Pāriet uz saturu

Mediji un reaģenti

40 produkti

Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€310.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Cytion Endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850006

Uzlabota endotēlija šūnu augšanas barotne

„Advanced Endothelial Cell Growth Medium“ tiek izmantots cilvēka endotēlija šūnu kultivēšanai no lielajiem asinsvadiem. Definēti cilvēka rekombinantie augšanas faktori, tostarp VEGF un Long R3 IGF-1, aizstāj neattīrīto endotēlija šūnu augšanas piedevu. Pilnā barotne satur teļa embriju serumu, L-glutamīnu, heparīnu, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, askorbīnskābi un hidrokortizonu. Lai panāktu ātrāku šūnu vairošanos ar augstāku seruma saturu, izvēlieties endotēlija šūnu proliferācijas barotni. Ja nepieciešams preparāts bez VEGF, izvēlieties „Endothelial Cell Growth Medium”. Mēs piedāvājam šo barotni kā 500 ml bāzes barotni — atsevišķi vai kopā ar piedevām, kas pieejamas gan kā atsevišķas sastāvdaļas, gan kā jau sajaukts „Supplement-Mix”. Atsevišķās sastāvdaļas ļauj pielāgot vai izlaist atsevišķus faktorus, savukārt „Supplement-Mix” tiek pievienots vienā darbības posmā. Bāzes barotne ir pieejama arī bez fenolsarkana tajos pašos iepakojumos, kas novērš traucējumus fluorescences un kolorimetriskajos mērījumos, kā arī fenolsarkana vājo estrogēnveidīgo iedarbību. Lietošanai ir nepieciešami papildinājumi, un abi papildinājumu formāti ir pieejami arī atsevišķi. Pēc papildinājumu pievienošanas gatavā barotne satur 2 % FCS (10 ml uz 500 ml bāzes barotnes).

€180.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850019

Uzlabota mikrovaskulāro endotēlija šūnu augšanas barotne

„Advanced Microvascular Endothelial Cell Growth Medium“ tiek izmantots cilvēka mikrovaskulāro endotēlija šūnu kultivēšanai, piemēram, no dermas, plaušām vai sirds. Definēti cilvēka rekombinantie augšanas faktori aizstāj neattīrīto endotēlija šūnu augšanas piedevu. Pilnā barotne satur teļa embriju serumu, L-glutamīnu, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, askorbīnskābi un hidrokortizonu. Lai iegūtu preparātu ar ECGS/H un bez VEGF, izvēlieties mikrovaskulāro endotēlija šūnu augšanas barotni. Mēs piedāvājam barotni kā 500 ml bāzes barotni — atsevišķi vai kopā ar piedevām, vai nu kā atsevišķas sastāvdaļas, vai kā iepriekš sajauktu piedevu maisījumu (Supplement-Mix). Atsevišķās sastāvdaļas ļauj pielāgot vai izlaist atsevišķus faktorus, savukārt piedevu maisījumu pievieno vienā darbībā. Bāzes barotne ir pieejama arī bez fenolsarkana tajos pašos formātos, kas novērš traucējumus fluorescences un kolorimetriskajos mērījumos, kā arī fenolsarkana vājo estrogēnveidīgo iedarbību. Lietošanai ir nepieciešami papildinājumi, un abi papildinājumu formāti ir pieejami arī atsevišķi. Pēc piedevu pievienošanas gatavā barotne satur 5 % FCS (25 ml uz 500 ml bāzes barotnes).

€200.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Cytion Chondrocyte growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850048

Hondrocītu augšanas barotne

Hondrocītu augšanas barotni izmanto cilvēka un liellopu hondrocītu monoslāņa paplašināšanai, piemēram, pirms pārnesšanas uz granulu vai skeleta kultūru. Mēs piedāvājam šo barotni kā 500 ml bāzes barotni — atsevišķi vai kopā ar piedevām, kas pieejamas gan kā atsevišķas sastāvdaļas, gan kā jau sajaukts „Supplement-Mix” maisījums. Atsevišķās sastāvdaļas ļauj pielāgot vai izlaist atsevišķus faktorus, savukārt piedevu maisījumu pievieno vienā darbībā. Bāzes barotne ir pieejama arī bez fenolsarkana tajos pašos iepakojumos, kas novērš traucējumus fluorescences un kolorimetriskajos mērījumos, kā arī fenolsarkana vājo estrogēnveidīgo iedarbību. Lietošanai ir nepieciešami papildinājumi, un abi papildinājumu formāti ir pieejami arī atsevišķi. Pēc papildinājumu pievienošanas gatavā barotne satur 10 % FCS (50 ml uz 500 ml bāzes barotnes).

€310.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Cytion Defined fibroblast growth medium-maintenance, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850143

Definēta fibroblastu uzturēšanas barotne

„Defined Fibroblast Maintenance Medium“ ir bezseruma, pilnībā definēta barotne, kas uztur cilvēka fibroblastus stabilā stāvoklī, nevis veicina to strauju vairošanos. Tā ir piemērota sekretoma, ekstracelulārās matricas un savienojumu testēšanai gadījumos, kad serums varētu traucēt eksperimentu norisi. Pilnā barotne satur L-glutamīnu, cilvēka rekombinantā bFGF un cilvēka rekombinantā insulīnu. Fibroblastu vairošanai izvēlieties fibroblastu augšanas barotni. Mēs piedāvājam šo barotni kā 500 ml bāzes barotni — atsevišķi vai kopā ar bezseruma piedevām, kas pieejamas gan kā atsevišķas sastāvdaļas, gan kā jau sajaukts piedevu maisījums (Supplement-Mix). Atsevišķās sastāvdaļas ļauj pielāgot vai izlaist atsevišķus faktorus, savukārt „Supplement-Mix” tiek pievienots vienā darbībā. Papildinājumi ir nepieciešami lietošanai, un abi papildinājumu veidi ir pieejami arī atsevišķi.

€170.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

D-Glucose Solution (Dextrose Solution), 250 g/L

Volume: 50 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered D-(+)-Glucose Solution (Dextrose Solution) is a sterile, ready-to-use supplement containing the naturally occurring sugar D-(+)-glucose, a central component of cellular metabolism. Glucose is involved in essential biological processes such as energy production, glycosylation, and the formation of glycans that contribute to cellular structure and function. Application and Benefits This glucose solution is widely used as a supplement in cell culture media and in numerous cellular and molecular biology applications. As a primary carbon and energy source, glucose supports cell growth, proliferation, and metabolic activity. Its involvement in biosynthetic pathways also makes it critical for maintaining normal cellular physiology and experimental consistency. Formulation and Usage The solution is supplied at a high concentration of 250 g/L glucose, allowing flexible dilution into culture media according to experimental requirements. It is sterile-filtered to ensure suitability for contamination-sensitive applications. Store at +2°C to +8°C and handle aseptically to maintain product quality and stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€32.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO₃

DMEM:Ham’s F12 ir plaši atzīta un bieži izmantota pamata barotne šūnu kultūrās bioloģiskajos pētījumos. Tā kalpo kā galvenais barības vielu avots dažādu zīdītāju šūnu līniju augšanai, jo īpaši, ja tai pievieno liellopu augļa serumu (FBS). Šī unikālā formula precīzā 1:1 attiecībā apvieno Dulbecco modificēto Eagle barotni (DMEM) un Hama F-12 (Hama barības vielu maisījumu F-12). L-glutamīna pievienošana vēl vairāk uzlabo tās sastāvu. DMEM, kas izstrādāts, pamatojoties uz Eagle’s Minimal Essential Medium (EMEM), salīdzinājumā ar savu priekšteci piedāvā paaugstinātu aminoskābju un vitamīnu koncentrāciju. Savukārt Ham’s F-12 ir balstīts uz Ham’s F-10 barotni, nodrošinot papildu nepieciešamo sastāvdaļu kopumu. Lai nodrošinātu optimālu šūnu augšanu, parasti DMEM:Ham's F12 papildina ar FBS, parasti 5–10 % koncentrācijā. Šis papildinājums ir nepieciešams, jo barotnē trūkst augšanas hormonu, lipīdu un proteīnu, kas ir būtiski šūnu attīstībai. DMEM:Ham's F12 satur pH buferu sistēmu un bieži tiek papildināts ar fenolsarkano, kas ir pH indikators. Kultivētām šūnām DMEM:Ham's F12 vidē vai jebkurā vidē, kurā izmanto bikarbonāta buferu sistēmu, ir nepieciešama kontrolēta CO₂ vide (5–10 %), lai uzturētu atbilstošu pH līmeni. Kvalitātes kontrole • Sterili filtrēts Uzglabāšana un derīguma termiņš • Uzglabāt +2 °C līdz +8 °C temperatūrā, pasargājot no gaismas. • Pēc atvēršanas uzglabāt 4 °C temperatūrā un izlietot 6–8 nedēļu laikā. Piegādes nosacījumi • Vides temperatūra Uzglabāšana • Uzglabājiet ledusskapī temperatūrā no +2 °C līdz +8 °C tumsā. Izvairieties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37 °C, jo tas pazemina produkta kvalitāti. • Nesildiet barotni virs 37 °C un nelietojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis. • Ja jāizmanto tikai daļa no barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai. Sastāvs Kategorija Sastāvdaļas Koncentrācija (mg/l) Aminoskābes Glicīns 18,75 L-alanīns 4,45 L-arginīna HCl 147,50 L-asparagīns H₂O 7,50 L-asparagīnskābe 6,65 L-cisteīns HCl H₂O 17,56 L-cistīns 2 HCl 31,29 L-glutamīnskābe 7,35 L-glutamīns 365,00 L-histidīna HCl H₂O 31,48 L-izoleicīns 54,47 L-leicīns 59,05 L-lizīns HCl 91,25 L-metionīns 17,24 L-fenilalanīns 35,48 L-prolīns 17,25 L-serīns 26,25 L-treonīns 53,45 L-triptofāns 9,02 L-tirozīns 2 Na 2 H₂O 55,79 L-valīns 52,85 Vitamīni D-biotīns 0,0035 Holīna hlorīds 8,98 D-kalcija pantotenāts 2,24 Folijskābe 2,66 mio-inozitols 12,60 Nikotinamīds 2,02 Piridoksīna HCl 0,031 Piridoksāls HCl 2,00 Riboflavīns 0,219 Tiamīna HCl 2,17 B12 vitamīns 0,68 Neorganiskie sāļi CaCl₂·2H₂O 154,50 CuSO₄·5H₂O 0,0013 Fe(NO₃)₃·9H₂O 0,05 FeSO₄ 7 H₂O 0,417 KCl 311,80 MgCl₂ 6 H₂O 61,20 MgSO₄ 7 H₂O 100,00 NaCl 6996,00 NaHCO₃ 1200,00 Na₂HPO₄ 71,02 NaH₂PO₄·2H₂O 70,87 ZnSO₄ 7 H₂O 0,432 Citas sastāvdaļas D-glikoze 3151,00 Hipoksantīns 2,40 HEPES 3574,50 Linolskābe 0,042 Lipoiskābe 0,105 Fenola sarkanais nātrija sāls 8,63 Putrescīns 2 HCl 0,081 Nātrija piruvāts 55,00 Timidīns 0,365

€25.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

DMEM, masa: 4,5 g/l glikozes, masa: 4 mM L-glutamīna, masa: 3,7 g/l NaHCO₃, masa: 1,0 mM nātrija piruvāta

DMEM (Dulbecco modificētā Eagle barotne) ir ļoti universāla un plaši izmantota pamatbarotne, kas paredzēta dažādu zīdītāju šūnu augšanas nodrošināšanai bioloģiskajos pētījumos. Tas ir ideāls barotne primāro fibroblastu, neironu, gliālo šūnu, HUVEC, gludo muskuļu šūnu, kā arī tādu populāru šūnu līniju kā HeLa, 293, Cos-7 un PC-12 kultivēšanai. To, kas atšķir DMEM no citām barotnēm, ir tās unikālais sastāvs. Salīdzinājumā ar sākotnējo Eagle’s Minimal Essential Medium tajā ir četrreiz lielāka aminoskābju un vitamīnu koncentrācija. Sākotnēji DMEM tika izstrādāts ar zemu glikozes saturu (1 g/l) un nātrija piruvātu, taču to bieži izmanto ar augstāku glikozes līmeni — gan ar nātrija piruvātu, gan bez tā. Jāatzīmē, ka DMEM nesatur proteīnus, lipīdus vai augšanas faktorus, tāpēc ir nepieciešama to papildināšana. Lai panāktu optimālu augšanu, parasti DMEM papildina ar 10 % liellopu augļa seruma (FBS). Turklāt DMEM izmanto nātrija bikarbonāta buferu sistēmu, kam fizioloģiskā pH līmeņa uzturēšanai nepieciešama vide ar 5–10 % CO₂ saturu. Dulbecco modificētais Eagle barotne (DMEM) ir augsti novērtēta starp definētajām barotnēm šūnu un audu kultūrām, apmierinot dažādu adhezīvo šūnu fenotipu augšanas vajadzības. Tas pārspēj sākotnējo Eagle barotni, kas tika izstrādāta 1950. gados cāļu šūnu kultivēšanai, pateicoties uzlabotajai papildus formulai, kas pazīstama kā Dulbecco modifikācija. Šī modifikācija ievērojami palielina atsevišķu aminoskābju un vitamīnu saturu līdz pat četrkārtīgam līmenim salīdzinājumā ar sākotnējo barotni. Šūnu kultivēšanas jomā DMEM pilda būtisku lomu kā augšanas barotne dažādiem šūnu tipiem, tostarp primārajām šūnām, cilmes šūnām un transformētajām šūnām. Pētnieki izmanto DMEM modificēto versiju arī plašā pētniecības lietojumu klāstā, piemēram, zāļu izstrādē, audu inženierijā un šūnu signālceļu pētījumos. Kvalitātes kontrole • Sterili filtrēts Uzglabāšana un derīguma termiņš • Uzglabāt +2 °C līdz +8 °C temperatūrā, pasargājot no gaismas. • Pēc atvēršanas uzglabāt 4 °C temperatūrā un izlietot 6–8 nedēļu laikā. Piegādes nosacījumi • Vides temperatūra Uzglabāšana • Uzglabājiet ledusskapī temperatūrā no +2 °C līdz +8 °C tumsā. Izvairieties no sasaldēšanas un biežas sasilšanas līdz +37 °C, jo tas pazemina produkta kvalitāti. • Nesildiet barotni virs 37 °C un nelietojiet nekontrolētus siltuma avotus, piemēram, mikroviļņu krāsnis. • Ja jāizmanto tikai daļa no barotnes, pirms lietošanas izņemiet nepieciešamo daudzumu un uzsildiet to līdz istabas temperatūrai. Sastāvs Kategorija Sastāvdaļas Koncentrācija (mg/l) Aminoskābes Glicīns 30,00 L-arginīna HCl 84,00 L-cistīns 2 HCl 62,57 L-glutamīns 584,00 L-histidīns HCl H₂O 42,00 L-izoleicīns 105,00 L-leicīns 105,00 L-lizīns HCl 146,00 L-metionīns 30,00 L-fenilalanīns 66,00 L-serīns 42,00 L-treonīns 95,00 L-triptofāns 16,00 L-tirozīns 2 Na 2H2O 103,79 L-valīns 94,00 Vitamīni Holīna hlorīds 4,00 D-kalcija pantotenāts 4,00 Folijskābe 4,00 mio-inozitols 7,20 Nikotinamīds 4,00 Piridoksāla HCl 4,00 Riboflavīns 0,40 Tiamīna HCl 4,00 Neorganiskie sāļi CaCl₂·2H₂O 265,00 Fe(NO₃)₃·9H₂O 0,10 KCl 400,00 MgSO₄ 7H₂O 200,10 NaCl 6400,00 NaHCO₃ 3700,00 NaH₂PO₄·2H₂O 141,73 Citas sastāvdaļas D-glikoze 4500,00 Fenola sarkanais nātrija sāls 15,90 Nātrija piruvāts 110,00

€25.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

EMEM (MEM Eagle), satur: 2 mM L-glutamīnu, satur: 2,2 g/L NaHCO₃, satur: EBSS

Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) ir viena no visplašāk izmantotajām bāzes barotnēm dažādu zīdītāju šūnu, jo īpaši adhezīvo šūnu līniju, kultivēšanai. Sākotnēji izstrādāts pēc Harija Eagle (Harry Eagle) receptes, šis klasiskais preparāts satur neaizvietojamās aminoskābes, vitamīnus un neorganiskos sāļus, kas nepieciešami gan primāro šūnu, gan izveidoto šūnu līniju augšanai standarta kultivēšanas apstākļos. Šis lietošanai gatavs, sterili filtrēts šķidrais preparāts ir papildināts ar Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS), 2 mM L-glutamīnu, D-glikozi (1,0 g/l) un 2,2 g/l nātrija bikarbonātu (NaHCO₃), tādējādi padarot to piemērotu lietošanai CO₂ kontrolētā inkubatora vidē (parasti 5 % CO₂). Sastāvā iekļautais fenolsarkans darbojas kā pH indikators, ļaujot ērti vizuāli uzraudzīt barotnes stāvokli šūnu kultivēšanas laikā. Galvenās īpašības • Klasiskais „Eagle’s MEM” sastāvs ar Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS) • Iekļauts 2 mM L-glutamīns – gatavs tūlītējai lietošanai • 2,2 g/l nātrija bikarbonāta – buferēts 5 % CO₂ inkubācijai • Ar D-glikozi (1,0 g/l) kā galveno oglekļa avotu • Ar fenolsarkano kā pH indikatoru • Bez HEPES un bez nātrija piruvāta • Sterili filtrēta šķidrā barotne, gatava lietošanai • pH 7,0 – 7,6 Tipiski pielietojumi EMEM nodrošina dažādu zīdītāju šūnu līniju kultivēšanu, tostarp HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 un daudzas primārās šūnas. Tipiski pielietojumi ietver: • Adherento šūnu līniju ikdienas uzturēšana un pavairošana • Vīrusu pavairošana un vakcīnu ražošanas procesi • Citotoksicitātes un bioanalīžu pielietojumi • Transfekcijas un proteīnu ekspresijas pētījumi • Pamatpētījumi šūnu bioloģijā un molekulārajā bioloģijā Lai nodrošinātu optimālu šūnu augšanu, EMEM parasti papildina ar 5–10 % liellopu embriju serumu (FBS) un, atkarībā no šūnu līnijas, ar neesenciālajām aminoskābēm (NEAA) un antibiotikām, piemēram, penicilīnu/streptomicīnu. Rīkošanās un uzglabāšana Neatvērtu pudeli uzglabājiet +2 °C līdz +8 °C temperatūrā, pasargājot no gaismas. Pēc atvēršanas lietojiet aseptiskos apstākļos. L-glutamīns šķīdumā pakāpeniski sadalās – lai nodrošinātu labāko iedarbību, ieteicams barotni izlietot 4 nedēļu laikā pēc atvēršanas vai, ja tā uzglabāta ilgāku laiku, pirms lietošanas papildināt ar svaigu L-glutamīnu. Pirms pievienošanas šūnām ļaujiet barotnei iesilt līdz 37 °C. Kvalitāte Ražots saskaņā ar stingriem kvalitātes standartiem. Katra partija tiek pārbaudīta attiecībā uz sterilitāti, pH, osmolalitāti un endotoksīnu līmeni, lai nodrošinātu stabilu darbību šūnu kultūru lietojumos. Produkta specifikācijas Specifikācija Sīkāka informācija Produkta veidsMEM Produkta kategorijaŠūnu kultūras barotnes FormātsŠķidrums SterilsJā Tilpums500 ml L-glutamīnsAr L-glutamīnu (2 mM) GlikozeAr glikozi (1,0 g/l) Nātrija bikarbonātsAr NaHCO3 (2,2 g/l) HEPESBez HEPES Nātrija piruvātsBez nātrija piruvāta FenolsarkansAr fenola sarkano Sāls šķīdumsEarle’s līdzsvarotais sāls šķīdums (EBSS) pH7,0 – 7,6 Endotoksīnu satursNav norādīts Uzglabāšanano +2 °C līdz +8 °C Sastāvs (sastāvs uz litru)

€25.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Cytion Endothelial cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850176

Endotēlija šūnu augšanas barotne

Endotēlija šūnu augšanas barotne ir standarta barotne cilvēka endotēlija šūnu kultivēšanai no lielajiem asinsvadiem, piemēram, nabas vēnas, nabas artērijas, saphenas vēnas un aortas. Pilnā barotne satur teļa embriju serumu, L-glutamīnu, ECGS/H (endotēlija šūnu augšanas piedevu ar heparīnu), EGF, bFGF un hidrokortizonu. Ja nepieciešami noteikti rekombinanti augšanas faktori, tostarp VEGF ECGS/H vietā, izvēlieties uzlaboto endotēlija šūnu augšanas barotni. Mēs piedāvājam šo barotni kā 500 ml bāzes barotni — atsevišķi vai kopā ar piedevām, vai nu kā atsevišķas sastāvdaļas, vai kā iepriekš sajauktu „Supplement-Mix”. Atsevišķās sastāvdaļas ļauj pielāgot vai izlaist atsevišķus faktorus, savukārt „Supplement-Mix” tiek pievienots vienā darbībā. Bāzes barotne ir pieejama arī bez fenolsarkana tajos pašos formātos, kas novērš traucējumus fluorescences un kolorimetriskajos mērījumos, kā arī fenolsarkana vājo estrogēnveidīgo iedarbību. Lietošanai ir nepieciešami papildinājumi, un abi papildinājumu formāti ir pieejami arī atsevišķi. Pēc piedevu pievienošanas gatavā barotne satur 2 % FCS (10 ml uz 500 ml bāzes barotnes).

€200.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Cytion Endothelial cell proliferation medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850002

Endotēlija šūnu proliferācijas barotne

Endotēlija šūnu proliferācijas barotne ir paredzēta cilvēka endotēlija šūnu ātrai pavairošanai no lielajiem asinsvadiem, piemēram, nabas vēnas, nabas artērijas, saphenas vēnas, aortas, koronārajām un plaušu artērijām. Pilnā barotne satur teļa embriju serumu, L-glutamīnu, heparīnu, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, askorbīnskābi un hidrokortizonu. Ja nepieciešams zemāks seruma saturs, izvēlieties uzlaboto endotēlija šūnu augšanas barotni. Mēs piedāvājam šo barotni kā 500 ml bāzes barotni — atsevišķi vai kopā ar piedevām, kas pieejamas gan kā atsevišķas sastāvdaļas, gan kā iepriekš sajaukts „Supplement-Mix”. Atsevišķās sastāvdaļas ļauj pielāgot vai izlaist atsevišķus faktorus, savukārt „Supplement-Mix” tiek pievienots vienā darbībā. Bāzes barotne ir pieejama arī bez fenolsarkanā tajos pašos iepakojumos, kas novērš traucējumus fluorescences un kolorimetriskajos mērījumos, kā arī fenolsarkanā vājo estrogēnveidīgo iedarbību. Lietošanai ir nepieciešami papildinājumi, un abi papildinājumu veidi ir pieejami arī atsevišķi. Pēc piedevu pievienošanas gatavā barotne satur 7 % FCS (35 ml uz 500 ml bāzes barotnes).

€170.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

500 ml bottle Fetal Bovine Serum South America Origin (FBS)

FBS Dienvidamerika 500 ml

Šis sterili filtrētais liellopu augļa serums (FBS), kas iegūts no Dienvidamerikas liellopiem, nodrošina stabilus šūnu kultūras rezultātus. Pirms laišanas tirgū katra partija tiek pārbaudīta uz sterilitāti, mikoplazmu un liellopu vīrusiem. Turklāt katra partija tiek novērtēta, lai pārbaudītu tās spēju nodrošināt HEK293 un CHO šūnu augšanu. Serums ir pieejams 50 ml un 500 ml tilpumos, un pēc pieprasījuma var tikt sniegts konkrētajai partijai atbilstošs analīzes sertifikāts (CoA).

€310.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

50 ml bottle Fetal Bovine Serum South America Origin (FBS)

FBS South Origin 50 ml

Šis sterili filtrētais liellopu augļa serums (FBS), kas iegūts no Dienvidamerikas liellopiem, nodrošina stabilus šūnu kultūras rezultātus. Pirms laišanas tirgū katra partija tiek pārbaudīta uz sterilitāti, mikoplazmu un liellopu vīrusiem. Turklāt katra partija tiek novērtēta, lai pārbaudītu tās spēju nodrošināt HEK293 un CHO šūnu augšanu. Serums ir pieejams 50 ml un 500 ml tilpumos, un pēc pieprasījuma var tikt sniegts konkrētajai partijai atbilstošs analīzes sertifikāts (CoA).

€32.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

500 ml bottle Fetal Bovine Serum (FBS)

FBS US 500 ml

Šis sterili filtrētais liellopu augļa serums (FBS), kas ievests no Amerikas Savienotajām Valstīm, nodrošina stabilu pamatu šūnu kultūru izmantošanai. Katra partija tiek pakļauta kvalitātes kontroles pārbaudēm, lai noteiktu sterilitāti, mikoplazmu un liellopu vīrusus. Turklāt katra partija tiek bioloģiski validēta, lai apstiprinātu tās spēju veicināt CHO un HEK293 šūnu līniju augšanu. Serums ir iepakots 50 ml un 500 ml tilpumos. Pēc pieprasījuma ir pieejami konkrētajai partijai atbilstoši analīzes sertifikāti (CoA).

€506.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

500 ml bottle Fetal Bovine Serum US Origin (FBS)

FBS US Origin 50 ml

Šis sterili filtrētais liellopu augļa serums (FBS), kas ievests no Amerikas Savienotajām Valstīm, nodrošina stabilu pamatu šūnu kultūru izmantošanai. Katra partija tiek pakļauta kvalitātes kontroles pārbaudēm, lai noteiktu sterilitāti, mikoplazmas klātbūtni un liellopu vīrusus. Turklāt katra partija tiek bioloģiski validēta, lai apstiprinātu tās spēju veicināt CHO un HEK293 šūnu līniju augšanu. Serums ir iepakots 50 ml un 500 ml tilpumos. Pēc pieprasījuma ir pieejami konkrētajai partijai atbilstoši analīzes sertifikāti (CoA).

€52.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Cytion Fibroblast growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850066

Fibroblastu augšanas barotne

Fibroblastu augšanas barotni izmanto cilvēka fibroblastu kultivēšanai, piemēram, no dermas vai smaganas. Lai nodrošinātu bezseruma uzturēšanu noteiktos apstākļos, izvēlieties definētu fibroblastu uzturēšanas barotni. Mēs piedāvājam šo barotni kā 500 ml bāzes barotni, atsevišķi vai kopā ar piedevām, vai nu kā atsevišķas sastāvdaļas, vai kā jau sajauktu piedevu maisījumu. Atsevišķās sastāvdaļas ļauj pielāgot vai izlaist atsevišķus faktorus, savukārt piedevu maisījumu pievieno vienā darbībā. Bāzes barotne ir pieejama arī bez fenolsarkana tajos pašos iepakojumos, kas novērš traucējumus fluorescences un kolorimetriskajos mērījumos, kā arī fenolsarkana vājo estrogēnveidīgo iedarbību. Lietošanai ir nepieciešami papildinājumi, un abi papildinājumu veidi ir pieejami arī atsevišķi. Pēc piedevu pievienošanas gatavā barotne satur 10 % FCS (50 ml uz 500 ml bāzes barotnes).

€180.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Saldēšanas barotne CM-1 – 100 ml

„Cytion“ izstrādātais „Freeze Medium CM-1“ ir moderns kriokonservācijas šķīdums, kas izstrādāts, lai nodrošinātu augstāko šūnu dzīvotspēju un funkcionalitāti pēc atkausēšanas. Šis daudzpusīgais šķīdums ir piemērots plašam šūnu tipu klāstam, tostarp gan cilvēka, gan dzīvnieku šūnām, tādējādi padarot to par neaizstājamu rīku dažādiem pētniecības pielietojumiem. „Freeze Medium CM-1“ sastāvā ir rūpīgi sabalansēts krioprotektantu un būtisku uzturvielu maisījums, kas samazina ledus kristālu veidošanos un šūnu stresu sasaldēšanas procesa laikā, tādējādi saglabājot šūnu integritāti. Freeze Medium CM-1 galvenās īpašības: • Plaša saderība: efektīvs plašam šūnu tipu klāstam, tostarp primārām šūnām, cilmes šūnām un izveidotām šūnu līnijām. • Augsta dzīvotspēja: optimizēts, lai maksimāli palielinātu šūnu atjaunošanos un dzīvotspēju pēc atkausēšanas, nodrošinot uzticamus eksperimentu rezultātus. • Gatavs lietošanai: ērti sagatavots un sterilizēts tūlītējai lietošanai, samazinot sagatavošanas laiku un kontaminācijas risku. • Uzlabota stabilitāte: saglabā nemainīgu veiktspēju standarta kriokonservācijas apstākļos, nodrošinot reproducējamus rezultātus. • Ilgs glabāšanas termiņš: CM-1 ir serumu saturoša, lietošanai gatava kriokonservācijas vide, ko var glabāt ledusskapī līdz pat vienam gadam. CM-1 izmantošana šūnu sasaldēšanai Lai izmantotu CM-1 gan adhezīvo, gan suspensijas šūnu sasaldēšanai, rīkojieties šādi: • Adhezīvo šūnu gadījumā tās jānomazgā un jāatdalī no kultūras substrāta. Suspensijas šūnu gadījumā turpiniet tieši ar nākamo soli. • Saskaitiet šūnas, lai pārliecinātos, ka to koncentrācija ir atbilstoša. • Centrifugējiet šūnas, lai tās nogulsnētos, pēc tam atkārtoti suspendējiet CM-1 sasaldēšanas vidē. • Pārnesiet atkārtoti suspendētās šūnas kriovialēs. • Pirms šūnu pārvietošanas uz ilgtermiņa uzglabāšanu izmantojiet lēnas sasaldēšanas metodi. Metode Apraksts Soļi ❄️ Manuālā sasaldēšana Soli pa solim veicama metode, kas ietver pakāpenisku temperatūras pazemināšanu, lai nodrošinātu šūnu dzīvotspēju. 1️⃣ Ievietojiet šūnas sasaldēšanas vidē un turiet 4 °C temperatūras saldētavā 40 minūtes. 2️⃣ Pārvietojiet uz -80 °C temperatūras saldētavu uz 24 stundām. 3️⃣ Uzglabājiet šūnas šķidrā slāpeklī ilgtermiņa uzglabāšanai. ❄️ Izmantojot Mr. Frosty Ērta ierīce, kas ļauj kontrolēt sasaldēšanas ātrumu bez elektrības. 1️⃣ Sagatavojiet šūnas kriovialās ar sasaldēšanas vidi. 2️⃣ Ievietojiet kriovialas Mr. Frosty konteinerā. 3️⃣ Uzglabājiet -80 °C temperatūrā 24 stundas, pirms pārvietojat uz šķidro slāpekli. ❄️ Kontrolētas sasalšanas ātruma saldētava Augstas precizitātes saldētava no Thermo Fisher vai citiem ražotājiem, kas paredzēta kontrolētai temperatūras pazemināšanai. 1️⃣ Iestatiet ierīci, lai temperatūra pakāpeniski pazeminātos. 2️⃣ Ievietojiet sagatavotās šūnas saldētavā. 3️⃣ Pēc sasaldēšanas cikla pārvietojiet šūnas uz šķidro slāpekli. • Ilgtermiņa uzglabāšanai glabājiet kriovialas temperatūrā zem -130 °C vai šķidrā slāpeklī. Sastāvdaļas • Satur FBS, DMSO, glikozes, sāļus • Buferēšanas spēja: pH = 7,2 līdz 7,6 Cytion Freeze Medium CM-1 piedāvā uzticamu risinājumu kriokonservācijai, nodrošinot augstu šūnu dzīvotspēju un funkcionalitāti pēc atkausēšanas plašam pētniecības pielietojumu klāstam.

€99.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Saldēšanas barotne CM-1 – 50 ml

„Cytion“ izstrādātā „Freeze Medium CM-1“ ir moderns kriokonservācijas šķīdums, kas izstrādāts, lai nodrošinātu augstāko šūnu dzīvotspēju un funkcionalitāti pēc atkausēšanas. Šis daudzpusīgais šķīdums ir piemērots plašam šūnu tipu spektram, tostarp gan cilvēka, gan dzīvnieku šūnām, tādējādi padarot to par neaizstājamu rīku dažādiem pētniecības pielietojumiem. „Freeze Medium CM-1“, kura sastāvā ir rūpīgi sabalansēts krioprotektantu un būtisku uzturvielu maisījums, samazina ledus kristālu veidošanos un šūnu stresu sasaldēšanas procesa laikā, tādējādi saglabājot šūnu integritāti. Freeze Medium CM-1 galvenās īpašības: • Plaša saderība: efektīvs plašam šūnu tipu klāstam, tostarp primārām šūnām, cilmes šūnām un izveidotām šūnu līnijām. • Augsta dzīvotspēja: optimizēts, lai maksimāli palielinātu šūnu atjaunošanos un dzīvotspēju pēc atkausēšanas, nodrošinot uzticamus eksperimentu rezultātus. • Gatavs lietošanai: ērti sagatavots un sterilizēts tūlītējai lietošanai, samazinot sagatavošanas laiku un kontaminācijas risku. • Uzlabota stabilitāte: saglabā nemainīgu veiktspēju standarta kriokonservācijas apstākļos, nodrošinot reproducējamus rezultātus. • Ilgs glabāšanas termiņš: CM-1 ir serumu saturoša, lietošanai gatava kriokonservācijas vide, ko var glabāt ledusskapī līdz pat vienam gadam. CM-1 izmantošana šūnu sasaldēšanai Lai izmantotu CM-1 gan adhezīvo, gan suspensijas šūnu sasaldēšanai, rīkojieties šādi: • Adhezīvo šūnu gadījumā tās jānomazgā un jāatdalī no kultūras substrāta. Suspensijas šūnu gadījumā turpiniet tieši ar nākamo soli. • Saskaitiet šūnas, lai pārliecinātos, ka to koncentrācija ir atbilstoša. • Centrifugējiet šūnas, lai tās nogulsnētos, pēc tam atkārtoti suspendējiet CM-1 sasaldēšanas vidē. • Pārnesiet atkārtoti suspendētās šūnas kriovialēs. • Pirms šūnu pārvietošanas uz ilgtermiņa uzglabāšanu izmantojiet lēnas sasaldēšanas metodi. Metode Apraksts Soļi ❄️ Manuālā sasaldēšana Soli pa solim veicama metode, kas ietver pakāpenisku temperatūras pazemināšanu, lai nodrošinātu šūnu dzīvotspēju. 1️⃣ Ievietojiet šūnas sasaldēšanas vidē un turiet 4 °C temperatūras saldētavā 40 minūtes. 2️⃣ Pārvietojiet uz -80 °C temperatūras saldētavu uz 24 stundām. 3️⃣ Uzglabājiet šūnas šķidrā slāpeklī ilgtermiņa uzglabāšanai. ❄️ Izmantojot Mr. Frosty Ērta ierīce, kas ļauj kontrolēt sasaldēšanas ātrumu bez elektrības. 1️⃣ Sagatavojiet šūnas kriovialās ar sasaldēšanas vidi. 2️⃣ Ievietojiet kriovialas Mr. Frosty konteinerā. 3️⃣ Uzglabājiet -80 °C temperatūrā 24 stundas, pirms pārvietojat uz šķidro slāpekli. ❄️ Kontrolētas sasalšanas ātruma saldētava Augstas precizitātes saldētava no Thermo Fisher vai citiem ražotājiem, kas paredzēta kontrolētai temperatūras pazemināšanai. 1️⃣ Iestatiet ierīci, lai temperatūra pakāpeniski pazeminātos. 2️⃣ Ievietojiet sagatavotās šūnas saldētavā. 3️⃣ Pēc sasaldēšanas cikla pārvietojiet šūnas uz šķidro slāpekli. • Ilgtermiņa uzglabāšanai glabājiet kriovialas temperatūrā zem -130 °C vai šķidrā slāpeklī. Sastāvdaļas • Satur FBS, DMSO, glikozes, sāļus • Buferēšanas spēja: pH = 7,2 līdz 7,6 Cytion Freeze Medium CM-1 piedāvā uzticamu risinājumu kriokonservācijai, nodrošinot augstu šūnu dzīvotspēju un funkcionalitāti pēc atkausēšanas plašam pētniecības pielietojumu klāstam.

€59.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Ham’s F12K Medium, satur: 2,0 mM L-glutamīnu, satur: 2,0 mM nātrija piruvātu, satur: 2,5 g/l NaHCO₃

Iepazīstinām ar „Ham’s F-12K (Kaighn’s) barotni” — specializētu „Ham’s F-12” barotnes modifikāciju, kas izstrādāta, lai atbilstu bioloģisko pētījumu īpašajām prasībām. Šī modernā barotne piedāvā izteiktas priekšrocības, uzlabojot primāro cilvēka hepatocītu, kā arī žurku un cāļu aknu šūnu kultivēšanu, jo īpaši apstākļos ar samazinātu seruma koncentrāciju. „Ham’s F-12K (Kaighn’s) Medium” ir rūpīgi izstrādāts, lai optimizētu šūnu kultivēšanas apstākļus. Tam ir bagātināts sastāvs, kas nodrošina paaugstinātu būtisko komponentu, piemēram, aminoskābju un nātrija piruvāta, līmeni, kā arī papildu elementus, tostarp putrescīnu, timidīnu, hipoksantīnu un cinku. Šie papildinājumi ļauj pētniekiem bagātināt barotni ar minimālu seruma daudzumu vai konkrētiem komponentiem atbilstoši specifiskiem šūnu tipiem, tādējādi veicinot precīzu eksperimentālo apstākļu nodrošināšanu. Jāatzīmē, ka Ham's F-12K (Kaighn's) barotne nesatur proteīnus vai augšanas faktorus. Tādējādi bieži ir nepieciešama papildināšana ar augšanas faktoriem un embriju liellopu serumu (FBS), kas ļauj pētniekiem pielāgot barotni konkrētu šūnu līniju prasībām. Lai panāktu optimālu darbību, FBS koncentrācija katrai šūnu līnijai ir rūpīgi jāoptimizē, nodrošinot optimālu augšanu un funkcionalitāti. Lai uzturētu fizioloģisko pH līmeni, Hama F-12K (Kaighna) barotnē tiek izmantota nātrija bikarbonāta buferu sistēma (2,5 g/l), kas kultivācijas laikā prasa kontrolētu 5–10 % CO₂ vidi. Tas nodrošina, ka barotnes pH līmenis paliek ideālajā diapazonā šūnu augšanai un dzīvotspējai. Kvalitātes kontrole • pH = 7,2 ± 0,02 pie 20–25 °C. • Katra partija ir pārbaudīta uz sterilitāti un mikoplazmu un baktēriju neesamību. Uzglabāšana • Uzglabāt ledusskapī +2–+8 °C temperatūrā tumšā vietā. Sasalšana, kā arī uzsildīšana līdz +37 °C samazina produkta kvalitāti. • Neuzkarsējiet barotni virs 37 °C un neizmantojiet nekontrolējamos siltuma avotus (piem., mikroviļņu krāsnis). • Ja paredzēts izmantot tikai daļu barotnes, izņemiet šo daudzumu no pudeles un uzsildiet to istabas temperatūrā. • Jebkuras barotnes, izņemot pamatbarotni, glabāšanas termiņš ir 8 nedēļas no ražošanas datuma. Sastāvs Sastāvdaļas mg/L Neorganiskie sāļi Kalcija hlorīds x 2H₂O 135,24 Vara(II) sulfāts x 5H₂O 0,00 Dzelzs(II) sulfāts x 7H₂O 0,83 Magnija hlorīds x 6H₂O 105,72 Magnija sulfāts x 7H₂O 394,49 Kālija hlorīds 283,29 Kālija dihidrogēnfosfāts 58,52 Nātrija hlorīds 7597,20 bezūdens dinātrija hidrogēnfosfāts 115,02 Cinka sulfāts x 7H₂O 0,14 Citas sastāvdaļas D(+)-glikozes bezūdens 1260,00 Hipoksantīns 4,08 DL-α-liposkābe 0,21 Fenola sarkans 3,00 Putrescīns x 2HCl 0,32 Nātrija piruvāts 220,00 NaHCO₃ 2500,00 Timidīns 0,73 Aminoskābes L-alanīns 17,82 L-arginīns x HCl 421,40 L-asparagīns x H₂O 30,02 L-asparagīnskābe 26,62 L-cisteīns x HCl x H₂O 70,24 L-glutamīns 292,20 L-glutamīnskābe 29,42 Glicīns 15,01 L-histidīns x HCl x H₂O 41,92 L-izoleicīns 7,87 L-leicīns 26,24 L-lizīns x HCl 73,04 L-metionīns 8,95 L-fenilalanīns 9,91 L-prolīns 69,06 L-serīns 21,02 L-treonīns 23,82 L-triptofāns 4,08 L-tirozīns 10,87 L-valīns 23,42 Vitamīni D(+)-biotīns 0,07 D-kalcija pantotenāts 0,48 Holīna hlorīds 13,96 Folijskābe 1,32 mio-inozitols 18,02 Nikotinamīds 0,04 Piridoksīns x HCl 0,06 Riboflavīns 0,04 Tiamīns x HCl 0,34 B12 vitamīns 1,36

€108.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Ham’s F12 Medium, satur: 1,0 mM stabilu glutamīnu, satur: 1,0 mM nātrija piruvātu, satur: 1,176 g/L NaHCO₃

„Ham’s F-12 Medium”, kas pazīstams arī kā „Ham’s F-12 Nutrient Mix”, ir plaši izmantota pamatvide, kas izstrādāta īpaši šūnu kultivēšanai. To plaši izmanto bezseruma vienšūnu kultivēšanai, audzējot Ķīnas hamstera olnīcu (CHO) šūnas, plaušu šūnas un peles L šūnas. Turklāt „Ham’s F-12” ir ieteicamā barotne klonālās toksicitātes testam (CTA). Viena no tā ievērojamajām priekšrocībām ir spēja nodrošināt šūnu augšanu bez nepieciešamības pievienot serumu. Tas novērš iespējamo traucējumu, ko rada seruma komponenti, nodrošinot konsekventus un uzticamus eksperimentālos rezultātus. Nodrošinot bezseruma kultivēšanas vidi, Ham's F-12 barotne pētniekiem piedāvā labāku kontroli pār saviem pētījumiem. Vēl viena svarīga Ham’s F-12 barotnes īpašība ir tās piemērotība vienšūnu izsēšanai. Tas padara to par lielisku izvēli dažādām šūnu līnijām, tostarp CHO šūnām, plaušu šūnām un peles L šūnām. Barotnes optimizētais uzturvielu sastāvs veicina atsevišķu šūnu efektīvu piestiprināšanos un augšanu, ļaujot izveidot viendabīgas šūnu kultūras ar uzlabotu reproducējamību. Turklāt Ham's F-12 barotne ir ieguvusi atzinību kā ieteicamā barotne klonālās toksicitātes testam (CTA). Šim testam ir izšķiroša nozīme, novērtējot vielu citotoksisko iedarbību uz šūnām. Izmantojot Ham's F-12 barotni CTA, pētnieki var precīzi novērtēt dažādu savienojumu vai apstrāžu ietekmi uz atsevišķām šūnām, iegūstot vērtīgu informāciju par toksikoloģiskajiem profiliem. Kvalitātes kontrole • pH = 7,2 ± 0,02 pie 20–25 °C. • Katra partija ir pārbaudīta uz sterilitāti un mikoplazmu un baktēriju neesamību. Uzglabāšana • Uzglabāt ledusskapī +2–+8 °C temperatūrā tumšā vietā. Sasaldēšana un uzsildīšana līdz +37 °C samazina produkta kvalitāti. • Nesildiet barotni virs 37 °C un neizmantojiet nekontrolējamos siltuma avotus (piem., mikroviļņu krāsnis). • Ja paredzēts izmantot tikai daļu barotnes, izņemiet šo daudzumu no pudeles un uzsildiet to istabas temperatūrā. • Jebkuras barotnes, izņemot pamatbarotni, glabāšanas termiņš ir 8 nedēļas no ražošanas datuma. Sastāvs Sastāvdaļas mg/l Neorganiskie sāļi Kalcija hlorīds x 2H₂O 44,00 Vara(II) sulfāts x 5H₂O 0,00 Dzelzs(II) sulfāts x 7H₂O 0,83 Magnija hlorīds x 6H₂O 122,00 Kālija hlorīds 223,65 Nātrija hlorīds 7599,00 bezūdens dinātrija hidrogēnfosfāts 142,04 Cinka sulfāts x 7H₂O 0,86 Citas sastāvdaļas D(+)-glikozes bezūdens 1801,60 Hipoksantīns 4,08 Linolskābe 0,08 DL-α-liposkābe 0,21 Fenolsarkanais 1,20 Putrescīns x 2HCl 0,16 Nātrija piruvāts 110,00 Timidīns 0,73 NaHCO₃ 1176,00 Aminoskābes L-alanīns 8,91 L-arginīns x HCl 210,70 L-asparagīns x H₂O 15,01 L-asparagīnskābe 13,31 L-cisteīns x HCl x H₂O 35,12 L-alanil-L-glutamīns 217,30 L-glutamīnskābe 14,71 Glicīns 7,51 L-histidīns x HCl x H₂O 20,96 L-izoleicīns 3,94 L-leicīns 13,12 L-lizīns x HCl 36,54 L-metionīns 4,48 L-fenilalanīns 4,96 L-prolīns 34,53 L-serīns 10,51 L-treonīns 11,91 L-triptofāns 2,04 L-tirozīns 5,44 L-valīns 11,71 Vitamīni D(+)-biotīns 0,01 D-kalcija pantotenāts 0,24 Holīna hlorīds 13,96 Folijskābe 1,32 mio-inozitols 18,02 Nikotinamīds 0,04 Piridoksīns x HCl 0,06 Riboflavīns 0,04 Tiamīns x HCl 0,34 B12 vitamīns 1,36

€25.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

HEPES Buffer Solution (1M)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered HEPES Buffer Solution (1 M), also known as N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid, is a zwitterionic organic buffering agent widely used in cell culture media. It is designed to maintain stable pH conditions in the physiological range of 6.7 to 8.6, supporting optimal cellular function during in vitro applications. Application and Benefits HEPES provides reliable buffering capacity in cell culture systems, particularly when cells are handled outside a CO₂ incubator. The addition of 10–25 mM HEPES to culture media offers enhanced pH stability during extended manipulation periods, helping to maintain consistent experimental conditions. This buffer is membrane-impermeable, has minimal interference with biochemical reactions, and demonstrates strong chemical and enzymatic stability. These properties make it suitable for a wide range of cell culture and biochemical applications. Formulation and Usage The solution is supplied as a 1 M concentrate prepared in cell culture–grade water and is sterile-filtered for use in contamination-sensitive environments. It can be diluted to the desired working concentration depending on application requirements. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to preserve product integrity. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

bez nodokļa un piegādes izmaksām

Šūnu kultūras barotnes: pārskats

Dabaszinātņu jomā viena no svarīgākajām metodēm ir šūnu kultivēšana. Ar terminu „šūnu kultivēšana” saprot šūnu, audu vai orgānu izņemšanu no dzīvnieka vai auga un to turpmāku implantēšanu mākslīgā vidē, kas ir labvēlīga to izdzīvošanai un/vai augšanai. Optimālai šūnu attīstībai nepieciešamās pamatvides prasības ir kontrolēta temperatūra, substrāts šūnu piestiprināšanai, atbilstoša augšanas vide un inkubators, kas uztur optimālu pH līmeni un osmolalitāti. Lai šūnas varētu pilnībā attīstīties, tām ir jānodrošina šie apstākļi.

Atbilstošas augšanas vides izvēle in vitro kultivēšanai ir šis šūnu kultūras posms, kas ir gan vissvarīgākais, gan izšķirošais. Augšanas vide, ko dēvē arī par kultūras vidi, ir šķidrums vai gēls, kas izstrādāts, lai veicinātu organismu attīstību mikroskopiskā, šūnu vai augu līmenī. Šūnu kultivēšanai izmantotā vide bieži satur pietiekamu enerģijas daudzumu un vielas, kas regulē šūnu ciklu. Kultūras vides galvenās sastāvdaļas ir aminoskābes, vitamīni, neorganiskie sāļi, glikozes un serums. Serums tiek pievienots videi, jo tas darbojas kā augšanas faktoru, hormonu un saistīšanās faktoru avots. Papildus barības vielu nodrošināšanai vide palīdz arī uzturēt pH un osmolalitātes līmeni.

Šūnu kultūrā izmantoto barotņu veidi

Gan cilvēka, gan dzīvnieku šūnas var audzēt gan mākslīgā vai sintētiskā barotnē, gan pilnīgi dabīgā barotnē, kas papildināta ar dabīgiem elementiem. Turpinājumā sniegsim pārskatu par dažādiem pašlaik pieejamiem barotņu veidiem.

Dabiskās barotnes

Dabiskajā barotnē var atrast tikai bioloģiskos šķidrumus, kas pastāv to dabiskajā stāvoklī. Dabiskās barotnes ir ļoti noderīgas un viegli izmantojamas dažādu dzīvnieku šūnu tipu kultivēšanai. Nepietiekama izpratne par precīziem komponentiem, kas veido dabisko barotni, ir galvenais faktors, kas ietekmē zemo rezultātu atkārtojamību, izmantojot dabiskās barotnes.

Mākslīgās barotnes

Mākslīgo vai sintētisko barotņu sagatavošana ietver barības vielu (gan organisko, gan neorganisko), seruma proteīnu, ogļhidrātu, kofaktoru, vitamīnu un sāļu pievienošanu, kā arī O2 un CO2 gāzes fāžu pievienošanu [1].

Ir izstrādāti dažādi mākslīgo barotņu veidi, lai pildītu vienu vai vairākas no šādām funkcijām: 1) Tūlītēja izdzīvošana (līdzsvarots sāļu šķīdums ar precīzu pH un osmotisko spiedienu). 2) Ilgstoša izdzīvošana (līdzsvarots sāļu šķīdums, kam pievienotas dažādas organisko ķīmisko vielu un/vai seruma formulācijas). 3) Neierobežota attīstība. 4) Specializētas funkcijas.

Mākslīgajiem barotnēm ir četras atšķirīgas klasifikācijas:

Serumu saturošas barotnes

Visbiežāk sastopamais piedevas veids dzīvnieku šūnu audzēšanai izmantotajā barotnē ir liellopu augļa serums. To pievieno kultūras barotnei kā lētu piedevu, lai panāktu iespējami labākos augšanas apstākļus. Papildus tam, ka serums darbojas kā nestabilu vai ūdenī nešķīstošu uzturvielu, hormonu un augšanas faktoru, proteāžu inhibitoru un citu vielu pārvadātājs vai helators, tas arī saista un neitralizē kaitīgas molekulas.

Seruma nesaturošas barotnes

Seruma klātbūtnei barotnēs ir vairāki trūkumi, un tā var izraisīt būtiskas interpretācijas kļūdas imunoloģiskajos pētījumos [2, 3]. Ir izstrādātas dažādas bezseruma barotnes [4, 5]. Šīs barotnes parasti ir speciāli izstrādātas, lai atbalstītu viena šūnu tipa kultivēšanu, piemēram, „Knockout Serum Replacement” un „Knockout DMEM” no „Thermo Fisher Scientific”, kā arī „mTESR” barotne no „Stem Cell Technologies” [6], kas paredzēta cilmes šūnām [7].

Turklāt šajās barotnēs ir iekļauti noteikti daudzumi attīrītu augšanas faktoru, lipoproteīnu un citu proteīnu, kurus citādi parasti nodrošina serums [8]. Šīs barotnes bieži dēvē par „definētām kultivēšanas barotnēm”, jo to sastāvdaļas ir labi izpētītas.

Ķīmiski definētas barotnes

Šīs barotnes satur ultra-tīras neorganiskas un organiskas sastāvdaļas, kas nav piesārņotas ar nekāda veida piemaisījumiem. Tās var saturēt arī tīras olbaltumvielu piedevas, piemēram, augšanas faktorus.

 Baktēriju vai rauga ģenētiskā modifikācija kopā ar konkrētu taukskābju, vitamīnu, holesterīna un aminoskābju pievienošanu nodrošina to sastāvdaļu ražošanu [9].

Proteīnu nesaturošas barotnes

Proteīnu nesaturošas barotnes ir tādas, kurās vispār nav proteīnu, bet ir tikai neproteīna elementi. Salīdzinot ar barotnēm, kurām pievienots serums, barotņu izmantošana bez proteīnu piedevas veicina lielāku šūnu proliferāciju un proteīnu ekspresiju, kā arī atvieglo jebkura turpmākajā procesā iegūtā produkta attīrīšanu [10–12]. Proteīns nav iekļauts tādos barotņu sastāvos kā MEM un RPMI-1640. Tomēr nepieciešamības gadījumā var pievienot proteīna piedevu.

Kultivēšanas barotnes un to pamatkomponenti

Komerciālo kultivēšanas barotni var iegādāties pulvera vai šķidrā veidā, un tā bieži satur dažādus uzturvielu avotus, piemēram, aminoskābes, glikozes, sāļus, vitamīnus un citus uztura bagātinātājus. 

Šo sastāvdaļu nepieciešamība katrai šūnu līnijai ir atšķirīga, un šīs atšķirības nosaka plašo barotņu sastāvu dažādību. Katrai sastāvdaļai ir sava funkcija, kas tiks izklāstīta turpmākajos punktos:

Buferizācijas sistēmas

Lai uzturētu optimālus augšanas apstākļus, ir jākontrolē pH līmenis, ko bieži vien veic, izmantojot vienu no divām buferizācijas sistēmām:

Dabiskā buferizācijas sistēma

CO₂/H₂CO₃ attiecība atmosfērā ir vienāda ar to barotnē, tādējādi radot dabisku buferizācijas mehānismu. Lai saglabātu šo dabisko buferizācijas mehānismu, kultūras jātur gaisa vidē ar 5–10 % CO₂ saturu, ko bieži panāk, izmantojot CO₂ inkubatoru. Viena no lielākajām dabiskā bufera priekšrocībām ir tā lētums un drošība.

HEPES

Ķīmiskā buferēšana, izmantojot zwitterjonu HEPES, nodrošina lielāku buferēšanas spēju pH diapazonā no 7,2 līdz 7,4 un neprasa regulētu gāzes vidi. Konkrētiem šūnu tipiem lielāka HEPES deva var būt kaitīga. HEPES saturošas barotnes ir arī daudz jutīgākas pret fluorescējošās gaismas fototoksisko iedarbību [13].

Fenolsarkans

pH indikators fenola sarkans bieži tiek iekļauts komerciāli pieejamās kultivēšanas vidēs, ļaujot nepārtraukti uzraudzīt pH. Šīm šūnām vairojoties, to ražotie metabolīti izraisa pH izmaiņas un tādējādi arī vides krāsas maiņu. Fenola sarkanajam ir divkārša ietekme uz barotnes krāsu — skābā pH vidē tā kļūst dzeltena, bet sārmainā pH vidē — violeta. pH 7,4, kas ir optimālā vērtība šūnu kultūrām, liek barotnei izskatīties fluorescējoši sarkanai.

Tomēr fenola sarkanajam ir arī daži trūkumi: pirmkārt, fenola sarkanais spēj imitēt vairāku steroīdu hormonu, galvenokārt estrogēna, darbību [14]. Tāpēc, pētot pret estrogēnu jutīgas šūnas, piemēram, krūšu audus, ieteicams izmantot barotni bez fenola sarkanā. Vairākos bezseruma preparātos fenola sarkana klātbūtne traucē nātrija un kālija līdzsvaru. Šo efektu var neitralizēt, barotnei pievienojot serumu vai liellopu hipofīzes hormonu [15]. Treškārt, fenola sarkana klātbūtne apgrūtina noteikšanu plūsmas citometrijas eksperimentos.

Neorganiskie sāļi

Barotnes, kas satur neorganiskos sāļus, piemēram, nātrija, kālija un kalcija jonus, palīdz uzturēt osmotisko līdzsvaru un regulēt membrānas potenciālu.

Aminoskābes

Tā kā aminoskābes ir proteīnu pamatsastāvdaļas, tās ir būtiska sastāvdaļa ikvienā šūnu audzēšanas barotnē, kas jebkad ir izstrādāta. Tā kā šūnas nespēj pašas ražot noteiktas aminoskābes, ir svarīgi, lai kultūras barotnē būtu iekļautas neaizvietojamās aminoskābes. Tās ir nepieciešamas šūnu vairošanās procesam, un to koncentrācija nosaka maksimālo šūnu blīvumu, ko var sasniegt. Īpaši svarīga ir neaizvietojamā aminoskābe L-glutamīns.

L-glutamīns darbojas kā sekundārs enerģijas avots vielmaiņai un piegādā slāpekli NAD, NADPH un nukleotīdu sintēzei. Tā kā L-glutamīns ir nestabila aminoskābe, kas laika gaitā pārveidojas formā, kuru šūnas nespēj izmantot, tā ir jāpievieno barotnei.

Turklāt barotnē var pievienot neesamās aminoskābes, lai atjaunotu tās, kas iztērētas augšanas procesa laikā. Šūnu augšana tiek veicināta un to dzīvotspēja palielinās, ja augšanas barotnei pievieno neesamās aminoskābes.

Ogļhidrāti

Ogļhidrāti cukuru veidā ir galvenais enerģijas avots. Daudzos barotnēs papildus izplatītākajiem cukuriem — glikozēm un galaktozēm — ir iekļauta arī maltoze un fruktoze.

Olbaltumvielas un peptīdi

Albumīns, transferīns un fibronektīns ir visbiežāk izmantotie proteīni un peptīdi. Tie ir īpaši nozīmīgi barotnēs, kurās nav iekļauts serums. Albumīns, transferīns, aprotinīns, fetuīns un fibronektīns ir daži no proteīniem, kas var atrasties serumā, kas ir bagāts proteīnu avots.

Albumīns ir galvenais asinīs sastopamais proteīns, un tā funkcija ir saistīt un transportēt dažādas vielas, tostarp ūdeni, sāļus, brīvās taukskābes, hormonus un vitamīnus, starp dažādiem orgāniem un šūnām. Albumīna spēja saistīties ar ķīmiskajām vielām padara to par efektīvu līdzekli kaitīgo savienojumu noņemšanai no barotnes, kurā tiek kultivētas šūnas.

Aprotinīns ir aizsarglīdzeklis šūnu kultivēšanas sistēmās, jo tas ir stabils neitrālā un skābā pH vidē, kā arī izturīgs pret augstām temperatūrām un proteolītisko enzīmu izraisītu noārdīšanos. Tas spēj inhibēt virkni serīna proteāžu, tostarp tripsīnu un citas.

Fetuīns ir glikoproteīns, ko dzīvnieku augļu un jaundzimušo dzīvnieku serumā var konstatēt lielākos daudzumos nekā pieaugušo dzīvnieku serumā. Turklāt tas darbojas kā serīna proteāzes inhibitors. Proteīns fibronektīns ir būtiska sastāvdaļa šūnu adhezijas procesā. Transferīns ir olbaltumviela, kas transportē dzelzi un ir atbildīga par dzelzs piegādi šūnu membrānām.

Taukskābes un lipīdi

Tām ir izšķiroša nozīme bezseruma vidē, ja serums nav klāt.

Vitamīni

Šūnu attīstībai un vairošanās procesam ir nepieciešami daudzi vitamīni. Šūnas nespēj ražot pietiekamu vitamīnu daudzumu, tāpēc audu kultūrās tie ir nepieciešami kā uztura bagātinātāji.

Šūnu kultūrā serums ir galvenais vitamīnu avots; tomēr barotnes tiek papildinātas arī ar dažādiem vitamīniem, lai tās būtu piemērotas konkrētam šūnu tipam. Visbiežāk augšanas stimulēšanai izmanto B grupas vitamīnus.

Mikroelementi

Ķīmiskie elementi, piemēram, varš, cinks, selēns un trikarboksilskābes starpprodukti, ir pazīstami kā mikroelementi. Mikroelementus bieži pievieno barotnēm, kurās nav seruma, lai aizstātu tos, kas parasti atrodas serumā. Šie elementi ir svarīgas ķīmiskas sastāvdaļas, kas nepieciešamas veselīgai šūnu attīstībai. Daudzas bioķīmiskās reakcijas, piemēram, fermentu aktivitāte, ir atkarīgas no noteiktiem mikroelementiem.

Barotnes piedevas

Pilnvērtīgajai augšanas barotnei, kas ieteikta noteiktām šūnu līnijām, nepieciešamas papildu sastāvdaļas, kuras nav iekļautas pamata barotnē un serumā. Šie uztura bagātinātāji veicina šūnu augšanu un atbilstošu vielmaiņas funkciju.

Lai gan hormoni, augšanas faktori un signālmolekulas ir būtiski konkrētu šūnu līniju pareizai proliferācijai, vienmēr jāievēro šādi piesardzības pasākumi: tā kā piedevu pievienošana var mainīt pilnās augšanas vides osmolalitāti, kas var kavēt šūnu attīstību, vienmēr ir ieteicams pārbaudīt osmolalitāti pēc piedevu pievienošanas. Lielākajai daļai šūnu līniju optimālā osmolalitāte ir no 260 līdz 320 mOSM/kg.

Antibiotikas

Antibiotikas bieži izmanto, lai kavētu baktēriju un sēnīšu piesārņotāju attīstību [16], lai gan tās nav nepieciešamas šūnu augšanai. Tā kā antibiotikas var slēpt mikoplazmu un rezistentu baktēriju izraisītu piesārņojumu, to rutīna lietošana šūnu kultūrās nav ieteicama [17, 18].

Turklāt antibiotikas var traucēt paaugstinātas jutības šūnu vielmaiņu. Bieži tiek izmantotas MilliporeSigma un Life Technologies ražotās penicilīna–streptomicīna kombinācijas. Plasmocin ir izmantots gliomas šūnu līniju TS603, TS516 un BT260 kultivēšanā [19], un ir pierādīts, ka tas efektīvi novērš mikoplazmas piesārņojumu (20).

Serums

Serumā ir sastopami albumīni, augšanas faktori un augšanas inhibitori. Serums ir viena no vissvarīgākajām šūnu kultūras barotnes sastāvdaļām, jo tas nodrošina aminoskābes, olbaltumvielas, vitamīnus (īpaši taukos šķīstošos vitamīnus, piemēram, A, D, E un K), ogļhidrātus, lipīdus, hormonus, augšanas faktorus, minerālvielas un mikroelementus.

Lai veicinātu kultivēto šūnu attīstību, bieži izmanto serumu, kas iegūts no liellopu augļiem un teļiem. Augļu serums ir bagāts augšanas faktoru avots un ir piemērots šūnu klonēšanai un jutīgu šūnu attīstībai. Tā kā teļu seruma spēja veicināt augšanu ir samazināta, to izmanto kontakta inhibīcijas eksperimentos. Standarta augšanas barotnēs bieži vien ir iekļauts 2–10 % seruma. Seruma pievienošana kultivēšanas barotnei kalpo šādiem mērķiem [21]:

  • Serums nodrošina šūnām nepieciešamos uzturvielu avotus (gan šķīdumā, gan saistīti ar olbaltumvielām).

  • Serumā ir vairāki augšanas faktori un hormoni, kas piedalās augšanas veicināšanā un specializētajā šūnu darbībā.

  • Tajā ir daudz saistošo proteīnu, piemēram, albumīns un transferīns, kas transportē citas ķīmiskās vielas uz šūnu. Piemēram, albumīns piegādā taukus, vitamīnus, hormonus utt. uz šūnām.

  • Tas nodrošina arī proteīnus, piemēram, fibronektīnu, kas palielina šūnu saistīšanos ar substrātu. Turklāt tas rada izplatīšanās elementus, kas palīdz šūnu izplešanās procesā pirms dalīšanās.

  • Tas piegādā proteāžu inhibitorus, kas novērš proteolīzi šūnās.

  • Tas satur arī minerālvielas, piemēram, Na+, K+, Zn2+ un Fe2+.

  • Tas palielina barotnes viskozitāti, tādējādi aizsargājot šūnas no mehāniskiem bojājumiem suspensijas kultūras maisīšanas laikā.

  • Tas darbojas arī kā buferis.

Atsauces

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Dzīvnieku šūnu barošana audu kultūrā; sākotnējie pētījumi par sintētisko barotni. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Teļa augļa seruma komponenta ātra adsorbcija kultivētajās zīdītāju šūnās. Potenciāls artefaktu avots pētījumos par antiserumiem pret šūnu specifiskiem antigēniem. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Seruma pievienošana barotnei, ko izmanto šūnu suspensiju sagatavošanai, kā iespējamais artefaktu avots šūnu mediētajās reakcijās, kuras pētītas, izmantojot popliteālā limfmezgla testu. J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Komerciālas bezseruma barotnes: hibridomu augšana un monoklonālo antivielu ražošana. J Immunol Methods. 1991;145:175–83

[5] Barnes D, Sato G. Metodes kultivēto šūnu audzēšanai bezseruma barotnē. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O, u.c. HSP70 šaperoni nogādā RNS-brīvo TDP-43 anizotropiskās intranukleārās šķidrās sfēriskās apvalkos. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, u.c. Dauna sindroma izraisītā novecošanās traucē neironu priekšteču kodola arhitektūru. Cell Stem Cell. 2022;29:116–130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Seruma pilnīga aizstāšana ar albumīnu, transferīnu un sojas lipīdiem lipopolisaharīdiem reaģējošu B limfocītu kultūrās. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Hibridomu augšanai un monoklonālo antivielu ražošanai paredzētas ķīmiski definētas bezproteīnu barotnes sistemātiska uzlabošana. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] Darfler F. Proteīnu nesaturoša barotne hibridomu un citu imūnsistēmas šūnu audzēšanai. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Barnes D, Sato G. Šeruma nesaturoša šūnu kultūra: vienota pieeja. Cell. 1980;22:649–55

[12] Hamilton W, Ham R. Ķīniešu kāmju šūnu līniju klonālā audzēšana proteīnu nesaturošās barotnēs. In Vitro. 1977;13:537–47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Gaismas iedarbībai pakļautas HEPES saturošas kultūras vides citotoksiskās iedarbības analīze. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Fenolsarkanais audu kultūras barotnēs ir vājš estrogēns: sekas estrogēniem reaģējošu šūnu pētījumiem kultūrā. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] Karmiol S. Bezseruma barotņu izstrāde. In: Master JRW, redaktors. Dzīvnieku šūnu kultūras, 3. izdevums. Oksforda: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Antibiotiku lietošana šūnu kultūras barotnēs. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Mikoplazmu infekcijas izplatība un kontrole šūnu kultūrās. In Vitro. 1976;12:643–8

[18] Masters J, Stacey G. Barotnes nomaiņa un šūnu līniju pārstādīšana. Nat Protoc. 2007;2:2276–84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M, et al. Histonu demetilāze KDM6A tieši uztver skābekli, lai regulētu hromatīnu un šūnu likteni. Science. 2019;363:1217–1222

[20] Molla Kazemiha V., Azari S., Amanzadeh A., Bonakdar S., Shojaei Moghadam M., Habibi Anbouhi M, u.c. Plasmocin™ efektivitāte dažādās ar mollicutes inficētās zīdītāju šūnu līnijās salīdzinājumā ar šūnu kultūrās parasti lietotajām antibiotikām: vietējā pieredze. Cytotechnology. 2011;63:609-20

[21] Kragh Hansen U. Liganda saistīšanās ar seruma albumīnu molekulārie aspekti. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53