Przejdź do treści

Media i odczynniki

40 produkty

Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

bez podatku i kosztów wysyłki

Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€310.00

bez podatku i kosztów wysyłki

Cytion Endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850006

Zaawansowana pożywka do hodowli komórek śródbłonka

Pożywka „Advanced Endothelial Cell Growth Medium” służy do hodowli ludzkich komórek śródbłonka pochodzących z dużych naczyń krwionośnych. Określone ludzkie rekombinowane czynniki wzrostu, w tym VEGF i Long R3 IGF-1, zastępują surowy suplement wzrostu komórek śródbłonka. Kompletna pożywka zawiera surowicę płodową cielęcą, L-glutaminę, heparynę, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, kwas askorbinowy i hydrokortyzon. Aby uzyskać szybszą ekspansję przy wyższej zawartości surowicy, należy wybrać pożywkę do proliferacji komórek śródbłonka (Endothelial Cell Proliferation Medium). Aby uzyskać preparat bez VEGF, należy wybrać pożywkę do wzrostu komórek śródbłonka (Endothelial Cell Growth Medium). Oferujemy pożywkę w postaci 500 ml pożywki podstawowej, samodzielnie lub wraz z suplementami, zarówno jako pojedyncze składniki, jak i jako gotową mieszankę suplementów (Supplement-Mix). Pojedyncze składniki pozwalają na dostosowanie lub pominięcie poszczególnych czynników, natomiast mieszanka suplementów „Supplement-Mix” jest dodawana w jednym etapie. Pożywka bazowa jest również dostępna w wersji bez czerwieni fenolowej w tych samych formatach, co pozwala uniknąć zakłóceń w odczytach fluorescencyjnych i kolorymetrycznych, a także słabej aktywności estrogenopodobnej czerwieni fenolowej. Do stosowania niezbędne są suplementy, a oba formaty suplementów są również dostępne osobno. Po dodaniu suplementów kompletna pożywka zawiera 2% FCS (10 ml na 500 ml pożywki bazowej).

€180.00

bez podatku i kosztów wysyłki

Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850019

Zaawansowana pożywka do hodowli komórek śródbłonka mikronaczyniowego

Pożywka „Advanced Microvascular Endothelial Cell Growth Medium” służy do hodowli ludzkich komórek śródbłonka mikronaczyniowego, pochodzących na przykład ze skóry właściwej, płuc lub serca. Zdefiniowane ludzkie rekombinowane czynniki wzrostu zastępują surowy suplement wzrostu komórek śródbłonka. Kompletna pożywka zawiera surowicę płodową cielęcą, L-glutaminę, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, kwas askorbinowy i hydrokortyzon. Aby uzyskać preparat zawierający ECGS/H i bez VEGF, należy wybrać pożywkę do hodowli komórek śródbłonka mikronaczyniowego. Oferujemy pożywkę w postaci 500 ml pożywki bazowej, samodzielnie lub wraz z suplementami, zarówno jako pojedyncze składniki, jak i jako gotową mieszankę suplementów (Supplement-Mix). Pojedyncze składniki umożliwiają dostosowanie dawek poszczególnych czynników lub ich pominięcie, natomiast mieszankę suplementów dodaje się w jednym etapie. Pożywka bazowa jest również dostępna w wersji bez czerwieni fenolowej w tych samych formatach, co pozwala uniknąć zakłóceń w odczytach fluorescencyjnych i kolorymetrycznych, a także słabej aktywności estrogenopodobnej czerwieni fenolowej. Do stosowania niezbędne są suplementy, a oba formaty suplementów są również dostępne osobno. Po dodaniu suplementów kompletna pożywka zawiera 5% FCS (25 ml na 500 ml pożywki bazowej).

€200.00

bez podatku i kosztów wysyłki

Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

bez podatku i kosztów wysyłki

DMEM:F12 według Hama (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO₃

DMEM:Ham’s F12 to powszechnie uznana i szeroko stosowana pożywka bazowa w hodowli komórek do badań biologicznych. Stanowi ona podstawowe źródło składników odżywczych niezbędnych do wzrostu różnych linii komórkowych ssaków, zwłaszcza po uzupełnieniu o surowicę płodową bydlęcą (FBS). Ta unikalna formuła łączy zmodyfikowaną pożywkę Eagle'a Dulbecco (DMEM) oraz pożywkę Ham's F-12 (mieszanka odżywcza Ham's F-12) w precyzyjnym stosunku 1:1. Dodatek L-glutaminy dodatkowo wzbogaca jej skład. DMEM, wywodząca się z minimalnej pożywki niezbędnej Eagle’a (EMEM), charakteryzuje się wyższym stężeniem aminokwasów i witamin w porównaniu ze swoją poprzedniczką. Natomiast pożywka Ham’s F-12 opiera się na pożywce Ham’s F-10, dostarczając uzupełniający zestaw niezbędnych składników. Aby zapewnić optymalny wzrost komórek, powszechną praktyką jest uzupełnianie pożywki DMEM:Ham's F12 surowicą płodową bydlęcą (FBS) w typowym stężeniu 5–10%. Dodatek ten jest niezbędny, ponieważ w pożywce brakuje hormonów wzrostu, lipidów i białek niezbędnych do rozwoju komórek. DMEM:Ham’s F12 zawiera system buforowy pH i często jest uzupełniane fenolo-czerwienią, która pełni rolę wskaźnika pH. Komórki hodowane w DMEM:Ham’s F12 lub w dowolnej pożywce wykorzystującej system buforowy wodorowęglanowy wymagają kontrolowanego stężenia CO₂ na poziomie 5–10%, aby utrzymać odpowiedni poziom pH. Kontrola jakości • Filtrowane sterylnie Przechowywanie i okres przydatności • Przechowywać w temperaturze od +2°C do +8°C, chroniąc przed światłem. • Po otwarciu przechowywać w temperaturze 4°C i zużyć w ciągu 6–8 tygodni. Warunki transportu • Temperatura otoczenia Przechowywanie • Przechowywać w lodówce w temperaturze od +2°C do +8°C, w ciemności. Należy unikać zamrażania i częstego podgrzewania do +37°C, ponieważ obniża to jakość produktu. • Nie podgrzewać pożywki powyżej 37°C ani nie używać niekontrolowanych źródeł ciepła, takich jak kuchenki mikrofalowe. • Jeśli ma zostać wykorzystana tylko część pożywki, należy pobrać wymaganą ilość i przed użyciem ogrzać ją do temperatury pokojowej. Skład Kategoria Składniki Stężenie (mg/l) Aminokwasy Glicyna 18,75 L-alanina 4,45 L-arginina HCl 147,50 L-asparagina H₂O 7,50 Kwas L-asparaginowy 6,65 L-cysteina HCl H₂O 17,56 L-cystyna 2 HCl 31,29 Kwas L-glutaminowy 7,35 L-glutamina 365,00 L-histydyna HCl H₂O 31,48 L-izoleucyna 54,47 L-leucyna 59,05 L-lizyna HCl 91,25 L-metionina 17,24 L-fenyloalanina 35,48 L-prolina 17,25 L-seryna 26,25 L-treonina 53,45 L-tryptofan 9,02 L-tyrozyna 2 Na 2 H₂O 55,79 L-walina 52,85 Witaminy D-biotyna 0,0035 Chlorek choliny 8,98 D-pantotenian wapnia 2,24 Kwas foliowy 2,66 mio-inozytol 12,60 Nikotynamid 2,02 Chlorowodorek pirydoksyny 0,031 Chlorowodorek pirydoksalu 2,00 Ryboflawina 0,219 Chlorowodorek tiaminy 2,17 Witamina B12 0,68 Sole nieorganiczne CaCl₂·2 H₂O 154,50 CuSO₄·5H₂O 0,0013 Fe(NO₃)₃·9H₂O 0,05 FeSO₄·7H₂O 0,417 KCl 311,80 MgCl₂·6 H₂O 61,20 MgSO₄·7 H₂O 100,00 NaCl 6996,00 NaHCO₃ 1200,00 Na₂HPO₄ 71,02 NaH₂PO₄·2 H₂O 70,87 ZnSO₄·7 H₂O 0,432 Inne składniki D-glukoza 3151,00 Hipoksantyna 2,40 HEPES 3574,50 Kwas linolowy 0,042 Kwas liponowy 0,105 Sól sodowa czerwieni fenolowej 8,63 Putrescyna 2 HCl 0,081 Pirowinian sodu 55,00 Tymidyna 0,365

€25.00

bez podatku i kosztów wysyłki

DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO₃, w: 1,0 mM pirogronianu sodu

DMEM (zmodyfikowana pożywka Dulbecco’s Modified Eagle Medium) to niezwykle wszechstronna i powszechnie stosowana pożywka podstawowa, przeznaczona do wspierania wzrostu szerokiej gamy komórek ssaków w badaniach biologicznych. Stanowi idealną pożywkę do hodowli pierwotnych fibroblastów, neuronów, komórek glejowych, komórek HUVEC, komórek mięśni gładkich, a także popularnych linii komórkowych, takich jak HeLa, 293, Cos-7 i PC-12. To, co wyróżnia DMEM spośród innych pożywek, to jego unikalny skład. Zawiera on aż czterokrotnie wyższe stężenie aminokwasów i witamin w porównaniu z oryginalną minimalną pożywką esencjalną Eagle'a (Eagle's Minimal Essential Medium). Początkowo opracowany z niską zawartością glukozy (1 g/l) i pirogronianem sodu, DMEM jest często stosowany z wyższym poziomem glukozy, zarówno z pirogronianem sodu, jak i bez niego. Co istotne, DMEM nie zawiera białek, lipidów ani czynników wzrostu, co wymaga ich uzupełnienia. Aby osiągnąć optymalny wzrost, powszechnie stosuje się uzupełnienie DMEM o 10% surowicy płodowej bydlęcej (FBS). Ponadto w DMEM zastosowano układ buforowy z wodorowęglanem sodu, co wymaga środowiska o stężeniu CO₂ wynoszącym 5–10% w celu utrzymania fizjologicznego pH. Modyfikowana pożywka Eagle’a Dulbecco (DMEM) cieszy się dużym uznaniem wśród pożywek o określonym składzie stosowanych w hodowli komórek i tkanek, zaspokajając potrzeby wzrostowe różnych fenotypów komórek adhezyjnych. Przewyższa ono oryginalną pożywkę Eagle'a, opracowaną w latach 50. XX wieku do hodowli komórek kurzych, dzięki ulepszonej formule uzupełniającej znanej jako modyfikacja Dulbecco. Modyfikacja ta znacznie zwiększa zawartość wybranych aminokwasów i witamin nawet czterokrotnie w porównaniu z oryginalną pożywką. W dziedzinie hodowli komórkowej DMEM odgrywa kluczową rolę jako pożywka wzrostowa dla różnych typów komórek, w tym komórek pierwotnych, komórek macierzystych i komórek transformowanych. Naukowcy wykorzystują również zmodyfikowaną wersję DMEM w szerokim zakresie zastosowań badawczych, takich jak odkrywanie leków, inżynieria tkankowa oraz badania szlaków sygnałowych komórek. Kontrola jakości • Filtrowane sterylnie Przechowywanie i okres przydatności • Przechowywać w temperaturze od +2°C do +8°C, w miejscu chronionym przed światłem. • Po otwarciu przechowywać w temperaturze 4°C i zużyć w ciągu 6–8 tygodni. Warunki transportu • Temperatura otoczenia Przechowywanie • Przechowywać w lodówce w temperaturze od +2°C do +8°C, w ciemności. Należy unikać zamrażania i częstego podgrzewania do +37°C, ponieważ obniża to jakość produktu. • Nie podgrzewać pożywki powyżej 37°C ani nie używać niekontrolowanych źródeł ciepła, takich jak kuchenki mikrofalowe. • Jeśli ma zostać wykorzystana tylko część pożywki, należy pobrać wymaganą ilość i przed użyciem ogrzać ją do temperatury pokojowej. Skład Kategoria Składniki Stężenie (mg/l) Aminokwasy Glicyna 30,00 L-arginina HCl 84,00 L-cystyna 2 HCl 62,57 L-glutamina 584,00 L-histydyna HCl H₂O 42,00 L-izoleucyna 105,00 L-leucyna 105,00 L-lizyna HCl 146,00 L-metionina 30,00 L-fenyloalanina 66,00 L-seryna 42,00 L-treonina 95,00 L-tryptofan 16,00 L-tyrozyna 2 Na 2H₂O 103,79 L-walina 94,00 Witaminy Chlorek choliny 4,00 D-pantotenian wapnia 4,00 Kwas foliowy 4,00 mio-inozytol 7,20 Nikotynamid 4,00 Chlorowodorek pirydoksalu 4,00 Ryboflawina 0,40 Chlorowodorek tiaminy 4,00 Sole nieorganiczne CaCl₂·2 H₂O 265,00 Fe(NO₃)₃·9H₂O 0,10 KCl 400,00 MgSO₄·7H₂O 200,10 NaCl 6400,00 NaHCO₃ 3700,00 NaH₂PO₄·2H₂O 141,73 Inne składniki D-glukoza 4500,00 Sól sodowa czerwieni fenolowej 15,90 Pirowinian sodu 110,00

€25.00

bez podatku i kosztów wysyłki

EMEM (MEM Eagle), zawierający: 2 mM L-glutaminy, 2,2 g/l NaHCO₃, oraz EBSS

Pożywka EMEM (Eagle’s Minimum Essential Medium) jest jedną z najczęściej stosowanych pożywek bazowych do hodowli szerokiej gamy komórek ssaków, a w szczególności linii komórkowych przylegających do podłoża. Ta klasyczna formuła, opracowana pierwotnie przez Harry’ego Eagle’a, zawiera niezbędne aminokwasy, witaminy i sole nieorganiczne wymagane do wspierania wzrostu zarówno komórek pierwotnych, jak i ustabilizowanych linii komórkowych w standardowych warunkach hodowli. Ta gotowa do użycia, sterylnie filtrowana płynna formuła jest uzupełniona zrównoważonym roztworem soli Earle’a (EBSS), 2 mM L-glutaminy, D-glukozy (1,0 g/l) oraz 2,2 g/l wodorowęglanu sodu (NaHCO₃), dzięki czemu nadaje się do stosowania w inkubatorze z kontrolowaną atmosferą CO₂ (zazwyczaj 5% CO₂). Zawarta w preparacie czerwień fenolowa pełni rolę wskaźnika pH, umożliwiając wygodne wizualne monitorowanie stanu pożywki podczas hodowli komórkowej. Najważniejsze cechy • Klasyczna receptura MEM według Eagle’a z zrównoważonym roztworem soli Earle’a (EBSS) • Zawiera 2 mM L-glutaminy – gotowe do natychmiastowego użycia • 2,2 g/l wodorowęglanu sodu – buforowana do inkubacji przy 5% CO₂ • Z D-glukozą (1,0 g/l) jako głównym źródłem węgla • Z czerwienią fenolową jako wskaźnikiem pH • Bez HEPES i bez pirogronianu sodu • Płynna pożywka przefiltrowana sterylnie, gotowa do użycia • pH 7,0 – 7,6 Typowe zastosowania EMEM umożliwia hodowlę szerokiej gamy linii komórek ssaków, w tym HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 oraz wielu komórek pierwotnych. Typowe zastosowania obejmują: • Rutynową hodowlę i namnażanie linii komórek przylegających • Procesy namnażania wirusów i produkcji szczepionek • Zastosowania w badaniach cytotoksyczności i testach biologicznych • Badania dotyczące transfekcji i ekspresji białek • Badania podstawowe w dziedzinie biologii komórkowej i biologii molekularnej Aby zapewnić optymalny wzrost komórek, pożywkę EMEM zazwyczaj uzupełnia się 5–10 % surowicy płodowej bydlęcej (FBS) oraz, w zależności od linii komórkowej, nieesencjalnymi aminokwasami (NEAA) i antybiotykami, takimi jak penicylina/streptomycyna. Postępowanie i przechowywanie Nieotwartą butelkę należy przechowywać w temperaturze od +2 °C do +8 °C, w miejscu chronionym przed światłem. Po otwarciu należy stosować w warunkach aseptycznych. L-glutamina w roztworze ulega stopniowemu rozkładowi – w celu uzyskania najlepszych wyników zalecamy zużycie pożywki w ciągu 4 tygodni od otwarcia lub uzupełnienie jej świeżą L-glutaminą przed użyciem, jeśli była przechowywana przez dłuższy czas. Przed dodaniem do komórek należy poczekać, aż pożywka ogrzeje się do temperatury 37 °C. Jakość Wyprodukowane zgodnie z rygorystycznymi normami jakości. Każda partia jest badana pod kątem sterylności, pH, osmolalności i poziomu endotoksyn, aby zapewnić stałą wydajność w zastosowaniach związanych z hodowlą komórek. Specyfikacja produktu Specyfikacja Szczegóły Typ produktuMEM Kategoria produktuPożywki do hodowli komórkowej FormatPłyn SterylneTak Pojemność500 ml L-glutaminaZ L-glutaminą (2 mM) GlukozaZ glukozą (1,0 g/l) Wodorowęglan soduZ NaHCO₃ (2,2 g/l) HEPESBez HEPES Pirowinian soduBez pirogronianu sodu Czerwień fenolowaZ czerwienią fenolową Roztwór soliZrównoważony roztwór soli Earle’a (EBSS) pH7,0 – 7,6 Zawartość endotoksynNieokreślona Przechowywanieod +2 °C do +8 °C Skład (skład na litr)

€25.00

bez podatku i kosztów wysyłki

Środek do zamrażania CM-1 – 100 ml

Freeze Medium CM-1 firmy Cytion to najnowocześniejsze podłoże do kriokonserwacji, zaprojektowane w celu zapewnienia najwyższego poziomu żywotności i funkcjonalności komórek po rozmrożeniu. To wszechstronne podłoże nadaje się do szerokiego spektrum typów komórek, w tym zarówno komórek ludzkich, jak i zwierzęcych, co czyni je niezbędnym narzędziem w różnorodnych zastosowaniach badawczych. Dzięki starannie zrównoważonej kombinacji środków krioprotekcyjnych i niezbędnych składników odżywczych Freeze Medium CM-1 minimalizuje tworzenie się kryształków lodu oraz stres komórkowy podczas procesu zamrażania, zachowując w ten sposób integralność komórek. Najważniejsze cechy Freeze Medium CM-1 to: • Szeroka kompatybilność: Skuteczne w przypadku szerokiego zakresu typów komórek, w tym komórek pierwotnych, komórek macierzystych i ustalonych linii komórkowych. • Wysoka żywotność: Zoptymalizowany pod kątem maksymalizacji odzysku i żywotności komórek po rozmrożeniu, co zapewnia wiarygodne wyniki eksperymentów. • Gotowość do użycia: wygodnie przygotowany i wysterylizowany do natychmiastowego zastosowania, co skraca czas przygotowania i zmniejsza ryzyko zanieczyszczenia. • Zwiększona stabilność: Utrzymuje stałą wydajność w standardowych warunkach kriokonserwacji, zapewniając powtarzalne wyniki. • Długi okres przydatności do użycia: CM-1 to gotowe do użycia pożywka do kriokonserwacji zawierająca surowicę, którą można przechowywać w lodówce do jednego roku. Wykorzystanie CM-1 do zamrażania komórek Aby użyć CM-1 do zamrażania zarówno komórek przylegających, jak i zawieszonych, należy wykonać następujące czynności: • W przypadku komórek przylegających należy je przemyć i oddzielić od podłoża hodowlanego. W przypadku komórek w zawiesinie należy przejść bezpośrednio do następnego kroku. • Należy policzyć komórki, aby upewnić się, że mają odpowiednie stężenie. • Odwirować komórki w celu uzyskania osadu, a następnie zawiesić je w pożywce do zamrażania CM-1. • Przenieś zawieszone komórki do probówek kriogenicznych. • Przed przeniesieniem komórek do przechowywania długoterminowego należy zastosować metodę powolnego zamrażania. Metoda Opis Etapy ❄️ Zamrażanie ręczne Metoda krok po kroku polegająca na stopniowym obniżaniu temperatury w celu zapewnienia żywotności komórek. 1️⃣ Umieść komórki w pożywce do zamrażania w zamrażarce o temperaturze 4°C na 40 minut. 2️⃣ Przenieś do zamrażarki o temperaturze -80°C na 24 godziny. 3️⃣ Przechowuj komórki w ciekłym azocie w celu długoterminowej konserwacji. ❄️ Korzystanie z urządzenia Mr. Frosty Wygodne urządzenie, które pozwala na kontrolowanie szybkości zamrażania bez zasilania elektrycznego. 1️⃣ Przygotuj komórki w probówkach kriogenicznych z pożywką do zamrażania. 2️⃣ Umieść probówki kriogeniczne w pojemniku Mr. Frosty. 3️⃣ Przechowuj w temperaturze -80°C przez 24 godziny przed przeniesieniem do ciekłego azotu. ❄️ Zamrażarka z kontrolowaną szybkością Precyzyjna zamrażarka firmy Thermo Fisher lub innego producenta, zaprojektowana do kontrolowanego obniżania temperatury. 1️⃣ Zaprogramuj urządzenie tak, aby stopniowo obniżało temperaturę. 2️⃣ Umieść przygotowane komórki w zamrażarce. 3️⃣ Po zakończeniu cyklu zamrażania przenieś komórki do ciekłego azotu. • W celu długotrwałego przechowywania przechowuj probówki kriogeniczne w temperaturze poniżej -130°C lub w ciekłym azocie. Składniki • Zawiera FBS, DMSO, glukozę, sole • Zdolność buforowa: pH = 7,2 do 7,6 Środek do zamrażania CM-1 firmy Cytion stanowi niezawodne rozwiązanie do kriokonserwacji, zapewniające wysoką żywotność i funkcjonalność komórek po rozmrożeniu w szerokim zakresie zastosowań badawczych.

€99.00

bez podatku i kosztów wysyłki

Środek do zamrażania CM-1 – 50 ml

Freeze Medium CM-1 firmy Cytion to najnowocześniejsze podłoże do kriokonserwacji, zaprojektowane w celu zapewnienia najwyższego poziomu żywotności i funkcjonalności komórek po rozmrożeniu. To wszechstronne podłoże nadaje się do szerokiego spektrum typów komórek, w tym zarówno komórek ludzkich, jak i zwierzęcych, co czyni je niezbędnym narzędziem w różnorodnych zastosowaniach badawczych. Dzięki starannie zbilansowanej mieszance środków krioprotekcyjnych i niezbędnych składników odżywczych Freeze Medium CM-1 minimalizuje tworzenie się kryształków lodu oraz stres komórkowy podczas procesu zamrażania, zachowując w ten sposób integralność komórek. Najważniejsze cechy Freeze Medium CM-1 to: • Szeroka kompatybilność: Skuteczne w przypadku szerokiego zakresu typów komórek, w tym komórek pierwotnych, komórek macierzystych i ustalonych linii komórkowych. • Wysoka żywotność: Zoptymalizowany pod kątem maksymalizacji odzysku i żywotności komórek po rozmrożeniu, co zapewnia wiarygodne wyniki eksperymentów. • Gotowość do użycia: wygodnie przygotowany i wysterylizowany do natychmiastowego zastosowania, co skraca czas przygotowania i zmniejsza ryzyko zanieczyszczenia. • Zwiększona stabilność: Utrzymuje stałą wydajność w standardowych warunkach kriokonserwacji, zapewniając powtarzalne wyniki. • Długi okres przydatności do użycia: CM-1 to gotowe do użycia pożywka do kriokonserwacji zawierająca surowicę, którą można przechowywać w lodówce do jednego roku. Wykorzystanie CM-1 do zamrażania komórek Aby użyć CM-1 do zamrażania zarówno komórek przylegających, jak i zawieszonych, należy wykonać następujące czynności: • W przypadku komórek przylegających należy je przemyć i oddzielić od podłoża hodowlanego. W przypadku komórek w zawiesinie należy przejść bezpośrednio do następnego kroku. • Należy policzyć komórki, aby upewnić się, że mają odpowiednie stężenie. • Odwirować komórki w celu uzyskania osadu, a następnie zawiesić je w pożywce do zamrażania CM-1. • Przenieś zawieszone komórki do probówek kriogenicznych. • Przed przeniesieniem komórek do przechowywania długoterminowego należy zastosować metodę powolnego zamrażania. Metoda Opis Etapy ❄️ Zamrażanie ręczne Metoda krok po kroku polegająca na stopniowym obniżaniu temperatury w celu zapewnienia żywotności komórek. 1️⃣ Umieść komórki w pożywce do zamrażania w zamrażarce o temperaturze 4°C na 40 minut. 2️⃣ Przenieś do zamrażarki o temperaturze -80°C na 24 godziny. 3️⃣ Przechowuj komórki w ciekłym azocie w celu długoterminowej konserwacji. ❄️ Korzystanie z urządzenia Mr. Frosty Wygodne urządzenie, które pozwala na kontrolowanie szybkości zamrażania bez zasilania elektrycznego. 1️⃣ Przygotuj komórki w probówkach kriogenicznych z pożywką do zamrażania. 2️⃣ Umieść probówki kriogeniczne w pojemniku Mr. Frosty. 3️⃣ Przechowuj w temperaturze -80°C przez 24 godziny przed przeniesieniem do ciekłego azotu. ❄️ Zamrażarka z kontrolowaną szybkością Precyzyjna zamrażarka firmy Thermo Fisher lub innego producenta, zaprojektowana do kontrolowanego obniżania temperatury. 1️⃣ Zaprogramuj urządzenie tak, aby stopniowo obniżało temperaturę. 2️⃣ Umieść przygotowane komórki w zamrażarce. 3️⃣ Po zakończeniu cyklu zamrażania przenieś komórki do ciekłego azotu. • W celu długotrwałego przechowywania przechowuj probówki kriogeniczne w temperaturze poniżej -130°C lub w ciekłym azocie. Składniki • Zawiera FBS, DMSO, glukozę, sole • Zdolność buforowa: pH = 7,2 do 7,6 Środek do zamrażania CM-1 firmy Cytion stanowi niezawodne rozwiązanie do kriokonserwacji, zapewniające wysoką żywotność i funkcjonalność komórek po rozmrożeniu w szerokim zakresie zastosowań badawczych.

€59.00

bez podatku i kosztów wysyłki

Pożywka Ham’s F12K Medium, zawierająca: 2,0 mM L-glutaminy, 2,0 mM pirogronianu sodu oraz 2,5 g/l NaHCO₃

Przedstawiamy pożywkę Ham’s F-12K (Kaighn’s) – specjalistyczną modyfikację pożywki Ham’s F-12, opracowaną z myślą o specyficznych wymaganiach badań biologicznych. Ta zaawansowana pożywka oferuje wyraźne zalety, usprawniając hodowlę pierwotnych ludzkich hepatocytów, a także komórek wątroby szczurów i kurcząt, szczególnie w warunkach o obniżonej zawartości surowicy. Pożywka Ham's F-12K (Kaighn's) została starannie opracowana w celu optymalizacji warunków hodowli komórkowej. Charakteryzuje się wzbogaconym składem, zapewniającym podwyższony poziom niezbędnych składników, takich jak aminokwasy i pirogronian sodu, a także dodatkowych elementów, w tym putrescyny, tymidyny, hipoksantyny i cynku. Dodatki te umożliwiają badaczom uzupełnianie pożywki minimalną ilością surowicy lub określonymi składnikami dostosowanymi do konkretnych typów komórek, co ułatwia uzyskanie precyzyjnych warunków eksperymentalnych. Co istotne, pożywka Ham's F-12K (Kaighn's) nie zawiera białek ani czynników wzrostu. W związku z tym często konieczne jest uzupełnienie jej o czynniki wzrostu i surowicę płodową bydlęcą (FBS), co pozwala badaczom dostosować pożywkę do wymagań konkretnych linii komórkowych. Aby uzyskać optymalne wyniki, stężenie FBS musi być starannie dostosowane do każdej linii komórkowej, co zapewnia optymalny wzrost i funkcjonalność komórek. Aby utrzymać fizjologiczne pH, pożywka Ham's F-12K (Kaighn's) wykorzystuje system buforowy z wodorowęglanem sodu (2,5 g/l), co wymaga kontrolowanego środowiska o stężeniu CO₂ wynoszącym 5–10% podczas hodowli. Zapewnia to utrzymanie pH pożywki w zakresie idealnym dla wzrostu i żywotności komórek. Kontrola jakości • pH = 7,2 ± 0,02 w temperaturze 20–25°C. • Każda partia została przebadana pod kątem sterylności oraz braku mykoplazm i bakterii. Przechowywanie • Przechowywać w lodówce w temperaturze od +2°C do +8°C, w ciemności. Zarówno zamrażanie, jak i podgrzewanie do temperatury +37°C obniżają jakość produktu. • Nie należy podgrzewać pożywki do temperatury wyższej niż 37°C ani używać niekontrolowanych źródeł ciepła (np. kuchenek mikrofalowych). • Jeśli ma zostać wykorzystana tylko część pożywki, należy pobrać tę ilość z butelki i ogrzać ją do temperatury pokojowej. • Okres przydatności wszystkich pożywek, z wyjątkiem pożywki podstawowej, wynosi 8 tygodni od daty produkcji. Skład Składniki mg/l Sole nieorganiczne Chlorek wapnia x 2H₂O 135,24 Siarczan miedzi(II) x 5H₂O 0,00 Siarczan żelaza(II) x 7H₂O 0,83 Chlorek magnezu x 6H₂O 105,72 Siarczan magnezu x 7H₂O 394,49 Chlorek potasu 283,29 Dihydrofosforan potasu 58,52 Chlorek sodu 7597,20 bezwodny wodorofosforan disodowy 115,02 Siarczan cynku x 7H₂O 0,14 Pozostałe składniki Bezwodna D(+)-glukoza 1260,00 Hipoksantyna 4,08 Kwas DL-α-liponowy 0,21 Czerwień fenolowa 3,00 Putrescyna x 2HCl 0,32 Pirowinian sodu 220,00 NaHCO₃ 2500,00 Tymidyna 0,73 Aminokwasy L-alanina 17,82 L-arginina x HCl 421,40 L-asparagina x H₂O 30,02 Kwas L-asparaginowy 26,62 L-cysteina x HCl x H₂O 70,24 L-glutamina 292,20 Kwas L-glutaminowy 29,42 Glicyna 15,01 L-histydyna x HCl x H₂O 41,92 L-izoleucyna 7,87 L-leucyna 26,24 L-lizyna x HCl 73,04 L-metionina 8,95 L-fenyloalanina 9,91 L-prolina 69,06 L-seryna 21,02 L-treonina 23,82 L-tryptofan 4,08 L-tyrozyna 10,87 L-walina 23,42 Witaminy D(+)-biotyna 0,07 D-pantotenian wapnia 0,48 Chlorek choliny 13,96 Kwas foliowy 1,32 mio-inozytol 18,02 Nikotynamid 0,04 pirydoksyna x HCl 0,06 Ryboflawina 0,04 Tiamina x HCl 0,34 Witamina B12 1,36

€108.00

bez podatku i kosztów wysyłki

Pożywka Ham’s F12 Medium, zawierająca: 1,0 mM stabilnej glutaminy, 1,0 mM pirogronianu sodu, 1,176 g/l NaHCO₃

Podłoże Ham’s F-12, znane również jako mieszanka odżywcza Ham’s F-12, jest powszechnie stosowanym podłożem bazowym opracowanym specjalnie do hodowli komórkowej. Jest ono szeroko wykorzystywane do bezsurowicowej hodowli komórek jajnika chomika chińskiego (CHO), komórek płucnych oraz mysich komórek L w hodowli pojedynczych komórek. Ponadto Ham’s F-12 jest pożywką z wyboru do przeprowadzania testu toksyczności klonalnej (CTA). Jedną z jego znaczących zalet jest zdolność do wspierania wzrostu komórek bez konieczności dodawania surowicy. Eliminuje to potencjalne zakłócenia spowodowane przez składniki surowicy, zapewniając spójne i wiarygodne wyniki eksperymentalne. Zapewniając środowisko hodowli bezsurowicowe, pożywka Ham's F-12 oferuje badaczom większą kontrolę nad prowadzonymi badaniami. Kolejną kluczową cechą pożywki Ham’s F-12 jest jej przydatność do wysiewu pojedynczych komórek. To sprawia, że jest ona doskonałym wyborem dla różnych linii komórkowych, w tym komórek CHO, komórek płucnych oraz mysich komórek L. Zoptymalizowany skład odżywczy pożywki ułatwia skuteczne przyleganie i wzrost pojedynczych komórek, umożliwiając tworzenie jednorodnych hodowli komórkowych o zwiększonej powtarzalności. Ponadto pożywka Ham's F-12 zyskała uznanie jako preferowana pożywka do testu toksyczności klonalnej (CTA). Test ten odgrywa kluczową rolę w ocenie cytotoksycznego działania substancji na komórki. Wykorzystując pożywkę Ham's F-12 w teście CTA, naukowcy mogą dokładnie ocenić wpływ różnych związków lub metod leczenia na pojedyncze komórki, uzyskując cenne informacje na temat profili toksykologicznych. Kontrola jakości • pH = 7,2 ± 0,02 w temperaturze 20–25°C. • Każda partia została przebadana pod kątem sterylności oraz braku mykoplazm i bakterii. Przechowywanie • Przechowywać w lodówce w temperaturze od +2°C do +8°C, w ciemności. Zamrażanie i ogrzewanie do temperatury powyżej +37°C obniżają jakość produktu. • Nie należy podgrzewać pożywki do temperatury wyższej niż 37°C ani używać niekontrolowanych źródeł ciepła (np. kuchenek mikrofalowych). • Jeśli ma zostać wykorzystana tylko część pożywki, należy pobrać tę ilość z butelki i ogrzać ją do temperatury pokojowej. • Okres przydatności wszystkich pożywek, z wyjątkiem pożywki podstawowej, wynosi 8 tygodni od daty produkcji. Skład Składniki mg/l Sole nieorganiczne Chlorek wapnia x 2H₂O 44,00 Siarczan miedzi(II) x 5H₂O 0,00 Siarczan żelaza(II) x 7H₂O 0,83 Chlorek magnezu x 6H₂O 122,00 Chlorek potasu 223,65 Chlorek sodu 7599,00 bezwodny wodorofosforan disodowy 142,04 Siarczan cynku x 7H₂O 0,86 Pozostałe składniki Bezwodna D(+)-glukoza 1801,60 Hipoksantyna 4,08 Kwas linolowy 0,08 Kwas DL-α-liponowy 0,21 Czerwień fenolowa 1,20 Putrescyna x 2HCl 0,16 Pirowinian sodu 110,00 Tymidyna 0,73 NaHCO₃ 1176,00 Aminokwasy L-alanina 8,91 L-arginina x HCl 210,70 L-asparagina x H₂O 15,01 Kwas L-asparaginowy 13,31 L-cysteina x HCl x H₂O 35,12 L-alanil-L-glutamina 217,30 Kwas L-glutaminowy 14,71 Glicyna 7,51 L-histydyna x HCl x H₂O 20,96 L-izoleucyna 3,94 L-leucyna 13,12 L-lizyna x HCl 36,54 L-metionina 4,48 L-fenyloalanina 4,96 L-prolina 34,53 L-seryna 10,51 L-treonina 11,91 L-tryptofan 2,04 L-tyrozyna 5,44 L-walina 11,71 Witaminy D(+)-biotyna 0,01 D-pantotenian wapnia 0,24 Chlorek choliny 13,96 Kwas foliowy 1,32 mio-inozytol 18,02 Nikotynamid 0,04 pirydoksyna x HCl 0,06 Ryboflawina 0,04 Tiamina x HCl 0,34 Witamina B12 1,36

€25.00

bez podatku i kosztów wysyłki

HEPES Buffer Solution (1M)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered HEPES Buffer Solution (1 M), also known as N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid, is a zwitterionic organic buffering agent widely used in cell culture media. It is designed to maintain stable pH conditions in the physiological range of 6.7 to 8.6, supporting optimal cellular function during in vitro applications. Application and Benefits HEPES provides reliable buffering capacity in cell culture systems, particularly when cells are handled outside a CO₂ incubator. The addition of 10–25 mM HEPES to culture media offers enhanced pH stability during extended manipulation periods, helping to maintain consistent experimental conditions. This buffer is membrane-impermeable, has minimal interference with biochemical reactions, and demonstrates strong chemical and enzymatic stability. These properties make it suitable for a wide range of cell culture and biochemical applications. Formulation and Usage The solution is supplied as a 1 M concentrate prepared in cell culture–grade water and is sterile-filtered for use in contamination-sensitive environments. It can be diluted to the desired working concentration depending on application requirements. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to preserve product integrity. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

bez podatku i kosztów wysyłki

IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

bez podatku i kosztów wysyłki

Pożywki do hodowli komórkowej: przegląd

W dziedzinie nauk przyrodniczych jedną z najważniejszych metod jest hodowla komórkowa. Termin „hodowla komórkowa” oznacza pobranie komórek, tkanek lub narządów od zwierzęcia lub rośliny, a następnie umieszczenie ich w sztucznym środowisku sprzyjającym ich przeżyciu i/lub wzrostowi. Podstawowe wymagania środowiskowe niezbędne do optymalnego rozwoju komórek to kontrolowana temperatura, podłoże umożliwiające przyleganie komórek, odpowiednia pożywka oraz inkubator utrzymujący optymalne pH i osmolalność. Komórki muszą mieć zapewnione te warunki, aby mogły w pełni rozwinąć swój potencjał.

Wybór odpowiedniej pożywki wzrostowej do hodowli in vitro jest etapem hodowli komórkowej, który jest zarówno najbardziej krytyczny, jak i najważniejszy. Pożywka wzrostowa, znana również jako pożywka hodowlana, to płyn lub żel opracowany w celu stymulowania rozwoju organizmów w skali mikroskopowej, komórkowej lub roślinnej. Pożywka stosowana do hodowli komórek często zawiera odpowiednią ilość energii oraz substancji regulujących cykl komórkowy. Głównymi składnikami pożywki hodowlanej są aminokwasy, witaminy, sole nieorganiczne, glukoza i surowica. Surowica jest dodawana do pożywki, ponieważ stanowi źródło czynników wzrostu, hormonów i czynników adhezyjnych. Oprócz dostarczania składników odżywczych pożywka przyczynia się również do utrzymania odpowiedniego poziomu pH i osmolalności.

Rodzaje pożywek stosowanych w hodowli komórkowej

Zarówno komórki ludzkie, jak i zwierzęce można hodować zarówno w pożywkach sztucznych lub syntetycznych, jak i w całkowicie naturalnych pożywkach, uzupełnionych o naturalne składniki. Poniżej przedstawiamy przegląd różnych rodzajów pożywek dostępnych obecnie na rynku.

Pożywki naturalne

W pożywkach naturalnych występują wyłącznie płyny biologiczne występujące w stanie naturalnym. Pożywki naturalne są bardzo pomocne i łatwe w stosowaniu do hodowli szerokiej gamy typów komórek zwierzęcych. Brak dokładnej wiedzy na temat składników tworzących pożywki naturalne jest głównym czynnikiem wpływającym na niską powtarzalność wyników uzyskanych przy ich użyciu.

Pożywki sztuczne

Przygotowanie pożywek sztucznych lub syntetycznych polega na dodaniu składników odżywczych (zarówno organicznych, jak i nieorganicznych), białek surowicy, węglowodanów, kofaktorów, witamin i soli, a także faz gazowych O₂ i CO₂ [1].

Opracowano różne rodzaje pożywek sztucznych w celu spełnienia jednej lub kilku z następujących funkcji: 1) Natychmiastowe utrzymanie przy życiu (zrównoważony roztwór soli o precyzyjnym pH i ciśnieniu osmotycznym). 2) Przedłużone utrzymanie przy życiu (zrównoważony roztwór soli uzupełniony różnymi preparatami związków organicznych i/lub surowicy). 3) Nieograniczony rozwój. 4) Funkcje specjalistyczne.

Istnieją cztery odrębne klasyfikacje pożywek sztucznych:

Pożywki zawierające surowicę

Najczęściej spotykanym dodatkiem w pożywkach stosowanych do hodowli komórek zwierzęcych jest surowica płodowa bydlęca. Dodaje się ją do pożywki hodowlanej jako niedrogi dodatek w celu uzyskania jak najlepszych warunków wzrostu. Oprócz pełnienia roli nośnika lub chelatora dla niestabilnych lub nierozpuszczalnych w wodzie składników odżywczych, hormonów i czynników wzrostu, inhibitorów proteaz oraz innych substancji, surowica wiąże również i neutralizuje szkodliwe cząsteczki.

Pożywki bezsurowicowe

Obecność surowicy w pożywkach ma szereg wad i może powodować poważne błędy w interpretacji wyników badań immunologicznych [2, 3]. Opracowano wiele różnych pożywek bezsurowicowych [4, 5]. Pożywki te są zazwyczaj specjalnie opracowane w celu wspierania hodowli jednego typu komórek, takich jak Knockout Serum Replacement i Knockout DMEM firmy Thermo Fisher Scientific oraz pożywka mTESR firmy Stem Cell Technologies [6], przeznaczona dla komórek macierzystych [7].

Ponadto pożywki te zawierają określone ilości oczyszczonych czynników wzrostu, lipoprotein i innych białek, które w innym przypadku są zazwyczaj dostarczane przez surowicę [8]. Pożywki te są często określane jako „określone pożywki hodowlane”, ponieważ składniki wchodzące w ich skład są dobrze poznane.

Pożywki zdefiniowane chemicznie

Pożywki te zawierają ultraczyste składniki nieorganiczne i organiczne, które nie zostały zanieczyszczone żadnymi substancjami. Mogą one również zawierać dodatki czystych białek, takich jak czynniki wzrostu.

 Modyfikacja genetyczna bakterii lub drożdży, w połączeniu z dodatkiem określonych kwasów tłuszczowych, witamin, cholesterolu i aminokwasów, prowadzi do wytworzenia ich składników [9].

Pożywki bezbiałkowe

Pożywki bezbiałkowe to takie, które nie zawierają w ogóle białka, a zamiast tego zawierają wyłącznie składniki niebiałkowe. W porównaniu z pożywkami z dodatkiem surowicy stosowanie pożywek bez dodatku białka sprzyja większej proliferacji komórek i ekspresji białek oraz ułatwia oczyszczanie wszelkich produktów wytworzonych w procesie dalszej obróbki [10–12]. Białko nie jest zawarte w preparatach takich jak MEM i RPMI-1640. Jednak w razie potrzeby można podać suplement białkowy.

Pożywki hodowlane i ich podstawowe składniki

Dostępne w handlu pożywki hodowlane można nabyć w postaci proszku lub płynu i często zawierają one różnorodne składniki odżywcze, takie jak aminokwasy, glukoza, sole, witaminy i inne suplementy diety. 

Zapotrzebowanie na te składniki jest różne dla każdej linii komórkowej, a różnice te odpowiadają za dużą liczbę różnych receptur pożywek. Każdy składnik pełni określoną funkcję, która zostanie omówiona w poniższych akapitach:

Systemy buforujące

Aby utrzymać optymalne warunki wzrostu, należy kontrolować pH, co często odbywa się za pomocą jednego z dwóch systemów buforujących:

Naturalny system buforujący

Stosunek CO₂/H₂CO₃ w atmosferze jest taki sam jak w pożywce, co tworzy naturalny mechanizm buforujący. Aby zachować ten naturalny mechanizm buforujący, hodowle muszą być utrzymywane w środowisku powietrznym zawierającym 5–10% CO₂, co często osiąga się za pomocą inkubatora z CO₂. Jedną z największych zalet stosowania naturalnego bufora jest jego niski koszt i bezpieczeństwo.

HEPES

Buforowanie chemiczne z wykorzystaniem jonu obojniakowego HEPES charakteryzuje się większą zdolnością buforującą w zakresie pH 7,2–7,4 i nie wymaga regulowanego środowiska gazowego. W przypadku niektórych typów komórek większa dawka HEPES może być szkodliwa. Pożywki zawierające HEPES są również znacznie bardziej podatne na fototoksyczne działanie światła fluorescencyjnego [13].

Czerwień fenolowa

Wskaźnik pH – czerwony fenol – jest często dodawany do dostępnych w handlu pożywek hodowlanych, co pozwala na ciągłe monitorowanie pH. W miarę namnażania się komórek wytwarzane przez nie metabolity powodują zmianę pH, a co za tym idzie – zmianę koloru pożywki. Czerwień fenolowa wywiera podwójny wpływ na barwę pożywki, zabarwiając ją na żółto przy kwaśnym pH i na fioletowo przy pH zasadowym. pH 7,4, czyli optymalna wartość dla hodowli komórkowej, powoduje, że pożywka przybiera fluorescencyjny czerwony kolor.

Czerwony fenol ma jednak kilka wad: po pierwsze, jest w stanie naśladować działanie wielu hormonów steroidowych, przede wszystkim estrogenu [14]. Dlatego podczas badań nad komórkami wrażliwymi na estrogen, takimi jak tkanka piersi, zaleca się stosowanie pożywki wolnej od czerwonego fenolu. Obecność czerwieni fenolowej w kilku preparatach bezsurowicowych zaburza równowagę sodowo-potasową. Dodanie surowicy lub bydlęcego hormonu przysadkowego do pożywki może przeciwdziałać temu efektowi [15]. Po trzecie, obecność czerwieni fenolowej utrudnia wykrywanie w eksperymentach z wykorzystaniem cytometrii przepływowej.

Sole nieorganiczne

Pożywki zawierające sole nieorganiczne, takie jak jony sodu, potasu i wapnia, pomagają utrzymać równowagę osmotyczną i regulują potencjał błonowy.

Aminokwasy

Ponieważ aminokwasy są podstawowymi składnikami białek, stanowią one niezbędny składnik każdej pożywki do hodowli komórek, jaką kiedykolwiek opracowano. Ponieważ komórki nie są w stanie samodzielnie wytworzyć niektórych aminokwasów, ważne jest, aby pożywka hodowlana zawierała aminokwasy egzogenne. Są one niezbędne do proliferacji komórek, a stężenie, w jakim występują, determinuje maksymalną gęstość komórek, jaką można osiągnąć. Szczególnie istotna jest L-glutamina, która jest aminokwasem egzogennym.

L-glutamina pełni funkcję dodatkowego źródła energii dla metabolizmu i dostarcza azotu do produkcji NAD, NADPH oraz nukleotydów. Ponieważ L-glutamina jest niestabilnym aminokwasem, który z upływem czasu przekształca się w postać, której komórki nie są w stanie wykorzystać, należy ją dodawać do pożywki.

Ponadto do pożywki można dodawać aminokwasy nieesencjalne w celu uzupełnienia tych, które zostały zużyte w trakcie procesu wzrostu. Wzbogacenie pożywki wzrostowej o aminokwasy nieesencjalne przyspiesza wzrost komórek i zwiększa ich żywotność.

Węglowodany

Węglowodany w postaci cukrów stanowią główne źródło energii. Wiele pożywek zawiera również maltozę i fruktozę, oprócz bardziej powszechnych cukrów, takich jak glukoza i galaktoza.

Białka i peptydy

Albumina, transferyna i fibronektyna to najczęściej stosowane białka i peptydy. Mają one szczególne znaczenie w pożywkach, które nie zawierają surowicy. Albumina, transferyna, aprotynina, fetuina i fibronektyna to niektóre z białek, które można znaleźć w surowicy, będącej bogatym źródłem białka.

Albumina jest głównym białkiem występującym we krwi, a jej funkcją jest wiązanie i transport różnych substancji, w tym wody, soli, wolnych kwasów tłuszczowych, hormonów i witamin, między różnymi narządami i komórkami. Zdolność albuminy do wiązania się z substancjami chemicznymi sprawia, że jest ona skutecznym środkiem do usuwania szkodliwych związków z pożywki, w której hodowane są komórki.

Aprotynina jest środkiem ochronnym w systemach hodowli komórkowej, ponieważ jest stabilna w środowisku o pH obojętnym i kwaśnym, a także odporna na wysokie temperatury i zniszczenie, jakie mogą powodować enzymy proteolityczne. Jest w stanie hamować działanie wielu proteaz serynowych, w tym między innymi trypsyny.

Fetuina jest glikoproteiną, której stężenie w surowicy płodów i noworodków zwierząt może być wyższe niż w surowicy dorosłych osobników. Ponadto pełni ona rolę inhibitora proteaz serynowych. Białko fibronektyna jest niezbędnym składnikiem procesu adhezji komórkowej. Transferyna to białko transportujące żelazo, odpowiedzialne za dostarczanie żelaza do błon komórkowych.

Kwasy tłuszczowe i lipidy

Odgrywają kluczową rolę w pożywkach bezsurowicowych, gdy nie ma surowicy.

Witaminy

Liczne witaminy są niezbędne do rozwoju i proliferacji komórek. Komórki nie są w stanie wytworzyć witamin w wystarczających ilościach, dlatego w hodowli tkankowej są one niezbędne jako suplementy diety.

W hodowli komórkowej surowica jest głównym źródłem witamin; jednak pożywki są również wzbogacane różnymi witaminami, aby dostosować je do konkretnego typu komórek. Najczęściej do stymulacji wzrostu stosuje się witaminy z grupy B.

Pierwiastki śladowe

Pierwiastki chemiczne, takie jak miedź, cynk, selen oraz półprodukty kwasu trikarboksylowego, są znane jako pierwiastki śladowe. Pierwiastki śladowe są często dodawane do pożywek niezawierających surowicy w celu zastąpienia tych, które zazwyczaj występują w surowicy. Pierwiastki te są ważnymi składnikami chemicznymi niezbędnymi do zdrowego rozwoju komórek. Wiele reakcji biochemicznych, takich jak aktywność enzymów, zależy od określonych mikroelementów.

Suplementy pożywki

Pełna pożywka wzrostowa zalecana dla niektórych linii komórkowych wymaga dodatkowych składników, których brakuje w pożywkach bazowych i surowicy. Te suplementy diety wspomagają wzrost komórek i prawidłowe funkcjonowanie metaboliczne.

Chociaż hormony, czynniki wzrostu i cząsteczki sygnałowe są niezbędne do prawidłowej proliferacji określonych linii komórkowych, należy zawsze stosować następujące środki ostrożności: Ponieważ dodanie suplementów może zmienić osmolalność kompletnej pożywki wzrostowej, co może hamować rozwój komórek, zawsze zaleca się sprawdzenie osmolalności po dodaniu suplementów. W przypadku większości linii komórkowych optymalna osmolalność wynosi od 260 do 320 mOSM/kg.

Antybiotyki

Antybiotyki są często stosowane w celu zahamowania rozwoju zanieczyszczeń bakteryjnych i grzybiczych [16], chociaż nie są one niezbędne do wzrostu komórek. Ponieważ antybiotyki mogą maskować zakażenie mykoplazmami i opornymi bakteriami, nie zaleca się ich rutynowego stosowania w hodowli komórkowej [17, 18].

Ponadto antybiotyki mogą zakłócać metabolizm komórek nadwrażliwych. Często stosuje się mieszanki penicyliny i streptomycyny produkowane przez firmy MilliporeSigma i Life Technologies. Plasmocin był stosowany w hodowli linii komórkowych glejaka TS603, TS516 i BT260 [19] i wykazał skuteczność w usuwaniu zanieczyszczenia mykoplazmami (20).

Surowica

W surowicy występują albuminy, czynniki wzrostu oraz inhibitory wzrostu. Surowica jest jednym z najważniejszych składników pożywki do hodowli komórkowej, ponieważ dostarcza aminokwasów, białek, witamin (zwłaszcza witamin rozpuszczalnych w tłuszczach, takich jak A, D, E i K), węglowodanów, lipidów, hormonów, czynników wzrostu, minerałów i pierwiastków śladowych.

W celu wspomagania rozwoju hodowanych komórek często wykorzystuje się surowicę pochodzącą od płodów i cieląt. Surowica płodowa stanowi bogate źródło czynników wzrostu i nadaje się do klonowania komórek oraz rozwoju komórek wrażliwych. Ze względu na zmniejszone właściwości stymulujące wzrost surowica cielęca jest stosowana w eksperymentach dotyczących hamowania kontaktu. Standardowe pożywki hodowlane często zawierają od 2% do 10% surowicy. Dodanie surowicy do pożywki hodowlanej służy następującym celom [21]:

  • Surowica dostarcza komórkom niezbędnych składników odżywczych (zarówno w roztworze, jak i związanych z białkami).

  • W surowicy zawarte jest kilka czynników wzrostu i hormonów biorących udział w stymulacji wzrostu oraz wyspecjalizowanej aktywności komórek.

  • Zawiera wiele białek wiążących, takich jak albumina i transferyna, które transportują inne substancje chemiczne do komórek. Na przykład albumina dostarcza do komórek tłuszcze, witaminy, hormony itp.

  • Dostarcza również białka, takie jak fibronektyna, które zwiększają przyczepność komórek do podłoża. Ponadto wytwarza czynniki rozprzestrzeniające, które wspomagają ekspansję komórek przed podziałem.

  • Dostarcza ono inhibitory proteaz, które zapobiegają proteolizie w komórkach.

  • Zawiera również minerały, takie jak Na+, K+, Zn2+ i Fe2+.

  • Zwiększa lepkość pożywki, chroniąc w ten sposób komórki przed uszkodzeniami mechanicznymi podczas mieszania hodowli w zawiesinie.

  • Pełni również funkcję bufora.

Bibliografia

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Odżywianie komórek zwierzęcych w hodowli tkankowej; wstępne badania nad pożywką syntetyczną. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Szybka adsorpcja składnika surowicy płodowej cielęcej przez komórki ssaków w hodowli. Potencjalne źródło artefaktów w badaniach surowic przeciwko antygenom specyficznym dla komórek. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Dodanie surowicy do pożywki stosowanej do przygotowania zawiesin komórkowych jako potencjalne źródło artefaktów w reakcjach komórkowych badanych za pomocą testu węzła chłonnego podkolanowego. J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Komercyjne pożywki bezsurowicowe: wzrost hybrydomów i produkcja przeciwciał monoklonalnych. J Immunol Methods. 1991;145:175-83

[5] Barnes D, Sato G. Metody hodowli komórek w pożywkach bezsurowicowych. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O i in. Białka opiekuńcze HSP70 transportują białko TDP-43 pozbawione RNA do anizotropowych, płynnych, sferycznych powłok wewnątrzjądrowych. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J i in. Starzenie się komórek wywołane zespołem Downa zaburza architekturę jądra komórkowego progenitorów neuronowych. Cell Stem Cell. 2022;29:116-130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Całkowite zastąpienie surowicy albuminą, transferyną i lipidami sojowymi w hodowlach limfocytów B reagujących na lipopolisacharydy. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Systematyczne udoskonalanie chemicznie zdefiniowanej, bezbiałkowej pożywki do hodowli hybrydomów i produkcji przeciwciał monoklonalnych. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] Darfler F. Pożywka bezbiałkowa do hodowli hybrydomów i innych komórek układu odpornościowego. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Barnes D, Sato G. Hodowla komórkowa bez surowicy: podejście ujednolicające. Cell. 1980;22:649-55

[12] Hamilton W, Ham R. Wzrost klonalny linii komórkowych chińskiego chomika w pożywkach bezbiałkowych. In Vitro. 1977;13:537-47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Analiza cytotoksycznego działania poddanego działaniu światła pożywki hodowlanej zawierającej HEPES. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Czerwień fenolowa w pożywkach do hodowli tkankowej jest słabym estrogenem: implikacje dla badań nad komórkami reagującymi na estrogen w hodowli. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] Karmiol S. Opracowanie pożywek bezsurowicowych. W: Master JRW, red. Animal Cell culture, wyd. 3. Oxford: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Stosowanie antybiotyków w pożywkach do hodowli komórkowej. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Rozprzestrzenianie się i zwalczanie zakażeń mykoplazmowych w hodowlach komórkowych. In Vitro. 1976;12:643-8

[18] Masters J, Stacey G. Wymiana pożywki i pasażowanie linii komórkowych. Nat Protoc. 2007;2:2276–84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M i in. Demetylaza histonowa KDM6A bezpośrednio wykrywa tlen, regulując chromatynę i los komórki. Science. 2019;363:1217-1222

[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M i in. Skuteczność preparatu Plasmocin™ w różnych liniach komórkowych ssaków zakażonych mollicutes w porównaniu z powszechnie stosowanymi antybiotykami w hodowli komórkowej: lokalne doświadczenia. Cytotechnology. 2011;63:609-20

[21] Kragh Hansen U. Molekularne aspekty wiązania ligandów z albuminą surowicy. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53