се използват за стимулиране на растежа.

Микроелементи

Химични елементи като мед, цинк, селен и междинни съединения на трикарбоксилната киселина са известни като микроелементи. Микроелементите често се добавят към среди, които не съдържат серум, за да заменят тези, които обикновено се съдържат в серума. Тези елементи са важни химични компоненти, необходими за здравословното развитие на клетките. Много биохимични реакции зависят от определени микроелементи, като например ензимната активност.

Добавки към средата

Пълната среда за растеж, препоръчвана за определени клетъчни линии, се нуждае от допълнителни компоненти, които липсват в базовите среди и серума. Тези хранителни добавки подпомагат клетъчния растеж и нормалната метаболитна функция.

Въпреки че хормоните, растежните фактори и сигналните молекули са от съществено значение за правилното размножаване на конкретни клетъчни линии, винаги трябва да се спазват следните предпазни мерки: Тъй като добавянето на добавки може да промени осмолалността на пълната среда за растеж, което може да попречи на развитието на клетките, винаги е препоръчително да се провери осмолалността след добавянето на добавки. За по-голямата част от клетъчните линии оптималната осмолалност варира между 260 и 320 mOSM/kg.

Антибиотици

Антибиотиците често се използват за потискане на развитието на бактериални и гъбични замърсители [16], въпреки че не са необходими за клетъчния растеж. Тъй като антибиотиците могат да прикрият замърсяване с микоплазма и резистентни бактерии, рутинното им използване не се препоръчва при клетъчни култури [17, 18].

Освен това антибиотиците могат да нарушат метаболизма на свръхчувствителните клетки. Често се използват комбинациите от пеницилин и стрептомицин, произведени от MilliporeSigma и Life Technologies. Плазмоцин е бил използван при култивирането на глиомните клетъчни линии TS603, TS516 и BT260 [19] и е доказано, че е ефективен при отстраняването на микоплазмена контаминация (20).

Серум

В серума се съдържат албумини, растежни фактори и инхибитори на растежа. Серумът е един от най-важните компоненти на средата за клетъчна култура, тъй като осигурява аминокиселини, протеини, витамини (особено мастноразтворими витамини като А, D, Е и К), въглехидрати, липиди, хормони, растежни фактори, минерали и микроелементи.

Често се използва серум от фетални и телешки източници, за да се стимулира развитието на култивираните клетки. Феталният серум е богат източник на растежни фактори и е подходящ за клониране на клетки и развитието на чувствителни клетки. Поради намалените си способности за стимулиране на растежа телешкият серум се използва в експерименти за контактна инхибиция. Обикновено културалните среди съдържат от 2% до 10% серум. Добавянето на серум към културалната среда служи за следните цели [21]:

Серумът доставя необходимите за клетките хранителни вещества (както в разтвор, така и свързани с протеини).
В серума са включени няколко растежни фактори и хормони, участващи в стимулирането на растежа и специализираната клетъчна активност.
То предоставя много свързващи протеини, като албумин и трансферин, които транспортират други химични вещества в клетката. Например, албуминът доставя мазнини, витамини, хормони и др. в клетките.
То осигурява също така протеини, като фибронектин, които увеличават клетъчната адхезия към субстрата. Освен това, то произвежда елементи за разпространение, които подпомагат разширяването на клетките преди деленето.
То доставя инхибитори на протеазите, които предотвратяват протеолизата в клетките.
Съдържа също минерали като Na+, K+, Zn2+ и Fe2+.
Той повишава вискозитета на средата, като по този начин предпазва клетките от механични увреждания по време на разбъркването на суспензионната култура.
Той действа и като буфер.

Източници

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Хранене на животински клетки в тъканна култура; първоначални проучвания върху синтетична среда. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Бърза адсорбция на компонент от фетално телешко серум от клетки на бозайници в култура. Потенциален източник на артефакти в проучванията на антисера срещу клетъчно-специфични антигени. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Сула К., Драбер П., Нуза К. Добавянето на серум към средата, използвана за приготвяне на клетъчни суспензии, като възможен източник на артефакти при клетъчно-медиирани реакции, изследвани посредством теста с поплитеалния лимфен възел. J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] Мариани Е., Мариани А., Монако М., Лали Е., Витале М., Факини А. Търговски безсерумни среди: растеж на хибридоми и производство на моноклонални антитела. J Immunol Methods. 1991;145:175-83

[5] Barnes D, Sato G. Методи за отглеждане на култивирани клетки в безсерумна среда. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Ю Х., Лу С., Гасиор К., Сингх Д., Васкес Санчес С., Тапиа О. и др. Шапероните HSP70 пренасят TDP-43 без РНК в анизотропни интрануклеарни течни сферични обвивки. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, и др. Стареенето, предизвикано от синдрома на Даун, нарушава ядрената архитектура на невронните предшественици. Cell Stem Cell. 2022;29:116-130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Пълно заместване на серума с албумин, трансферин и соеви липиди в култури от В-лимфоцити, реагиращи на липополизахариди. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Систематично усъвършенстване на химически дефинирана среда без протеини за растеж на хибридоми и производство на моноклонални антитела. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] Darfler F. Среда без протеини за растеж на хибридоми и други клетки на имунната система. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Barnes D, Sato G. Клетъчна култура без серум: обединяващ подход. Cell. 1980;22:649-55

[12] Hamilton W, Ham R. Клонален растеж на клетъчни линии от китайски хамстер в безпротеинови среди. In Vitro. 1977;13:537-47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Анализ на цитотоксичните ефекти на изложена на светлина културална среда, съдържаща HEPES. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7

[14] Бертоа И., Каценеленбоген Ж., Каценеленбоген Б. Фенол червено в средите за тъканни култури е слаб естроген: последствия за изследването на естроген-чувствителни клетки в култура. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] Karmiol S. Разработване на безсерумни среди. В: Master JRW, редактор. Клетъчна култура на животни, 3-то изд. Оксфорд: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Използване на антибиотици в среди за клетъчни култури. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Разпространение и контрол на микоплазмена инфекция в клетъчни култури. In Vitro. 1976;12:643-8

[18] Мастърс Дж., Стейси Г. Смяна на средата и пасажиране на клетъчни линии. Nat Protoc. 2007;2:2276-84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M и др. Хистоновата деметилаза KDM6A директно усеща кислорода, за да контролира хроматина и съдбата на клетката. Science. 2019;363:1217-1222

[20] Мола Каземиха В., Азари С., Аманзаде А., Бонакдар С., Шоджаеи Могадам М., Хабиби Анбухи М. и др. Ефективност на Plasmocin™ върху различни клетъчни линии на бозайници, инфектирани с моликути, в сравнение с често използвани антибиотици в клетъчни култури: местен опит. Cytotechnology. 2011;63:609-20

[21] Краг Хансен У. Молекулни аспекти на свързването на лиганда със серумния албумин. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53