Перейти до вмісту

Носії та реагенти

40 товари

Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

без урахування податків та вартості доставки

Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€310.00

без урахування податків та вартості доставки

Cytion Endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850006

Удосконалене середовище для культивування ендотеліальних клітин

Середовище для культивування ендотеліальних клітин «Advanced Endothelial Cell Growth Medium» призначене для культивування людських ендотеліальних клітин великих судин. Визначені рекомбінантні фактори росту людини, зокрема VEGF та Long R3 IGF-1, замінюють неочищений додаток для росту ендотеліальних клітин. Повне середовище містить сироватку ембріонів телят, L-глутамін, гепарин, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, аскорбінову кислоту та гідрокортизон. Для прискорення розмноження з вищим вмістом сироватки обирайте середовище для проліферації ендотеліальних клітин. Для композиції без VEGF обирайте «Середовище для росту ендотеліальних клітин» (Endothelial Cell Growth Medium). Ми пропонуємо середовище у вигляді 500 мл базового середовища — окремо або разом із добавками, як окремі компоненти або у вигляді попередньо змішаної суміші «Supplement-Mix». Окремі компоненти дають змогу регулювати вміст окремих факторів або виключати їх, тоді як суміш добавок «Supplement-Mix» додається за один крок. Базове середовище також доступне у тих самих форматах без фенолового червоного, що дозволяє уникнути перешкод під час флуоресцентного та колориметричного аналізу, а також слабкої естрогеноподібної активності фенолового червоного. Для використання необхідні добавки, і обидва формати добавок також доступні окремо. Після додавання добавок готове середовище містить 2 % FCS (10 мл на 500 мл базового середовища).

€180.00

без урахування податків та вартості доставки

Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850019

Удосконалене середовище для культивування ендотеліальних клітин мікросудин

Середовище для культивування ендотеліальних клітин мікросудин «Advanced Microvascular Endothelial Cell Growth Medium» використовується для культивування ендотеліальних клітин мікросудин людини, наприклад, із дерми, легенів або серця. Визначені рекомбінантні фактори росту людини замінюють неочищений добавку для росту ендотеліальних клітин. Повне середовище містить сироватку ембріонів телят, L-глутамін, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, аскорбінову кислоту та гідрокортизон. Для отримання препарату з ECGS/H та без VEGF слід обрати середовище для культивування ендотеліальних клітин мікросудин. Ми пропонуємо середовище у вигляді 500 мл базового середовища — окремо або разом із добавками, як окремі компоненти або у вигляді попередньо змішаної суміші добавок (Supplement-Mix). Окремі компоненти дають змогу регулювати концентрацію окремих факторів або виключати їх, тоді як суміш добавок додається за один крок. Базове середовище також доступне у тих самих форматах без фенолового червоного, що дозволяє уникнути перешкод у флуоресцентних та колориметричних вимірюваннях, а також слабкої естрогеноподібної активності фенолового червоного. Для використання необхідні добавки, і обидва формати добавок також доступні окремо. Після додавання добавок повне середовище містить 5 % FCS (25 мл на 500 мл базового середовища).

€200.00

без урахування податків та вартості доставки

Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

без урахування податків та вартості доставки

Cytion Chondrocyte growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850048

Середовище для культивування хондроцитів

Середовище для культивування хондроцитів використовується для розмноження моношару хондроцитів людини та великої рогатої худоби, наприклад, перед перенесенням у культуру на осаді або на каркасі. Ми пропонуємо це середовище у вигляді 500 мл базового середовища — окремо або разом із добавками, як у вигляді окремих компонентів, так і у вигляді попередньо змішаної суміші «Supplement-Mix». Окремі компоненти дають змогу регулювати вміст окремих факторів або виключати їх, тоді як суміш добавок додається за один крок. Базове середовище також доступне у тих самих форматах без фенолового червоного, що дозволяє уникнути перешкод у флуоресцентних та колориметричних вимірюваннях, а також слабкої естрогеноподібної активності фенолового червоного. Для використання необхідні добавки, і обидва формати добавок також доступні окремо. Після додавання добавок повне середовище містить 10 % FCS (50 мл на 500 мл базового середовища).

€310.00

без урахування податків та вартості доставки

Cytion Defined fibroblast growth medium-maintenance, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850143

Спеціалізоване середовище для культивування фібробластів

«Defined Fibroblast Maintenance Medium» — це безсироваткова, повністю дефінована середовище, яке підтримує людські фібробласти у стабільному стані, а не стимулює їх швидке розмноження. Воно підходить для досліджень секретома, позаклітинного матриксу та тестування сполук, у яких сироватка могла б створювати перешкоди. Повне середовище містить L-глутамін, рекомбінантний людський bFGF та рекомбінантний людський інсулін. Для розмноження фібробластів обирайте «Середовище для росту фібробластів». Ми пропонуємо це середовище у вигляді 500 мл базового середовища — окремо або разом із безсироватковими добавками, як окремі компоненти або у вигляді попередньо змішаної суміші «Supplement-Mix». Окремі компоненти дають змогу регулювати дозування окремих факторів або виключати їх, тоді як «Supplement-Mix» додається одним кроком. Добавки є обов’язковими для використання, і обидва типи добавок також доступні окремо.

€170.00

без урахування податків та вартості доставки

DMEM:F12 за Хемом (1:1), вага: 3,1 г/л глюкози, вага: 2,5 мМ L-глутаміну, вага: 15 мМ HEPES, вага: 0,5 мМ пірувату натрію, вага: 1,2 г/л NaHCO₃

DMEM:Ham's F12 — це широко визнане та широко використовуване базове середовище для культивування клітин у біологічних дослідженнях. Воно слугує основним джерелом поживних речовин для росту різних клітинних ліній ссавців, особливо у поєднанні з фетальною сироваткою великої рогатої худоби (FBS). Ця унікальна формула поєднує модифіковане середовище Дульбекко (DMEM) та Ham's F-12 (поживна суміш Ham's F-12) у точному співвідношенні 1:1. Додавання L-глутаміну ще більше покращує її склад. DMEM, похідна від мінімального есенціального середовища Ігл (EMEM), має вищу концентрацію амінокислот та вітамінів порівняно зі своїм попередником. Натомість Ham’s F-12 базується на середовищі Ham’s F-10, забезпечуючи доповнюючий набір необхідних компонентів. Для забезпечення оптимального росту клітин зазвичай до DMEM:Ham's F12 додають FBS у типовій концентрації 5–10 %. Це додавання є необхідним, оскільки у середовищі відсутні гормони росту, ліпіди та білки, що мають вирішальне значення для розвитку клітин. DMEM:Ham's F12 містить буферну систему для регулювання рН і часто доповнюється феноловим червоним — індикатором рН. Культивовані клітини в DMEM:Ham's F12 або будь-якому іншому середовищі, що використовує бікарбонатну буферну систему, потребують контрольованого рівня CO₂ у межах 5–10% для підтримання належного рівня рН. Контроль якості • Стерильно фільтрований Зберігання та термін придатності • Зберігати при температурі від +2 °C до +8 °C, захищаючи від світла. • Після відкриття зберігати при температурі 4 °C і використати протягом 6–8 тижнів. Умови транспортування • Температура навколишнього середовища Зберігання • Зберігати в холодильнику при температурі від +2 °C до +8 °C у темному місці. Уникайте заморожування та частого нагрівання до +37 °C, оскільки це знижує якість продукту. • Не нагрівайте середовище вище 37 °C та не використовуйте неконтрольовані джерела тепла, такі як мікрохвильові печі. • Якщо планується використання лише частини середовища, відберіть необхідну кількість і перед використанням нагрійте її до кімнатної температури. Склад Категорія Компоненти Концентрація (мг/л) Амінокислоти Гліцин 18,75 L-аланін 4,45 L-аргінін HCl 147,50 L-аспарагін H₂O 7,50 L-аспарагінова кислота 6,65 L-цистеїн HCl H₂O 17,56 L-цистин 2 HCl 31,29 L-глутамінова кислота 7,35 L-глутамін 365,00 L-гістидин HCl H₂O 31,48 L-ізолейцин 54,47 L-лейцин 59,05 L-лізин HCl 91,25 L-метіонін 17,24 L-фенілаланін 35,48 L-пролін 17,25 L-серин 26,25 L-треонін 53,45 L-триптофан 9,02 L-тирозин 2 Na 2 H₂O 55,79 L-валін 52,85 Вітаміни D-біотин 0,0035 Хлорид холіну 8,98 D-пантотенат кальцію 2,24 Фолієва кислота 2,66 міо-інозитол 12,60 Нікотинамід 2,02 Піридоксин HCl 0,031 Піридоксаль HCl 2,00 Рибофлавін 0,219 Тіамін HCl 2,17 Вітамін В12 0,68 Неорганічні солі CaCl₂·2H₂O 154,50 CuSO₄·5H₂O 0,0013 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,05 FeSO₄·7H₂O 0,417 KCl 311,80 MgCl₂·6H₂O 61,20 MgSO₄·7 H₂O 100,00 NaCl 6996,00 NaHCO₃ 1200,00 Na₂HPO₄ 71,02 NaH₂PO₄·2 H₂O 70,87 ZnSO₄·7 H₂O 0,432 Інші компоненти D-глюкоза 3151,00 Гіпоксантин 2,40 HEPES 3574,50 Лінолева кислота 0,042 Ліпоєва кислота 0,105 Феноловий червоний, натрієва сіль 8,63 Путресцин-2 HCl 0,081 Піруват натрію 55,00 Тімідин 0,365

€25.00

без урахування податків та вартості доставки

DMEM, маса: 4,5 г/л глюкози, маса: 4 мМ L-глутаміну, маса: 3,7 г/л NaHCO₃, маса: 1,0 мМ пірувату натрію

DMEM (модифіковане середовище Дульбекко-Ігл) — це надзвичайно універсальне та широко використовуване базове середовище, призначене для забезпечення росту різноманітних типів клітин ссавців у біологічних дослідженнях. Вона є ідеальним середовищем для культивування первинних фібробластів, нейронів, гліальних клітин, HUVEC, клітин гладких м’язів, а також таких популярних клітинних ліній, як HeLa, 293, Cos-7 та PC-12. Відмінною рисою DMEM від інших середовищ є його унікальний склад. У порівнянні з оригінальним мінімальним есенціальним середовищем Ігл (Eagle's Minimal Essential Medium) концентрація амінокислот та вітамінів у ньому в чотири рази вища. Спочатку DMEM розробляли з низьким вмістом глюкози (1 г/л) та піруватом натрію, проте зараз його часто використовують із вищим рівнем глюкози — як з піруватом натрію, так і без нього. Варто зазначити, що DMEM не містить білків, ліпідів та факторів росту, тому потребує доповнення. Для досягнення оптимального росту зазвичай DMEM доповнюють 10 % сироваткою ембріонів великої рогатої худоби (FBS). Крім того, у DMEM використовується буферна система на основі бікарбонату натрію, що вимагає середовища з вмістом 5–10 % CO₂ для підтримання фізіологічного рН. Модифіковане середовище Дульбекко-Ігл (DMEM) високо цінується серед дефінірованих середовищ для культивування клітин і тканин, задовольняючи потреби у рості різних фенотипів адгезивних клітин. Вона перевершує оригінальне середовище Ігл, розроблене в 1950-х роках для культивування клітин курчат, завдяки вдосконаленому складу добавок, відомому як модифікація Дюльбекко. Ця модифікація значно підвищує вміст окремих амінокислот і вітамінів — аж до чотирикратного порівняно з оригінальним середовищем. У галузі культивування клітин DMEM відіграє важливу роль як середовище для росту різних типів клітин, зокрема первинних клітин, стовбурових клітин та трансформованих клітин. Дослідники також використовують модифіковану версію DMEM для широкого спектру наукових досліджень, таких як розробка лікарських засобів, тканинна інженерія та вивчення сигнальних шляхів клітин. Контроль якості • Стерильно фільтрований Зберігання та термін придатності • Зберігати при температурі від +2 °C до +8 °C, захищаючи від світла. • Після відкриття зберігати при температурі 4 °C і використати протягом 6–8 тижнів. Умови транспортування • Температура навколишнього середовища Зберігання • Зберігати в холодильнику при температурі від +2 °C до +8 °C у темному місці. Уникайте заморожування та частого нагрівання до +37 °C, оскільки це знижує якість продукту. • Не нагрівайте середовище вище 37 °C та не використовуйте неконтрольовані джерела тепла, такі як мікрохвильові печі. • Якщо планується використання лише частини середовища, відберіть необхідну кількість і перед використанням нагрійте її до кімнатної температури. Склад Категорія Компоненти Концентрація (мг/л) Амінокислоти Гліцин 30,00 L-аргінін HCl 84,00 L-цистин 2 HCl 62,57 L-глутамін 584,00 L-гістидин HCl H₂O 42,00 L-ізолейцин 105,00 L-лейцин 105,00 L-лізин HCl 146,00 L-метіонін 30,00 L-фенілаланін 66,00 L-серин 42,00 L-треонін 95,00 L-триптофан 16,00 L-тирозин 2 Na 2H₂O 103,79 L-валін 94,00 Вітаміни Хлорид холіну 4,00 D-пантотенат кальцію 4,00 Фолієва кислота 4,00 міо-інозитол 7,20 Нікотинамід 4,00 Піридоксаль HCl 4,00 Рибофлавін 0,40 Тіамін HCl 4,00 Неорганічні солі CaCl₂·2 H₂O 265,00 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,10 KCl 400,00 MgSO₄·7H₂O 200,10 NaCl 6400,00 NaHCO₃ 3700,00 NaH₂PO₄·2H₂O 141,73 Інші компоненти D-глюкоза 4500,00 Феноловий червоний, натрієва сіль 15,90 Піруват натрію 110,00

€25.00

без урахування податків та вартості доставки

EMEM (MEM Eagle), з додаванням: 2 мМ L-глутаміну, з додаванням: 2,2 г/л NaHCO₃, з додаванням: EBSS

Мінімальне есенціальне середовище Ігл (EMEM) є одним із найпоширеніших базових середовищ для культивування широкого спектру клітин ссавців, зокрема адгезивних клітинних ліній. Ця класична формула, спочатку розроблена Гаррі Іглом, містить незамінні амінокислоти, вітаміни та неорганічні солі, необхідні для забезпечення росту як первинних клітин, так і встановлених клітинних ліній у стандартних умовах культивування. Цей готовий до використання, стерильнофільтрований рідкий препарат доповнений збалансованим сольовим розчином Ерла (EBSS), 2 мМ L-глутаміну, D-глюкози (1,0 г/л) та 2,2 г/л бікарбонату натрію (NaHCO₃), що робить її придатною для використання в атмосфері інкубатора з контрольованим вмістом CO₂ (зазвичай 5 % CO₂). Феноловий червоний, що входить до складу, виконує роль індикатора рН, що дозволяє зручно візуально контролювати стан середовища під час культивування клітин. Основні характеристики • Класичний склад MEM за Ейглом із збалансованим сольовим розчином Ерла (EBSS) • Містить 2 мМ L-глутаміну — готовий до негайного використання • 2,2 г/л бікарбонату натрію — буфер для інкубації при 5 % CO₂ • З D-глюкозою (1,0 г/л) як основним джерелом вуглецю • З феноловим червоним як індикатором рН • Без HEPES та пірувату натрію • Стерильно відфільтроване рідке середовище, готове до використання • pH 7,0 – 7,6 Типові сфери застосування EMEM підтримує культивування широкого спектру клітинних ліній ссавців, включаючи HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 та багатьох первинних клітин. Типові сфери застосування включають: • Рутинне утримання та розмноження адгезивних клітинних ліній • Процеси розмноження вірусів та виробництва вакцин • Дослідження цитотоксичності та біоаналізи • Дослідження трансфекції та експресії білків • Фундаментальні дослідження в галузі клітинної та молекулярної біології Для забезпечення оптимального росту клітин середовище EMEM зазвичай доповнюють 5–10 % сироватки ембріонів великої рогатої худоби (FBS) та, залежно від клітинної лінії, неесенціальними амінокислотами (NEAA) й антибіотиками, такими як пеніцилін/стрептоміцин. Поводження та зберігання Зберігайте нерозкриту пляшку при температурі від +2 °C до +8 °C, захищаючи від світла. Після відкриття використовуйте в асептичних умовах. L-глутамін у розчині піддається поступовому розпаду — для досягнення найкращих результатів рекомендуємо використати середовище протягом 4 тижнів після відкриття або, у разі тривалого зберігання, додати свіжий L-глутамін перед використанням. Перед додаванням до клітин дайте середовищу нагрітися до 37 °C. Якість Виробляється відповідно до суворих стандартів якості. Кожна партія проходить перевірку на стерильність, рН, осмоляльність та рівень ендотоксинів для забезпечення стабільної ефективності при використанні в культурах клітин. Технічні характеристики Характеристики Деталі Тип продуктуMEM Категорія товаруСередовища для культивування клітин ФорматРідкий СтерильніТак Об'єм500 мл L-глутамінЗ L-глутаміном (2 мМ) ГлюкозаЗ глюкозою (1,0 г/л) Бікарбонат натріюЗ NaHCO₃ (2,2 г/л) HEPESБез HEPES Піруват натріюБез пірувату натрію Феноловий червонийЗ феноловим червоним Сольовий розчинЗбалансований сольовий розчин Ерла (EBSS) pH7,0 – 7,6 Вміст ендотоксинівНе вказано Зберіганнявід +2 °C до +8 °C Склад (на 1 літр)

€25.00

без урахування податків та вартості доставки

Cytion Endothelial cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850176

Середовище для культивування ендотеліальних клітин

Середовище для культивування ендотеліальних клітин є стандартним середовищем для культивування ендотеліальних клітин людини з великих судин, таких як пупкова вена, пупкова артерія, підшкірна вена та аорта. Повне середовище містить сироватку плода теляти, L-глутамін, ECGS/H (добавку для росту ендотеліальних клітин з гепарином), EGF, bFGF та гідрокортизон. Для використання визначених рекомбінантних факторів росту, включаючи VEGF замість ECGS/H, обирайте «Advanced Endothelial Cell Growth Medium». Ми пропонуємо середовище у вигляді 500 мл базового середовища — окремо або разом із добавками, як окремі компоненти або у вигляді попередньо змішаної суміші «Supplement-Mix». Окремі компоненти дають змогу регулювати концентрацію окремих факторів або виключати їх, тоді як суміш «Supplement-Mix» додається за один крок. Базове середовище також доступне у форматі без фенолового червоного в тих самих форматах, що дозволяє уникнути перешкод при флуоресцентному та колориметричному аналізі, а також слабкої естрогеноподібної активності фенолового червоного. Для використання необхідні добавки, і обидва формати добавок також доступні окремо. Після додавання добавок готове середовище містить 2 % FCS (10 мл на 500 мл базового середовища).

€200.00

без урахування податків та вартості доставки

Cytion Endothelial cell proliferation medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850002

Середовище для проліферації ендотеліальних клітин

Середовище для проліферації ендотеліальних клітин призначене для швидкого розмноження ендотеліальних клітин людини з великих судин, таких як пупкова вена, пупкова артерія, підшкірна вена, аорта, коронарна та легенева артерії. Повне середовище містить сироватку плода теляти, L-глутамін, гепарин, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, аскорбінову кислоту та гідрокортизон. Для зниження вмісту сироватки слід вибрати середовище для росту ендотеліальних клітин Advanced. Ми пропонуємо середовище у вигляді 500 мл базового середовища — окремо або разом із добавками, як окремі компоненти або у вигляді попередньо змішаної суміші «Supplement-Mix». Окремі компоненти дають змогу регулювати концентрацію окремих факторів або виключати їх, тоді як суміш «Supplement-Mix» додається за один крок. Базове середовище також доступне у тих самих форматах без фенолового червоного, що дозволяє уникнути перешкод під час флуоресцентного та колориметричного аналізу, а також слабкої естрогеноподібної активності фенолового червоного. Для використання необхідні добавки, і обидва формати добавок також доступні окремо. Після додавання добавок повне середовище містить 7 % FCS (35 мл на 500 мл базового середовища).

€170.00

без урахування податків та вартості доставки

Cytion Fibroblast growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850066

Середовище для культивування фібробластів

Середовище для культивування фібробластів використовується для культивування людських фібробластів, наприклад, із дерми або ясен. Для безсироваткового утримання в заданих умовах слід вибрати «Визначене середовище для утримання фібробластів». Ми пропонуємо середовище у вигляді 500 мл базового середовища, окремо або разом з добавками, як окремі компоненти або у вигляді попередньо змішаної суміші добавок (Supplement-Mix). Окремі компоненти дозволяють регулювати або виключати окремі фактори, тоді як суміш добавок додається за один крок. Базове середовище також доступне у тих самих форматах без фенолового червоного, що дозволяє уникнути перешкод під час флуоресцентного та колориметричного аналізу, а також слабкої естрогеноподібної активності фенолового червоного. Для використання необхідні добавки, і обидва формати добавок також доступні окремо. Після додавання добавок повне середовище містить 10 % FCS (50 мл на 500 мл базового середовища).

€180.00

без урахування податків та вартості доставки

Середовище для заморожування CM-1 — 100 мл

Freeze Medium CM-1 від компанії Cytion — це найсучасніше середовище для кріоконсервації, розроблене для забезпечення найвищого рівня життєздатності та функціональності клітин після розморожування. Це універсальне середовище підходить для широкого спектра типів клітин, включаючи як клітини людини, так і тварин, що робить його незамінним інструментом для різноманітних наукових досліджень. Завдяки ретельно збалансованому складу, що містить кріопротекторні речовини та необхідні поживні речовини, середовище Freeze Medium CM-1 мінімізує утворення кристалів льоду та клітинний стрес під час процесу заморожування, тим самим зберігаючи цілісність клітин. Основні особливості Freeze Medium CM-1: • Широка сумісність: ефективний для широкого спектру типів клітин, включаючи первинні клітини, стовбурові клітини та встановлені клітинні лінії. • Висока життєздатність: оптимізовано для максимального відновлення та життєздатності клітин після розморожування, що забезпечує надійні результати експериментів. • Готовий до використання: зручно підготовлений та стерилізований для негайного застосування, що скорочує час підготовки та знижує ризик забруднення. • Підвищена стабільність: зберігає стабільні характеристики в стандартних умовах кріоконсервації, забезпечуючи відтворювані результати. • Тривалий термін зберігання: CM-1 — це готове до використання середовище для кріоконсервації, що містить сироватку, яке можна зберігати в холодильнику до одного року. Використання CM-1 для заморожування клітин Щоб використовувати CM-1 для заморожування як адгезивних, так і суспензійних клітин, виконайте такі кроки: • Для адгезивних клітин промийте їх та відокремте від субстрату культивування. Для клітин у суспензії перейдіть безпосередньо до наступного кроку. • Підрахуйте кількість клітин, щоб переконатися, що їх концентрація відповідає нормі. • Відцентрифугуйте клітини для отримання осаду, а потім ресуспендуйте їх у середовищі для заморожування CM-1. • Перенесіть ресуспендовані клітини в кріопробірки. • Перед перенесенням клітин на довгострокове зберігання використовуйте метод повільного заморожування. Метод Опис Етапи ❄️ Ручне заморожування Покроковий метод, що передбачає поступове зниження температури для забезпечення життєздатності клітин. 1️⃣ Помістіть клітини в заморожувальний середовище у морозильну камеру при температурі 4 °C на 40 хвилин. 2️⃣ Перенесіть у морозильну камеру при температурі -80 °C на 24 години. 3️⃣ Зберігайте клітини в рідкому азоті для довгострокового зберігання. ❄️ Використання пристрою «Mr. Frosty» Зручний пристрій, що дозволяє контролювати швидкість заморожування без використання електроенергії. 1️⃣ Підготуйте клітини в кріопробірках із заморожувальним середовищем. 2️⃣ Помістіть кріопробірки в контейнер «Mr. Frosty». 3️⃣ Зберігайте при температурі -80 °C протягом 24 годин перед перенесенням у рідкий азот. ❄️ Морозильна камера з контрольованою швидкістю заморожування Високоточний морозильник від Thermo Fisher або інших виробників, призначений для контрольованого зниження температури. 1️⃣ Налаштуйте пристрій на поступове зниження температури. 2️⃣ Помістіть підготовлені клітини в морозильну камеру. 3️⃣ Після завершення циклу заморожування перенесіть клітини в рідкий азот. • Зберігайте кріопробірки при температурі нижче -130 °C або в рідкому азоті для довгострокового зберігання. Склад • Містить FBS, DMSO, глюкозу, солі • Буферна здатність: pH = 7,2–7,6 Заморожувальне середовище CM-1 від Cytion — це надійне рішення для кріоконсервації, що забезпечує високу життєздатність і функціональність клітин після розморожування для широкого спектра дослідницьких застосувань.

€99.00

без урахування податків та вартості доставки

Середовище для заморожування CM-1 — 50 мл

Freeze Medium CM-1 від компанії Cytion — це найсучасніше середовище для кріоконсервації, розроблене для забезпечення найвищого рівня життєздатності та функціональності клітин після розморожування. Це універсальне середовище підходить для широкого спектру типів клітин, включаючи як клітини людини, так і тварин, що робить його незамінним інструментом для різноманітних наукових досліджень. Завдяки ретельно збалансованому складу, що містить кріопротекторні речовини та необхідні поживні речовини, середовище Freeze Medium CM-1 мінімізує утворення кристалів льоду та клітинний стрес під час процесу заморожування, тим самим зберігаючи цілісність клітин. Основні особливості Freeze Medium CM-1: • Широка сумісність: ефективний для широкого спектру типів клітин, включаючи первинні клітини, стовбурові клітини та встановлені клітинні лінії. • Висока життєздатність: оптимізовано для максимального відновлення та життєздатності клітин після розморожування, що забезпечує надійні результати експериментів. • Готовий до використання: зручно підготовлений та стерилізований для негайного застосування, що скорочує час підготовки та знижує ризик забруднення. • Підвищена стабільність: зберігає стабільні характеристики в стандартних умовах кріоконсервації, забезпечуючи відтворювані результати. • Тривалий термін зберігання: CM-1 — це готове до використання середовище для кріоконсервації, що містить сироватку, яке можна зберігати в холодильнику до одного року. Використання CM-1 для заморожування клітин Щоб використовувати CM-1 для заморожування як адгезивних, так і суспензійних клітин, виконайте такі кроки: • Для адгезивних клітин промийте їх та відокремте від субстрату культивування. Для клітин у суспензії перейдіть безпосередньо до наступного кроку. • Підрахуйте кількість клітин, щоб переконатися, що їх концентрація відповідає нормі. • Відцентрифугуйте клітини для отримання осаду, а потім ресуспендуйте їх у середовищі для заморожування CM-1. • Перенесіть ресуспендовані клітини в кріопробірки. • Перед перенесенням клітин на довгострокове зберігання використовуйте метод повільного заморожування. Метод Опис Етапи ❄️ Ручне заморожування Покроковий метод, що передбачає поступове зниження температури для забезпечення життєздатності клітин. 1️⃣ Помістіть клітини в заморожувальний середовище у морозильну камеру при температурі 4 °C на 40 хвилин. 2️⃣ Перенесіть у морозильну камеру при температурі -80 °C на 24 години. 3️⃣ Зберігайте клітини в рідкому азоті для довгострокового зберігання. ❄️ Використання пристрою «Mr. Frosty» Зручний пристрій, що дозволяє контролювати швидкість заморожування без використання електроенергії. 1️⃣ Підготуйте клітини в кріопробірках із заморожувальним середовищем. 2️⃣ Помістіть кріопробірки в контейнер «Mr. Frosty». 3️⃣ Зберігайте при температурі -80 °C протягом 24 годин перед перенесенням у рідкий азот. ❄️ Морозильна камера з контрольованою швидкістю заморожування Високоточний морозильник від Thermo Fisher або інших виробників, призначений для контрольованого зниження температури. 1️⃣ Налаштуйте пристрій на поступове зниження температури. 2️⃣ Помістіть підготовлені клітини в морозильну камеру. 3️⃣ Після завершення циклу заморожування перенесіть клітини в рідкий азот. • Зберігайте кріопробірки при температурі нижче -130 °C або в рідкому азоті для довгострокового зберігання. Склад • Містить FBS, DMSO, глюкозу, солі • Буферна здатність: pH = 7,2–7,6 Заморожувальне середовище CM-1 від Cytion — це надійне рішення для кріоконсервації, що забезпечує високу життєздатність та функціональність клітин після розморожування для широкого спектру наукових досліджень.

€59.00

без урахування податків та вартості доставки

Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3

Introducing Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, a specialized modification of Ham's F-12 medium designed to meet the unique requirements of biological research. This advanced medium offers distinct advantages, enhancing the cultivation of primary human hepatocytes, as well as rat and chicken liver cells, particularly in reduced serum conditions. Ham's F-12K (Kaighn's) Medium is carefully formulated to optimize cell culture conditions. It features an enriched composition, providing elevated levels of essential components such as amino acids and sodium pyruvate, as well as additional elements including putrescine, thymidine, hypoxanthine, and zinc. These additions enable researchers to supplement the medium with minimal serum or defined components for specific cell types, facilitating precise experimental conditions. Notably, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium does not contain proteins or growth factors. Consequently, supplementation with growth factors and Fetal Bovine Serum (FBS) is often necessary, allowing researchers to tailor the medium to the requirements of their specific cell lines. For optimal performance, the concentration of FBS must be carefully optimized for each cell line, ensuring optimal growth and functionality. To maintain physiological pH, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium employs a sodium bicarbonate buffer system (2.5 g/L), necessitating a controlled 5-10% CO2 environment during cultivation. This ensures the medium's pH remains within the ideal range for cell growth and viability. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing as well as warming up to +37°C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37°C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium but the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2H2O 135,24 Copper(II) sulfate x 5H2O 0,00 Iron (II) sulfate x 7H2O 0,83 Magnesium chloride x 6H2O 105,72 Magnesium sulfate x 7H2O 394,49 Potassium chloride 283,29 Potassium dihydrogen phosphate 58,52 Sodium chloride 7597,20 di-Sodium hydrogen phosphate anhydrous 115,02 Zinc sulfate x 7H2O 0,14 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 1260,00 Hypoxanthine 4,08 DL-α-Lipoic acid 0,21 Phenol red 3,00 Putrescine x 2HCl 0,32 Sodium pyruvate 220,00 NaHCO3 2500,00 Thymidine 0,73 Amino Acids L-Alanine 17,82 L-Arginine x HCl 421,40 L-Asparagine x H2O 30,02 L-Aspartic acid 26,62 L-Cysteine x HCl x H2O 70,24 L-Glutamine 292,20 L-Glutamic acid 29,42 Glycine 15,01 L-Histidine x HCl x H2O 41,92 L-Isoleucine 7,87 L-Leucine 26,24 L-Lysine x HCl 73,04 L-Methionine 8,95 L-Phenylalanine 9,91 L-Proline 69,06 L-Serine 21,02 L-Threonine 23,82 L-Tryptophan 4,08 L-Tyrosine 10,87 L-Valine 23,42 Vitamins D(+)-Biotin 0,07 D-Calcium pantothenate 0,48 Choline chloride 13,96 Folic acid 1,32 myo-Inositol 18,02 Nicotinamide 0,04 Pyridoxine x HCl 0,06 Riboflavin 0,04 Thiamine x HCl 0,34 Vitamin B12 1,36

€108.00

без урахування податків та вартості доставки

Середовище Ham's F12, що містить: 1,0 мМ стабільного глутаміну, 1,0 мМ пірувату натрію, 1,176 г/л NaHCO₃

Середовище Ham's F-12, також відоме як поживна суміш Ham's F-12, — це широко використовуване базове середовище, розроблене спеціально для культивування клітин. Воно активно застосовується для безсироваткового культивування в одиночних культурах клітин яєчників китайського хом'яка (CHO), клітин легенів та L-клітин мишей. Крім того, Ham’s F-12 є середовищем вибору для проведення тесту на клональну токсичність (CTA). Однією з її помітних переваг є здатність підтримувати ріст клітин без необхідності додавання сироватки. Це усуває потенційні перешкоди, спричинені компонентами сироватки, забезпечуючи стабільні та надійні результати експериментів. Забезпечуючи безсироваткове середовище культивування, середовище Ham's F-12 надає дослідникам більший контроль над їхніми дослідженнями. Ще однією ключовою особливістю середовища Ham’s F-12 є його придатність для висівання окремих клітин. Це робить його чудовим вибором для різноманітних клітинних ліній, зокрема клітин CHO, клітин легенів та L-клітин мишей. Оптимізований поживний склад середовища сприяє ефективному прикріпленню та росту окремих клітин, що дозволяє створювати однорідні клітинні культури з підвищеною відтворюваністю результатів. Крім того, середовище Ham's F-12 отримало визнання як найкраще середовище для проведення тесту на клональну токсичність (CTA). Цей аналіз відіграє вирішальну роль в оцінці цитотоксичного впливу речовин на клітини. Використовуючи середовище Ham's F-12 у CTA, дослідники можуть точно оцінити вплив різних сполук або методів лікування на окремі клітини, отримуючи цінну інформацію щодо токсикологічних профілів. Контроль якості • pH = 7,2 ± 0,02 при 20–25 °C. • Кожна партія пройшла тестування на стерильність та відсутність мікоплазм і бактерій. Зберігання • Зберігати в холодильнику при температурі від +2 °C до +8 °C у темному місці. Заморожування та нагрівання до +37 °C погіршують якість продукту. • Не нагрівайте середовище вище 37 °C та не використовуйте джерела тепла, які неможливо контролювати (наприклад, мікрохвильові печі). • Якщо планується використання лише частини середовища, відберіть цю кількість із флакона та нагрійте її до кімнатної температури. • Термін придатності будь-якого середовища, за винятком базового, становить 8 тижнів з дати виготовлення. Склад Компоненти мг/л Неорганічні солі Хлорид кальцію × 2H₂O 44,00 Сульфат міді(II) х 5H₂O 0,00 Сульфат заліза (II) x 7H₂O 0,83 Хлорид магнію з 6 молекулами води 122,00 Хлорид калію 223,65 Хлорид натрію 7599,00 безводний гідрофосфат динатрію 142,04 Сульфат цинку, 7H₂O 0,86 Інші компоненти D(+)-глюкоза безводна 1801,60 Гіпоксантин 4,08 Лінолева кислота 0,08 DL-α-ліпоєва кислота 0,21 Феноловий червоний 1,20 Путресцин × 2HCl 0,16 Піруват натрію 110,00 Тімідин 0,73 NaHCO₃ 1176,00 Амінокислоти L-аланін 8,91 L-аргінін × HCl 210,70 L-аспарагін × H₂O 15,01 L-аспарагінова кислота 13,31 L-цистеїн × HCl × H₂O 35,12 L-аланіл-L-глутамін 217,30 L-глутамінова кислота 14,71 Гліцин 7,51 L-гістидин × HCl × H₂O 20,96 L-ізолейцин 3,94 L-лейцин 13,12 L-лізин × HCl 36,54 L-метіонін 4,48 L-фенілаланін 4,96 L-пролін 34,53 L-серин 10,51 L-треонін 11,91 L-триптофан 2,04 L-тирозин 5,44 L-валін 11,71 Вітаміни D(+)-біотин 0,01 D-пантотенат кальцію 0,24 Хлорид холіну 13,96 Фолієва кислота 1,32 міо-інозитол 18,02 Нікотинамід 0,04 Піридоксин х HCl 0,06 Рибофлавін 0,04 Тіамін х HCl 0,34 Вітамін В12 1,36

€25.00

без урахування податків та вартості доставки

HEPES Buffer Solution (1M)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered HEPES Buffer Solution (1 M), also known as N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid, is a zwitterionic organic buffering agent widely used in cell culture media. It is designed to maintain stable pH conditions in the physiological range of 6.7 to 8.6, supporting optimal cellular function during in vitro applications. Application and Benefits HEPES provides reliable buffering capacity in cell culture systems, particularly when cells are handled outside a CO₂ incubator. The addition of 10–25 mM HEPES to culture media offers enhanced pH stability during extended manipulation periods, helping to maintain consistent experimental conditions. This buffer is membrane-impermeable, has minimal interference with biochemical reactions, and demonstrates strong chemical and enzymatic stability. These properties make it suitable for a wide range of cell culture and biochemical applications. Formulation and Usage The solution is supplied as a 1 M concentrate prepared in cell culture–grade water and is sterile-filtered for use in contamination-sensitive environments. It can be diluted to the desired working concentration depending on application requirements. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to preserve product integrity. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

без урахування податків та вартості доставки

IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

без урахування податків та вартості доставки

Середовища для культивування клітин: огляд

У галузі наук про життя однією з найважливіших методик є культивування клітин. Термін «культивування клітин» означає вилучення клітин, тканин або органів з організму тварини чи рослини та подальше їх імплантування в штучне середовище, сприятливе для їх виживання та/або росту. Основними вимогами до середовища для оптимального розвитку клітин є контрольована температура, субстрат для прикріплення клітин, відповідне середовище для культивування та інкубатор, що підтримує оптимальний рН та осмоляльність. Клітини повинні мати ці умови, щоб розвиватися на повну силу.

Вибір відповідного середовища для культивування in vitro є етапом клітинної культури, який є одночасно найкритичнішим і найважливішим. Середовище для росту, також відоме як культуральне середовище, — це рідина або гель, розроблений для стимулювання розвитку організмів на мікроскопічному, клітинному або рослинному рівні. Середовище, що використовується для культивування клітин, часто містить достатній запас енергії та речовин, які регулюють клітинний цикл. Основними компонентами культурального середовища є амінокислоти, вітаміни, неорганічні солі, глюкоза та сироватка. Сироватку додають до середовища, оскільки вона виступає джерелом факторів росту, гормонів та факторів прикріплення. Окрім забезпечення поживними речовинами, середовище також сприяє підтримці рівнів рН та осмоляльності.

Типи середовищ, що використовуються в клітинній культурі

Як клітини людини, так і клітини тварин можна культивувати як у штучному або синтетичному середовищі, так і в повністю природному середовищі, доповненому природними елементами. Далі ми надамо вам огляд різних типів середовищ, доступних на сьогодні.

Природні середовища

У природних середовищах містяться лише біологічні рідини, що існують у природному стані. Природні середовища є дуже корисними та зручними для культивування широкого спектру типів тваринних клітин. Недостатнє розуміння точного складу природних середовищ є основним фактором, що зумовлює низьку відтворюваність результатів, отриманих з використанням природних середовищ.

Штучні середовища

Приготування штучних або синтетичних середовищ передбачає додавання поживних речовин (як органічних, так і неорганічних), сироваткових білків, вуглеводів, кофакторів, вітамінів і солей, а також газових фаз O₂ і CO₂ [1].

Було розроблено різні типи штучних середовищ для виконання однієї або кількох із таких функцій: 1) Негайне виживання (збалансований сольовий розчин із точним значенням рН та осмотичним тиском). 2) Тривале виживання (збалансований сольовий розчин, доповнений різними сумішами органічних сполук та/або сироватки). 3) Необмежений розвиток. 4) Спеціалізовані функції.

Існує чотири окремі класифікації штучних середовищ:

Середовища, що містять сироватку

Найпоширенішим видом добавки у середовищах, що використовуються для культивування тваринних клітин, є фетальна бичача сироватка. Її додають до культурального середовища як недорогу добавку для досягнення найкращих можливих умов росту. Окрім того, що сироватка виконує роль переносника або хелатора для нестабільних або нерозчинних у воді поживних речовин, гормонів та факторів росту, інгібіторів протеаз та інших речовин, вона також зв’язує та нейтралізує шкідливі молекули.

Безсироваткові середовища

Наявність сироватки в середовищах має низку недоліків і може спричинити серйозні помилки в інтерпретації результатів імунологічних досліджень [2, 3]. Було створено цілу низку різних безсироваткових середовищ [4, 5]. Зазвичай ці середовища спеціально розроблені для культивування одного типу клітин, наприклад, Knockout Serum Replacement та Knockout DMEM від Thermo Fisher Scientific, а також середовище mTESR від Stem Cell Technologies [6] для стовбурових клітин [7].

Крім того, ці середовища містять визначені кількості очищених факторів росту, ліпопротеїнів та інших білків, які зазвичай забезпечуються саме сироваткою [8]. Ці середовища часто називають «визначеними культуральними середовищами», оскільки складники, з яких вони складаються, добре вивчені.

Хімічно визначені середовища

Ці середовища містять надчисті неорганічні та органічні компоненти, які не зазнали жодного виду забруднення. Вони також можуть містити добавки у вигляді чистих білків, таких як фактори росту.

 Генетична модифікація бактерій або дріжджів у поєднанні з додаванням певних жирних кислот, вітамінів, холестерину та амінокислот призводить до синтезу їхніх складових [9].

Безбілкові середовища

Безбілкові середовища — це середовища, які взагалі не містять білка, а замість цього містять лише небілкові елементи. У порівнянні з середовищами з додаванням сироватки використання середовищ без додавання білка сприяє більшій проліферації клітин та експресії білків, а також полегшує очищення будь-якого продукту, отриманого в подальшому процесі [10–12]. Білок не входить до складу таких середовищ, як MEM та RPMI-1640. Однак за необхідності можна додавати білкові добавки.

Культуральні середовища та їхні основні компоненти

Комерційні культуральні середовища можна придбати у вигляді порошку або рідини; вони часто містять різноманітні поживні речовини, такі як амінокислоти, глюкоза, солі, вітаміни та інші харчові добавки. 

Потреби в цих компонентах різняться для кожної клітинної лінії, і саме ці відмінності зумовлюють велику кількість різних рецептур середовищ. Кожен компонент виконує певну функцію, про що йтиметься в наступних параграфах:

Буферні системи

Для підтримання оптимальних умов росту необхідно контролювати рН, що часто здійснюється за допомогою однієї з двох буферних систем:

Природна буферна система

Співвідношення CO₂/H₂CO₃ в атмосфері дорівнює співвідношенню в середовищі, що створює природний буферний механізм. Щоб зберегти цей природний буферний механізм, культури необхідно утримувати в повітряному середовищі з вмістом CO₂ 5–10 %, чого часто досягають за допомогою CO₂-інкубатора. Однією з головних переваг використання природного буфера є його дешевизна та безпечність.

HEPES

Хімічне буферування з використанням цвіттеріону HEPES має більшу буферну здатність у діапазоні pH 7,2–7,4 і не потребує регульованого газового середовища. Для певних типів клітин більша доза HEPES може бути шкідливою. Середовища, що містять HEPES, також набагато чутливіші до фототоксичного впливу флуоресцентного світла [13].

Феноловий червоний

Індикатор рН феноловий червоний часто входить до складу комерційно доступних культуральних середовищ, що дозволяє здійснювати постійний моніторинг рН. У міру розмноження клітин метаболіти, що виробляються ними, спричиняють зміну рН і, відповідно, зміну кольору середовища. Феноловий червоний має подвійний вплив на колір середовища: при кислому рН воно стає жовтим, а при лужному — фіолетовим. рН 7,4 — оптимальне значення для культивування клітин — надає середовищу флуоресцентного червоного забарвлення.

Однак феноловий червоний має кілька недоліків: по-перше, він здатний імітувати дію низки стероїдних гормонів, насамперед естрогену [14]. Тому під час дослідження естрогенчутливих клітин, таких як тканина молочної залози, рекомендується використовувати середовище без фенолового червоного. Наявність фенолового червоного в деяких безсироваткових сумішах порушує натрій-калієвий баланс. Додавання до середовища сироватки або гормону гіпофіза великої рогатої худоби може нейтралізувати цей ефект [15]. По-третє, наявність фенолового червоного ускладнює виявлення клітин під час експериментів із проточною цитометрією.

Неорганічні солі

Середовища, що містять неорганічні солі, такі як іони натрію, калію та кальцію, сприяють підтримці осмотичної рівноваги та регулюють мембранний потенціал.

Амінокислоти

Оскільки амінокислоти є основними компонентами білків, вони є невід’ємною складовою кожного середовища для росту клітин, яке коли-небудь було розроблено. Оскільки клітини не здатні самостійно синтезувати певні амінокислоти, важливо, щоб культуральне середовище містило незамінні амінокислоти. Вони необхідні для проліферації клітин, а концентрація, в якій вони присутні, визначає максимальну щільність клітин, якої можна досягти. Зокрема, L-глутамін, незамінна амінокислота, відіграє особливо важливу роль.

L-глутамін виконує функцію вторинного джерела енергії для метаболізму та забезпечує азотом для синтезу NAD, NADPH та нуклеотидів. Оскільки L-глутамін є нестабільною амінокислотою, яка з часом перетворюється на форму, яку клітини не можуть використовувати, його необхідно додавати до середовища.

Крім того, до середовища можна додавати незамінні амінокислоти, щоб поповнити запаси тих, що були витрачені під час процесу росту. Додавання незамінних амінокислот до середовища для росту прискорює ріст клітин та підвищує їх життєздатність.

Вуглеводи

Вуглеводи у вигляді цукрів є основним джерелом енергії. Багато середовищ, окрім більш поширених цукрів — глюкози та галактози, — містять також мальтозу та фруктозу.

Білки та пептиди

Альбумін, трансферин та фібронектин — це найпоширеніші білки та пептиди. Вони мають особливе значення в середовищах, що не містять сироватки. Альбумін, трансферин, апротинін, фетуїн та фібронектин — це лише деякі з білків, які можна знайти в сироватці, що є багатим джерелом білка.

Альбумін — це основний білок крові, функція якого полягає у зв’язуванні та транспортуванні різних речовин, зокрема води, солей, вільних жирних кислот, гормонів та вітамінів, між різними органами та клітинами. Здатність альбуміну зв’язуватися з хімічними речовинами робить його ефективним засобом для видалення шкідливих сполук із середовища, в якому культивуються клітини.

Апротинін є захисним агентом у системах культивування клітин, оскільки він стабільний при нейтральному та кислому рН, а також стійкий до високих температур і руйнування, яке можуть спричиняти протеолітичні ферменти. Він здатний інгібувати низку серинових протеаз, зокрема трипсин.

Фетуїн — це глікопротеїн, який у сироватці крові плодів та новонароджених тварин може виявлятися у більших кількостях порівняно з сироваткою дорослих тварин. Крім того, він діє як інгібітор серинових протеаз. Білок фібронектин є важливим компонентом у процесі клітинної адгезії. Трансферин — це білок, який транспортує залізо та відповідає за доставку заліза до клітинних мембран.

Жирні кислоти та ліпіди

Вони відіграють вирішальну роль у безсироватковому середовищі за відсутності сироватки.

Вітаміни

Для розвитку та проліферації клітин необхідні численні вітаміни. Клітини не можуть синтезувати вітаміни в достатній кількості, тому вони є незамінними в культурах тканин як харчові добавки.

У клітинній культурі сироватка є основним джерелом вітамінів; однак середовища також збагачують різними вітамінами, щоб зробити їх придатними для конкретного типу клітин. Найчастіше для стимуляції росту використовують вітаміни групи В.

Мікроелементи

Хімічні елементи, такі як мідь, цинк, селен та проміжні сполуки трикарбонових кислот, відомі як мікроелементи. Мікроелементи часто додають до середовищ, що не містять сироватки, щоб замінити ті, які зазвичай присутні в сироватці. Ці елементи є важливими хімічними компонентами, необхідними для здорового розвитку клітин. Багато біохімічних реакцій, таких як активність ферментів, залежать від певних мікроелементів.

Добавки до середовища

Повноцінне живильне середовище, рекомендоване для певних клітинних ліній, потребує додаткових компонентів, яких немає у базовому середовищі та сироватці. Ці харчові добавки сприяють росту клітин та нормальному метаболізму.

Хоча гормони, фактори росту та сигнальні молекули є необхідними для належної проліферації певних клітинних ліній, завжди слід дотримуватися таких запобіжних заходів: оскільки додавання добавок може змінити осмоляльність повного живильного середовища, що може гальмувати розвиток клітин, завжди рекомендується перевіряти осмоляльність після додавання добавок. Для більшості клітинних ліній оптимальна осмоляльність становить від 260 до 320 мОсм/кг.

Антибіотики

Антибіотики часто застосовують для пригнічення розвитку бактеріальних та грибкових забруднювачів [16], хоча вони не є необхідними для росту клітин. Оскільки антибіотики можуть маскувати забруднення мікоплазмами та резистентними бактеріями, їхнє рутинне використання для клітинних культур не рекомендується [17, 18].

Крім того, антибіотики можуть порушувати метаболізм гіперчутливих клітин. Часто використовуються комбінації пеніциліну та стрептоміцину, вироблені компаніями MilliporeSigma та Life Technologies. Плазмоцин застосовувався при культивуванні клітинних ліній гліом TS603, TS516 та BT260 [19], і було доведено його ефективність у усуненні мікоплазмового забруднення (20).

Сироватка

У сироватці присутні альбуміни, фактори росту та інгібітори росту. Сироватка є одним із найважливіших компонентів середовища для культивування клітин, оскільки вона забезпечує амінокислоти, білки, вітаміни (особливо жиророзчинні вітаміни, такі як А, D, Е та К), вуглеводи, ліпіди, гормони, фактори росту, мінерали та мікроелементи.

Для стимулювання розвитку культивованих клітин часто використовують сироватку ембріональної та телячої походження. Ембріональна сироватка є багатим джерелом факторів росту і підходить для клонування клітин та розвитку чутливих клітин. Через знижені здатності до стимулювання росту телячу сироватку застосовують у експериментах з інгібування контакту. Звичайні середовища для культивування часто містять від 2 % до 10 % сироватки. Додавання сироватки до культурального середовища має такі цілі [21]:

  • Сироватка постачає клітинам необхідні поживні речовини (як у розчині, так і у зв’язаному з білками вигляді).

  • Сироватка містить низку факторів росту та гормонів, що беруть участь у стимулюванні росту та спеціалізованій діяльності клітин.

  • Вона містить багато зв’язувальних білків, таких як альбумін і трансферин, які транспортують інші хімічні речовини в клітину. Наприклад, альбумін доставляє в клітини жири, вітаміни, гормони тощо.

  • Вона також містить білки, такі як фібронектин, які підвищують адгезію клітин до субстрату. Крім того, вона виробляє елементи, що сприяють розширенню клітин перед поділом.

  • Вона доставляє інгібітори протеаз, які запобігають протеолізу в клітинах.

  • Вона також містить мінерали, такі як Na+, K+, Zn2+ та Fe2+.

  • Він підвищує в'язкість середовища, тим самим захищаючи клітини від механічних пошкоджень під час перемішування суспензійної культури.

  • Він також виконує буферну функцію.

Література

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Nutrition of animal cells in tissue culture; initial studies on a synthetic medium. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Швидка адсорбція компонента сироватки плода теляти клітинами ссавців у культурі. Потенційне джерело артефактів у дослідженнях антисироваток до клітинно-специфічних антигенів. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Сула К., Драбер П., Ноуза К. Додавання сироватки до середовища, що використовується для приготування клітинних суспензій, як можливе джерело артефактів у клітинно-опосередкованих реакціях, досліджуваних за допомогою тесту на підколінних лімфатичних вузлах. J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] Маріані Е., Маріані А., Монако М., Лаллі Е., Вітале М., Фаччіні А. Комерційні безсироваткові середовища: ріст гібридом та виробництво моноклональних антитіл. J Immunol Methods. 1991;145:175–83

[5] Barnes D, Sato G. Методи культивування клітин у безсироватковому середовищі. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Ю Х., Лу С., Гасіор К., Сінг Д., Васкес Санчес С., Тапіа О. та ін. Шаперони HSP70 транспортують ТДП-43 без РНК у анізотропні внутрішньоядерні рідкі сферичні оболонки. Science. 2021;371:

[7] Мехарена Х., Марко А., Діліп В., Локшин Е., Акацу Г., Муллаху Дж. та ін. Старіння, індуковане синдромом Дауна, порушує архітектуру ядра нейральних прогеніторів. Cell Stem Cell. 2022;29:116–130.e7

[8] Іскоув Н., Мелчерс Ф. Повна заміна сироватки альбуміном, трансферином та соєвими ліпідами в культурах В-лімфоцитів, що реагують на ліпополісахариди. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Систематичне вдосконалення хімічно визначеного безбілкового середовища для росту гібридом та виробництва моноклональних антитіл. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] Дарфлер Ф. Безбілкова середа для росту гібридом та інших клітин імунної системи. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Барнс Д., Сато Г. Безсироваткова клітинна культура: уніфікований підхід. Cell. 1980;22:649–55

[12] Гамільтон В., Хем Р. Клональний ріст клітинних ліній китайського хом’яка в безбілкових середовищах. In Vitro. 1977;13:537–47

[13] Зіглер Дж., Лепе Зуніга Дж., Вістіка Б., Гері І. Аналіз цитотоксичних ефектів культивувального середовища, що містить HEPES, підданого впливу світла. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7

[14] Бертуа І., Каценелленбоген Ж., Каценелленбоген Б. Феноловий червоний у середовищах для культивування тканин є слабким естрогеном: наслідки для дослідження естрогенчутливих клітин у культурі. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] Karmiol S. Розробка безсироваткових середовищ. У: Master JRW, ред. Культура тваринних клітин, 3-тє вид. Оксфорд: Oxford University Press; 2000.

[16] Перлман Д. Застосування антибіотиків у середовищах для культивування клітин. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Поширення та контроль мікоплазмової інфекції клітинних культур. In Vitro. 1976;12:643–8

[18] Мастерс Дж., Стейсі Г. Заміна середовища та пасажування клітинних ліній. Nat Protoc. 2007;2:2276–84

[19] Чакраборти А., Лаукка Т., Миллікоскі М., Рінгель А., Букер М., Толсторуков М. та ін. Гістонова деметилаза KDM6A безпосередньо реагує на кисень, регулюючи хроматин та долю клітин. Science. 2019;363:1217-1222

[20] Молла Каземіха В., Азарі С., Аманзаде А., Бонакдар С., Шоджаї Могадам М., Хабібі Анбухі М. та ін. Ефективність препарату Plasmocin™ щодо різних ліній клітин ссавців, інфікованих молікутами, у порівнянні з антибіотиками, що зазвичай застосовуються в клітинних культурах: місцевий досвід. Cytotechnology. 2011;63:609–20

[21] Краг Хансен У. Молекулярні аспекти зв’язування ліганду з сироватковим альбуміном. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53