Langsung ke isi

Media & Reagen

40 produk

Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€310.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

DMEM:Ham's F12 (perbandingan 1:1), berat: 3,1 g/L glukosa, berat: 2,5 mM L-glutamin, berat: 15 mM HEPES, berat: 0,5 mM natrium piruvat, berat: 1,2 g/L NaHCO₃

DMEM:Ham's F12 merupakan media dasar yang diakui secara luas dan banyak digunakan dalam kultur sel untuk penelitian biologi. Media ini berfungsi sebagai sumber nutrisi utama bagi pertumbuhan berbagai lini sel mamalia, terutama bila ditambahkan dengan Serum Janin Sapi (FBS). Formulasi unik ini menggabungkan Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) dan Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) dalam perbandingan 1:1 yang tepat. Penambahan L-glutamin semakin meningkatkan komposisinya. DMEM, yang berasal dari Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), menawarkan konsentrasi asam amino dan vitamin yang lebih tinggi dibandingkan pendahulunya. Sebaliknya, Ham's F-12 didasarkan pada media Ham's F-10, yang menyediakan serangkaian komponen esensial yang saling melengkapi. Untuk mendukung pertumbuhan sel yang optimal, praktik umum yang dilakukan adalah menambahkan FBS ke dalam campuran DMEM:Ham's F-12 dengan konsentrasi umum sebesar 5–10%. Penambahan ini diperlukan karena media tersebut tidak mengandung hormon pertumbuhan, lipid, dan protein yang sangat penting bagi perkembangan sel. DMEM:Ham's F12 dilengkapi dengan sistem penyangga pH dan sering ditambahkan fenol merah, suatu indikator pH. Sel yang dikultur dalam DMEM:Ham's F12, atau media apa pun yang menggunakan sistem penyangga bikarbonat, memerlukan lingkungan CO₂ yang terkendali sebesar 5–10% untuk mempertahankan tingkat pH yang sesuai. Pengendalian Mutu • Disaring secara steril Penyimpanan dan Umur Simpan • Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C, terlindung dari cahaya. • Setelah dibuka, simpan pada 4°C dan gunakan dalam waktu 6–8 minggu. Kondisi Pengiriman • Suhu kamar Perawatan • Simpan dalam lemari pendingin pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan berulang hingga +37°C, karena hal ini dapat menurunkan kualitas produk. • Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti microwave. • Jika hanya sebagian media yang akan digunakan, ambil jumlah yang diperlukan dan panaskan hingga suhu kamar sebelum digunakan. Komposisi Kategori Komponen Konsentrasi (mg/L) Asam Amino Glisin 18,75 L-alanin 4,45 L-Arginine HCl 147,50 L-Asparagin H₂O 7,50 Asam L-Aspartat 6,65 L-Sistein HCl H₂O 17,56 L-Sistin 2 HCl 31,29 Asam L-Glutamat 7,35 L-Glutamin 365,00 L-Histidin HCl H₂O 31,48 L-Isoleusin 54,47 L-Leusin 59,05 L-Lisin HCl 91,25 L-Metionin 17,24 L-fenilalanin 35,48 L-prolin 17,25 L-Serin 26,25 L-treonin 53,45 L-Triptofan 9,02 L-Tirosin 2 Na 2 H₂O 55,79 L-Valin 52,85 Vitamin D-Biotin 0,0035 Klorida Kolin 8,98 D-Kalsium Pantotenat 2,24 Asam folat 2,66 myo-inositol 12,60 Nikotinamida 2,02 Pyridoxine HCl 0,031 Piridoksal HCl 2,00 Riboflavin 0,219 Tiamin HCl 2,17 Vitamin B12 0,68 Garam Anorganik CaCl₂·2 H₂O 154,50 CuSO₄·5H₂O 0,0013 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,05 FeSO₄·7H₂O 0,417 KCl 311,80 MgCl₂ 6 H₂O 61,20 MgSO₄ 7 H₂O 100,00 NaCl 6996,00 NaHCO₃ 1200,00 Na₂HPO₄ 71,02 NaH₂PO₄·2H₂O 70,87 ZnSO₄ 7 H₂O 0,432 Komponen Lain D-Glukosa 3151,00 Hipoksantin 2,40 HEPES 3574,50 Asam Linoleat 0,042 Asam lipoat 0,105 Garam Natrium Fenol Merah 8,63 Putresin 2 HCl 0,081 Natrium Piruvat 55,00 Timidin 0,365

€25.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

DMEM, berat: 4,5 g/L glukosa, berat: 4 mM L-glutamin, berat: 3,7 g/L NaHCO₃, berat: 1,0 mM natrium piruvat

DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) adalah media dasar yang sangat serbaguna dan banyak digunakan, yang dirancang untuk mendukung pertumbuhan berbagai jenis sel mamalia dalam penelitian biologi. Media ini berfungsi sebagai media yang ideal untuk kultur fibroblas primer, neuron, sel glial, HUVEC, sel otot polos, serta garis sel populer seperti HeLa, 293, Cos-7, dan PC-12. Yang membedakan DMEM dari media lain adalah komposisinya yang unik. DMEM mengandung konsentrasi asam amino dan vitamin yang empat kali lipat lebih tinggi dibandingkan dengan Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM) asli. Awalnya dikembangkan dengan kadar glukosa rendah (1 g/L) dan natrium piruvat, DMEM sering digunakan dengan kadar glukosa yang lebih tinggi, baik dengan maupun tanpa natrium piruvat. Perlu dicatat bahwa DMEM tidak mengandung protein, lipid, atau faktor pertumbuhan, sehingga memerlukan penambahan suplemen. Untuk mencapai pertumbuhan yang optimal, pendekatan yang umum dilakukan adalah dengan menambahkan 10% Fetal Bovine Serum (FBS) ke dalam DMEM. Selain itu, DMEM menggunakan sistem penyangga natrium bikarbonat, yang memerlukan lingkungan dengan konsentrasi CO₂ 5–10% untuk mempertahankan pH fisiologis. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) sangat dihargai di antara media terdefinisi untuk kultur sel dan jaringan, memenuhi kebutuhan pertumbuhan berbagai fenotipe sel yang melekat. Media ini melampaui Eagle's Medium asli, yang dikembangkan pada tahun 1950-an untuk membudidayakan sel ayam, melalui formulasi tambahan yang disempurnakan yang dikenal sebagai modifikasi Dulbecco. Modifikasi ini secara signifikan meningkatkan kandungan asam amino dan vitamin tertentu hingga empat kali lipat dibandingkan dengan media aslinya. Dalam bidang kultur sel, DMEM memainkan peran penting sebagai media pertumbuhan untuk berbagai jenis sel, termasuk sel primer, sel punca, dan sel yang telah mengalami transformasi. Para peneliti juga menggunakan versi modifikasi DMEM untuk berbagai aplikasi penelitian, seperti penemuan obat, rekayasa jaringan, dan studi jalur pensinyalan sel. Pengendalian Mutu • Disaring secara steril Penyimpanan dan Umur Simpan • Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C, terlindung dari cahaya. • Setelah dibuka, simpan pada suhu 4°C dan gunakan dalam waktu 6–8 minggu. Kondisi Pengiriman • Suhu kamar Perawatan • Simpan dalam lemari pendingin pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan berulang hingga +37°C, karena hal ini dapat menurunkan kualitas produk. • Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti microwave. • Jika hanya sebagian media yang akan digunakan, ambil jumlah yang diperlukan dan panaskan hingga suhu kamar sebelum digunakan. Komposisi Kategori Komponen Konsentrasi (mg/L) Asam Amino Glisin 30,00 L-Arginine HCl 84,00 L-Sistin 2 HCl 62,57 L-Glutamin 584,00 L-Histidin HCl H₂O 42,00 L-Isoleusin 105,00 L-Leusin 105,00 L-Lisin HCl 146,00 L-Metionin 30,00 L-fenilalanin 66,00 L-Serin 42,00 L-Treonin 95,00 L-Triptofan 16,00 L-Tirosin 2 Na 2H₂O 103,79 L-Valin 94,00 Vitamin Klorida kolin 4,00 D-Kalsium Pantotenat 4,00 Asam folat 4,00 myo-inositol 7,20 Nikotinamida 4,00 Pyridoxal HCl 4,00 Riboflavin 0,40 Tiamin HCl 4,00 Garam Anorganik CaCl₂·2 H₂O 265,00 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,10 KCl 400,00 MgSO₄·7H₂O 200,10 NaCl 6400,00 NaHCO₃ 3700,00 NaH₂PO₄·2H₂O 141,73 Komponen Lain D-Glukosa 4500,00 Garam Natrium Fenol Merah 15,90 Natrium Piruvat 110,00

€25.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

EMEM (MEM Eagle), mengandung: 2 mM L-glutamin, mengandung: 2,2 g/L NaHCO₃, mengandung: EBSS

Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) merupakan salah satu media dasar yang paling banyak digunakan untuk kultur berbagai jenis sel mamalia, terutama garis sel yang melekat. Awalnya dikembangkan oleh Harry Eagle, formulasi klasik ini mengandung asam amino esensial, vitamin, dan garam anorganik yang diperlukan untuk mendukung pertumbuhan sel primer maupun garis sel yang telah terbentuk dalam kondisi kultur standar. Formulasi cair yang siap pakai dan telah disaring secara steril ini dilengkapi dengan Larutan Garam Seimbang Earle (EBSS), 2 mM L-glutamin, D-glukosa (1,0 g/L), dan 2,2 g/L natrium bikarbonat (NaHCO₃), sehingga cocok untuk digunakan dalam atmosfer inkubator yang dikendalikan CO₂ (biasanya 5% CO₂). Fenol merah yang disertakan berfungsi sebagai indikator pH, sehingga memudahkan pemantauan visual kondisi media selama kultur sel. Fitur Utama • Formulasi Eagle’s MEM klasik dengan Larutan Garam Seimbang Earle (EBSS) • Termasuk 2 mM L-glutamin – siap digunakan segera • 2,2 g/L natrium bikarbonat – dibuffer untuk inkubasi 5 % CO₂ • Dengan D-glukosa (1,0 g/L) sebagai sumber karbon utama • Dengan fenol merah sebagai indikator pH • Tanpa HEPES dan tanpa natrium piruvat • Media cair yang telah disaring secara steril, siap digunakan • pH 7,0 – 7,6 Aplikasi Umum EMEM mendukung kultur berbagai macam garis sel mamalia, termasuk HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21, dan banyak sel primer. Aplikasi umum meliputi: • Pemeliharaan rutin dan ekspansi garis sel yang melekat • Alur kerja perbanyakan virus dan produksi vaksin • Aplikasi sitotoksisitas dan bioassay • Studi transfeksi dan ekspresi protein • Penelitian dasar dalam biologi sel dan biologi molekuler Untuk pertumbuhan sel yang optimal, EMEM biasanya ditambahkan dengan 5–10 % serum janin sapi (FBS) dan, tergantung pada garis selnya, dengan asam amino non-esensial (NEAA) serta antibiotik seperti penisilin/streptomisin. Penanganan & Penyimpanan Simpan botol yang belum dibuka pada suhu +2 °C hingga +8 °C, terlindung dari cahaya. Setelah dibuka, gunakan dalam kondisi aseptik. L-Glutamin dalam larutan dapat mengalami degradasi secara bertahap – kami merekomendasikan penggunaan medium ini dalam waktu 4 minggu setelah dibuka untuk hasil terbaik, atau tambahkan L-glutamin segar sebelum digunakan jika disimpan dalam jangka waktu yang lebih lama. Biarkan medium menghangat hingga 37 °C sebelum ditambahkan ke sel. Kualitas Diproduksi sesuai standar kualitas yang ketat. Setiap batch diuji sterilitas, pH, osmolalitas, dan kadar endotoksin untuk memastikan kinerja yang konsisten dalam aplikasi kultur sel. Spesifikasi Produk Spesifikasi Detail Jenis produkMEM Kategori ProdukMedia kultur sel FormatCair SterilYa Ukuran500 ml L-GlutaminMengandung L-glutamin (2 mM) GlukosaMengandung glukosa (1,0 g/L) Natrium bikarbonatDengan NaHCO₃ (2,2 g/L) HEPESTanpa HEPES Natrium piruvatTanpa natrium piruvat Fenol merahDengan fenol merah Larutan garamLarutan Garam Seimbang Earle (EBSS) pH7,0 – 7,6 Kandungan endotoksinTidak ditentukan Penyimpanan+2 °C hingga +8 °C Formulasi (Komposisi per Liter)

€25.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Media Pembekuan CM-1 - 100 ml

Freeze Medium CM-1 dari Cytion adalah media kriopreservasi mutakhir yang dirancang untuk memastikan tingkat viabilitas dan fungsionalitas sel tertinggi setelah pencairan. Media serbaguna ini cocok untuk berbagai jenis sel, termasuk sel manusia dan hewan, sehingga menjadikannya alat yang sangat penting untuk beragam aplikasi penelitian. Diformulasikan dengan kombinasi zat pelindung kriogenik dan nutrisi esensial yang seimbang secara cermat, Freeze Medium CM-1 meminimalkan pembentukan kristal es dan stres seluler selama proses pembekuan, sehingga menjaga integritas sel. Fitur utama Freeze Medium CM-1 meliputi: • Kompatibilitas Luas: Efektif untuk berbagai jenis sel, termasuk sel primer, sel punca, dan garis sel yang telah terbentuk. • Viabilitas Tinggi: Dioptimalkan untuk memaksimalkan pemulihan dan viabilitas sel pasca-pencairan, memastikan hasil eksperimen yang andal. • Siap Pakai: Telah disiapkan dan disterilkan dengan praktis untuk penggunaan langsung, sehingga mengurangi waktu persiapan dan risiko kontaminasi. • Stabilitas yang Ditingkatkan: Mempertahankan kinerja yang konsisten di bawah kondisi kriopreservasi standar, memastikan hasil yang dapat direproduksi. • Umur Simpan yang Panjang: CM-1 adalah media kriopreservasi yang mengandung serum dan siap pakai yang dapat disimpan di lemari es hingga satu tahun. Menggunakan CM-1 untuk Membekukan Sel Untuk menggunakan CM-1 dalam pembekuan sel yang melekat maupun sel suspensi, ikuti langkah-langkah berikut: • Untuk sel yang melekat, cuci dan pisahkan sel-sel tersebut dari substrat kultur. Untuk sel suspensi, lanjutkan langsung ke langkah berikutnya. • Hitung sel untuk memastikan konsentrasinya tepat. • Sentrifugasi sel untuk memekatkan endapan, lalu resuspensi dalam media pembekuan CM-1. • Pindahkan sel yang telah dilarutkan kembali ke dalam tabung kriogenik. • Gunakan metode pembekuan lambat sebelum memindahkan sel ke penyimpanan jangka panjang. Metode Deskripsi Langkah-langkah ❄️ Pembekuan Manual Metode langkah demi langkah yang melibatkan penurunan suhu secara bertahap untuk memastikan kelangsungan hidup sel. 1️⃣ Tempatkan sel dalam media pembekuan di dalam freezer bersuhu 4°C selama 40 menit. 2️⃣ Pindahkan ke freezer bersuhu -80°C selama 24 jam. 3️⃣ Simpan sel dalam nitrogen cair untuk pelestarian jangka panjang. ❄️ Menggunakan Mr. Frosty Alat praktis yang memungkinkan laju pembekuan terkendali tanpa memerlukan daya listrik. 1️⃣ Siapkan sel dalam tabung kriogenik dengan media pembekuan. 2️⃣ Masukkan tabung kriogenik ke dalam wadah Mr. Frosty. 3️⃣ Simpan pada suhu -80°C selama 24 jam sebelum dipindahkan ke nitrogen cair. ❄️ Freezer dengan Kecepatan Terkendali Pembeku presisi tinggi dari Thermo Fisher atau produsen lain yang dirancang untuk penurunan suhu yang terkendali. 1️⃣ Atur perangkat untuk menurunkan suhu secara bertahap. 2️⃣ Masukkan sel yang telah disiapkan ke dalam freezer. 3️⃣ Setelah siklus pembekuan selesai, pindahkan sel ke nitrogen cair. • Simpan cryovial pada suhu di bawah -130°C atau dalam nitrogen cair untuk penyimpanan jangka panjang. Bahan • Mengandung FBS, DMSO, Glukosa, Garam • Kapasitas penyangga: pH = 7,2 hingga 7,6 Freeze Medium CM-1 dari Cytion menawarkan solusi yang andal untuk kriopreservasi, memastikan viabilitas dan fungsionalitas sel yang tinggi setelah pencairan untuk berbagai aplikasi penelitian.

€99.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Media Pembekuan CM-1 - 50 ml

Freeze Medium CM-1 dari Cytion adalah media kriopreservasi mutakhir yang dirancang untuk memastikan tingkat viabilitas dan fungsionalitas sel tertinggi setelah pencairan. Media serbaguna ini cocok untuk berbagai jenis sel, termasuk sel manusia dan hewan, sehingga menjadikannya alat yang sangat penting untuk beragam aplikasi penelitian. Diformulasikan dengan kombinasi zat pelindung kriogenik dan nutrisi esensial yang seimbang secara cermat, Freeze Medium CM-1 meminimalkan pembentukan kristal es dan stres seluler selama proses pembekuan, sehingga menjaga integritas sel. Fitur utama Freeze Medium CM-1 meliputi: • Kompatibilitas Luas: Efektif untuk berbagai jenis sel, termasuk sel primer, sel punca, dan garis sel yang telah terbentuk. • Viabilitas Tinggi: Dioptimalkan untuk memaksimalkan pemulihan dan viabilitas sel pasca-pencairan, memastikan hasil eksperimen yang andal. • Siap Pakai: Telah disiapkan dan disterilkan dengan praktis untuk penggunaan langsung, sehingga mengurangi waktu persiapan dan risiko kontaminasi. • Stabilitas yang Ditingkatkan: Mempertahankan kinerja yang konsisten di bawah kondisi kriopreservasi standar, memastikan hasil yang dapat direproduksi. • Umur Simpan yang Panjang: CM-1 adalah media kriopreservasi yang mengandung serum dan siap pakai yang dapat disimpan di lemari es hingga satu tahun. Menggunakan CM-1 untuk Membekukan Sel Untuk menggunakan CM-1 dalam pembekuan sel yang melekat maupun sel suspensi, ikuti langkah-langkah berikut: • Untuk sel yang melekat, cuci dan pisahkan sel-sel tersebut dari substrat kultur. Untuk sel suspensi, lanjutkan langsung ke langkah berikutnya. • Hitung sel untuk memastikan konsentrasinya tepat. • Sentrifugasi sel untuk memekatkan endapan, lalu resuspensi dalam media pembekuan CM-1. • Pindahkan sel yang telah dilarutkan kembali ke dalam tabung kriogenik. • Gunakan metode pembekuan lambat sebelum memindahkan sel ke penyimpanan jangka panjang. Metode Deskripsi Langkah-langkah ❄️ Pembekuan Manual Metode langkah demi langkah yang melibatkan penurunan suhu secara bertahap untuk memastikan kelangsungan hidup sel. 1️⃣ Tempatkan sel dalam media pembekuan di dalam freezer bersuhu 4°C selama 40 menit. 2️⃣ Pindahkan ke freezer bersuhu -80°C selama 24 jam. 3️⃣ Simpan sel dalam nitrogen cair untuk pelestarian jangka panjang. ❄️ Menggunakan Mr. Frosty Alat praktis yang memungkinkan laju pembekuan terkendali tanpa memerlukan daya listrik. 1️⃣ Siapkan sel dalam tabung kriogenik dengan media pembekuan. 2️⃣ Masukkan tabung kriogenik ke dalam wadah Mr. Frosty. 3️⃣ Simpan pada suhu -80°C selama 24 jam sebelum dipindahkan ke nitrogen cair. ❄️ Freezer dengan Kecepatan Terkendali Pembeku presisi tinggi dari Thermo Fisher atau produsen lain yang dirancang untuk penurunan suhu yang terkendali. 1️⃣ Atur perangkat untuk menurunkan suhu secara bertahap. 2️⃣ Masukkan sel yang telah disiapkan ke dalam freezer. 3️⃣ Setelah siklus pembekuan selesai, pindahkan sel ke nitrogen cair. • Simpan cryovial pada suhu di bawah -130°C atau dalam nitrogen cair untuk penyimpanan jangka panjang. Bahan • Mengandung FBS, DMSO, Glukosa, Garam • Kapasitas penyangga: pH = 7,2 hingga 7,6 Freeze Medium CM-1 dari Cytion menawarkan solusi yang andal untuk kriopreservasi, memastikan viabilitas dan fungsionalitas sel yang tinggi setelah pencairan untuk berbagai aplikasi penelitian.

€59.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Ham's F12K Medium, mengandung: 2,0 mM L-glutamin, mengandung: 2,0 mM natrium piruvat, mengandung: 2,5 g/L NaHCO₃

Memperkenalkan Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, sebuah modifikasi khusus dari Ham's F-12 Medium yang dirancang untuk memenuhi kebutuhan unik dalam penelitian biologi. Media canggih ini menawarkan keunggulan tersendiri, yang meningkatkan proses kultur hepatosit manusia primer, serta sel hati tikus dan ayam, terutama dalam kondisi serum yang dikurangi. Media Ham's F-12K (Kaighn's) diformulasikan secara cermat untuk mengoptimalkan kondisi kultur sel. Media ini memiliki komposisi yang diperkaya, menyediakan kadar yang lebih tinggi dari komponen esensial seperti asam amino dan natrium piruvat, serta unsur tambahan termasuk putresin, timidin, hipoksantin, dan seng. Penambahan ini memungkinkan peneliti untuk melengkapi media dengan serum minimal atau komponen terdefinisi untuk jenis sel tertentu, sehingga memudahkan penciptaan kondisi eksperimental yang presisi. Perlu dicatat bahwa Media Ham's F-12K (Kaighn's) tidak mengandung protein atau faktor pertumbuhan. Oleh karena itu, penambahan faktor pertumbuhan dan Serum Sapi Janin (FBS) seringkali diperlukan, sehingga memungkinkan para peneliti menyesuaikan media tersebut dengan kebutuhan garis sel spesifik mereka. Untuk kinerja optimal, konsentrasi FBS harus dioptimalkan dengan cermat untuk setiap garis sel, guna memastikan pertumbuhan dan fungsi yang optimal. Untuk menjaga pH fisiologis, Media Ham's F-12K (Kaighn's) menggunakan sistem penyangga natrium bikarbonat (2,5 g/L), sehingga memerlukan lingkungan CO₂ yang dikontrol pada kisaran 5–10% selama budidaya. Hal ini memastikan pH media tetap berada dalam rentang ideal untuk pertumbuhan dan viabilitas sel. Pengendalian kualitas • pH = 7,2 ± 0,02 pada suhu 20–25°C. • Setiap lot telah diuji sterilitasnya serta bebas dari mikoplasma dan bakteri. Perawatan • Simpan dalam lemari pendingin pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Pembekuan maupun pemanasan hingga +37°C akan mengurangi kualitas produk. • Jangan memanaskan media hingga melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali (misalnya, alat microwave). • Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah tersebut dari botol dan hangatkan pada suhu kamar. • Umur simpan untuk semua media kecuali media dasar adalah 8 minggu sejak tanggal produksi. Komposisi Komponen mg/L Garam Anorganik Kalsium klorida x 2H₂O 135,24 Tembaga(II) sulfat x 5H₂O 0,00 Besi (II) sulfat x 7H₂O 0,83 Klorida magnesium x 6H₂O 105,72 Magnesium sulfat x 7H₂O 394,49 Kalium klorida 283,29 Kalium dihidrogen fosfat 58,52 Natrium klorida 7597,20 di-natrium hidrogen fosfat anhidrat 115,02 Seng sulfat x 7H₂O 0,14 Komponen Lain D(+)-Glukosa anhidrat 1260,00 Hipoksantin 4,08 Asam DL-α-lipoat 0,21 Merah fenol 3,00 Putresin x 2HCl 0,32 Natrium piruvat 220,00 NaHCO₃ 2500,00 Timidin 0,73 Asam Amino L-alanin 17,82 L-Arginine x HCl 421,40 L-Asparagin x H₂O 30,02 Asam L-aspartat 26,62 L-Sistein × HCl × H₂O 70,24 L-Glutamin 292,20 Asam L-glutamat 29,42 Glisin 15,01 L-histidin x HCl x H₂O 41,92 L-Isoleusin 7,87 L-Leusin 26,24 L-Lisin x HCl 73,04 L-Metionin 8,95 L-fenilalanin 9,91 L-prolin 69,06 L-Serin 21,02 L-Treonin 23,82 L-Triptofan 4,08 L-Tirosin 10,87 L-Valin 23,42 Vitamin D(+)-Biotin 0,07 D-Kalsium pantotenat 0,48 Klorida kolin 13,96 Asam folat 1,32 myo-inositol 18,02 Nikotinamida 0,04 Piridoksin x HCl 0,06 Riboflavin 0,04 Tiamin x HCl 0,34 Vitamin B12 1,36

€108.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Ham's F12 Medium, mengandung: 1,0 mM glutamin stabil, mengandung: 1,0 mM natrium piruvat, mengandung: 1,176 g/L NaHCO₃

Ham's F-12 Medium, yang juga dikenal sebagai Ham's F-12 Nutrient Mix, adalah media dasar yang banyak digunakan dan dirancang khusus untuk kultur sel. Media ini telah digunakan secara luas untuk penanaman sel tunggal tanpa serum pada sel ovarium hamster Cina (CHO), sel paru-paru, dan sel L tikus. Selain itu, Ham’s F-12 merupakan media pilihan untuk Uji Toksisitas Klonal (CTA). Salah satu keunggulannya yang menonjol adalah kemampuannya mendukung pertumbuhan sel tanpa perlu penambahan serum. Hal ini menghilangkan potensi gangguan yang disebabkan oleh komponen serum, sehingga memastikan hasil eksperimen yang konsisten dan andal. Dengan menyediakan lingkungan kultur bebas serum, Ham's F-12 Medium memberikan para peneliti kontrol yang lebih besar atas penelitian mereka. Fitur utama lainnya dari Media Ham’s F-12 adalah kesesuaiannya untuk penanaman sel tunggal. Hal ini menjadikannya pilihan yang sangat baik untuk berbagai lini sel, termasuk sel CHO, sel paru-paru, dan sel L tikus. Komposisi nutrisi medium yang dioptimalkan memfasilitasi pelekatan dan pertumbuhan sel individu secara efisien, sehingga memungkinkan pembentukan kultur sel yang homogen dengan reproduktifitas yang lebih baik. Selain itu, Ham's F-12 Medium telah diakui sebagai media pilihan untuk Uji Toksisitas Klonal (CTA). Uji ini memainkan peran penting dalam menilai efek sitotoksik suatu zat terhadap sel. Dengan memanfaatkan Ham's F-12 Medium dalam CTA, para peneliti dapat secara akurat mengevaluasi dampak berbagai senyawa atau perlakuan terhadap sel individu, sehingga memberikan wawasan berharga mengenai profil toksikologis. Kontrol kualitas • pH = 7,2 ± 0,02 pada suhu 20–25°C. • Setiap lot telah diuji sterilitasnya serta bebas dari mikoplasma dan bakteri. Penyimpanan • Simpan dalam lemari pendingin pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Pembekuan dan pemanasan hingga +37°C akan mengurangi kualitas produk. • Jangan memanaskan media hingga melebihi 37° C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali (misalnya, microwave). • Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah tersebut dari botol dan hangatkan pada suhu kamar. • Umur simpan untuk semua media kecuali media dasar adalah 8 minggu sejak tanggal produksi. Komposisi Komponen mg/L Garam Anorganik Kalsium klorida x 2H₂O 44,00 Tembaga(II) sulfat x 5H₂O 0,00 Sulfat besi (II) x 7H₂O 0,83 Klorida magnesium x 6H₂O 122,00 Kalium klorida 223,65 Natrium klorida 7599,00 di-natrium hidrogen fosfat anhidrat 142,04 Seng sulfat x 7H₂O 0,86 Komponen Lain D(+)-Glukosa anhidrat 1801,60 Hipoksantin 4,08 Asam linoleat 0,08 Asam DL-α-lipoat 0,21 Merah fenol 1,20 Putresin x 2HCl 0,16 Natrium piruvat 110,00 Timidin 0,73 NaHCO₃ 1176,00 Asam Amino L-Alanin 8,91 L-Arginine x HCl 210,70 L-Asparagin x H₂O 15,01 Asam L-aspartat 13,31 L-Sistein x HCl x H₂O 35,12 L-Alanyl-L-Glutamin 217,30 Asam L-glutamat 14,71 Glisin 7,51 L-histidin x HCl x H₂O 20,96 L-Isoleusin 3,94 L-Leusin 13,12 L-Lisin x HCl 36,54 L-Metionin 4,48 L-fenilalanin 4,96 L-prolin 34,53 L-Serin 10,51 L-treonin 11,91 L-Triptofan 2,04 L-Tirosin 5,44 L-Valin 11,71 Vitamin D(+)-Biotin 0,01 D-Kalsium pantotenat 0,24 Klorida kolin 13,96 Asam folat 1,32 myo-inositol 18,02 Nikotinamida 0,04 Piridoksin x HCl 0,06 Riboflavin 0,04 Tiamin x HCl 0,34 Vitamin B12 1,36

€25.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

HEPES Buffer Solution (1M)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered HEPES Buffer Solution (1 M), also known as N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid, is a zwitterionic organic buffering agent widely used in cell culture media. It is designed to maintain stable pH conditions in the physiological range of 6.7 to 8.6, supporting optimal cellular function during in vitro applications. Application and Benefits HEPES provides reliable buffering capacity in cell culture systems, particularly when cells are handled outside a CO₂ incubator. The addition of 10–25 mM HEPES to culture media offers enhanced pH stability during extended manipulation periods, helping to maintain consistent experimental conditions. This buffer is membrane-impermeable, has minimal interference with biochemical reactions, and demonstrates strong chemical and enzymatic stability. These properties make it suitable for a wide range of cell culture and biochemical applications. Formulation and Usage The solution is supplied as a 1 M concentrate prepared in cell culture–grade water and is sterile-filtered for use in contamination-sensitive environments. It can be diluted to the desired working concentration depending on application requirements. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to preserve product integrity. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Media kultur sel: Gambaran umum

Dalam bidang ilmu hayati, salah satu metodologi terpenting adalah kultur sel. Pengambilan sel, jaringan, atau organ dari hewan atau tumbuhan, serta penanaman sel, jaringan, atau organ tersebut dalam lingkungan buatan yang mendukung kelangsungan hidup dan/atau pertumbuhannya, itulah yang dimaksud dengan istilah "kultur sel." Kebutuhan lingkungan mendasar untuk perkembangan sel yang optimal adalah suhu yang terkendali, substrat untuk pelekatan sel, media pertumbuhan yang memadai, dan inkubator yang menjaga pH dan osmolalitas optimal. Sel harus memiliki kondisi-kondisi ini agar dapat tumbuh secara maksimal.

Pemilihan media pertumbuhan yang memadai untuk budidaya in vitro merupakan tahap dalam kultur sel yang paling kritis sekaligus paling vital. Media pertumbuhan, yang juga dikenal sebagai media kultur, adalah cairan atau gel yang diformulasikan untuk mendorong perkembangan organisme pada skala mikroskopis, seluler, atau tumbuhan. Media yang digunakan untuk membudidayakan sel sering kali mengandung pasokan energi yang memadai serta zat-zat yang mengatur siklus sel. Komponen utama media kultur meliputi asam amino, vitamin, garam anorganik, glukosa, dan serum. Serum ditambahkan ke dalam media karena berfungsi sebagai sumber faktor pertumbuhan, hormon, dan faktor perlekatan. Selain menyediakan nutrisi, media juga berperan dalam menjaga tingkat pH dan osmolalitas.

Jenis-jenis media yang digunakan dalam kultur sel

Baik sel manusia maupun sel hewan berpotensi ditumbuhkan baik dalam media buatan atau sintetis maupun media yang sepenuhnya alami yang dilengkapi dengan unsur-unsur alami. Berikut ini, kami akan memberikan gambaran umum mengenai berbagai jenis media yang saat ini tersedia.

Media alami

Hanya cairan biologis yang ada dalam keadaan alami yang dapat ditemukan dalam media alami. Media alami sangat bermanfaat dan mudah digunakan untuk membiakkan berbagai jenis sel hewan. Kurangnya pemahaman tentang komponen tepat yang menyusun media alami merupakan faktor utama yang menyebabkan rendahnya tingkat pengulangan hasil yang diperoleh dengan menggunakan media alami.

Media buatan

Persiapan media buatan atau sintetis melibatkan penambahan nutrisi (baik organik maupun anorganik), protein serum, karbohidrat, kofaktor, vitamin, dan garam, serta fase gas O₂ dan CO₂ [1].

Berbagai jenis media buatan telah dikembangkan untuk memenuhi satu atau lebih fungsi berikut: 1) Kelangsungan hidup segera (larutan garam seimbang dengan pH dan tekanan osmotik yang tepat). 2) Kelangsungan hidup jangka panjang (larutan garam seimbang yang ditambah dengan berbagai formulasi bahan kimia organik dan/atau serum). 3) Perkembangan tanpa batas waktu. 4) Fungsi khusus.

Ada empat klasifikasi berbeda untuk media buatan:

Media yang mengandung serum

Jenis suplemen yang paling sering ditemukan dalam media yang digunakan untuk menumbuhkan sel hewan adalah serum janin sapi. Serum ini ditambahkan ke media kultur sebagai suplemen berbiaya rendah guna mencapai kondisi pertumbuhan terbaik. Selain bertindak sebagai pengangkut atau pengkelat untuk nutrisi yang tidak stabil atau tidak larut dalam air, hormon dan faktor pertumbuhan, penghambat protease, serta zat lainnya, serum juga mengikat dan menetralkan molekul berbahaya.

Media Bebas Serum

Kehadiran serum dalam media memiliki sejumlah kelemahan dan berpotensi menyebabkan kesalahan interpretasi yang signifikan dalam penelitian imunologi [2, 3]. Berbagai jenis media bebas serum telah dikembangkan [4, 5]. Media-media ini umumnya diformulasikan secara khusus untuk mendukung kultur satu jenis sel, seperti Knockout Serum Replacement dan Knockout DMEM dari Thermo Fisher Scientific, serta media mTESR dari Stem Cell Technologies [6], untuk sel punca [7].

Selain itu, media ini mengandung jumlah yang telah ditentukan dari faktor pertumbuhan yang dimurnikan, lipoprotein, dan protein lainnya, yang biasanya disediakan oleh serum [8]. Media ini sering disebut sebagai "media kultur terdefinisi" karena komponen yang menyusunnya telah dipahami dengan baik.

Media yang didefinisikan secara kimiawi

Media ini mengandung komponen anorganik dan organik ultra-murni yang tidak terkontaminasi oleh zat apa pun. Media ini juga dapat mengandung tambahan protein murni, seperti faktor pertumbuhan.

 Modifikasi genetik bakteri atau ragi, bersama dengan penambahan asam lemak, vitamin, kolesterol, dan asam amino tertentu, menghasilkan komponen-komponennya [9].

Media bebas protein

Media bebas protein adalah media yang sama sekali tidak mengandung protein dan hanya mengandung unsur-unsur non-protein. Dibandingkan dengan media yang ditambahkan serum, penggunaan media tanpa penambahan protein mendorong proliferasi sel dan ekspresi protein yang lebih baik serta memudahkan pemurnian produk apa pun yang dihasilkan dalam proses hilir [10-12]. Protein tidak termasuk dalam formulasi seperti MEM dan RPMI-1640. Namun, suplemen protein dapat diberikan jika diperlukan.

Media kultur dan komponen dasarnya

Media kultur komersial dapat dibeli dalam bentuk bubuk atau cairan dan sering kali mengandung berbagai nutrisi seperti asam amino, glukosa, garam, vitamin, dan suplemen makanan lainnya. 

Kebutuhan akan komponen-komponen ini berbeda untuk setiap lini sel, dan variasi inilah yang menyebabkan banyaknya formulasi media yang berbeda. Setiap komponen memiliki fungsi tertentu, yang akan dijelaskan dalam paragraf berikut:

Sistem penyangga

Untuk menjaga kondisi pertumbuhan yang optimal, pH harus dikontrol, yang sering dilakukan dengan salah satu dari dua sistem penyangga berikut:

Sistem penyangga alami

Rasio CO₂/H₂CO₃ di atmosfer sama dengan yang ada di media, sehingga menciptakan mekanisme penyangga alami. Untuk mempertahankan mekanisme penyangga alami ini, kultur harus disimpan dalam lingkungan udara dengan kadar CO₂ 5–10%, yang sering dicapai dengan menggunakan inkubator CO₂. Salah satu keunggulan menggunakan penyangga alami adalah harganya yang murah dan aman.

HEPES

Penyangga kimiawi yang menggunakan zwitterion HEPES memiliki kemampuan penyangga yang lebih besar pada kisaran pH 7,2–7,4 dan tidak memerlukan lingkungan gas yang diatur. Untuk jenis sel tertentu, dosis HEPES yang lebih tinggi dapat berbahaya. Media yang mengandung HEPES juga jauh lebih rentan terhadap efek fototoksik dari cahaya fluoresen [13].

Phenol Red

Indikator pH fenol merah sering ditambahkan ke dalam media kultur yang tersedia secara komersial, sehingga memungkinkan pemantauan pH secara terus-menerus. Seiring pertumbuhan sel, metabolit yang dihasilkan oleh sel-sel ini menyebabkan pergeseran pH dan akibatnya perubahan warna media. Phenol Red memiliki efek ganda terhadap warna media, yaitu berubah menjadi kuning pada pH asam dan ungu pada pH basa. pH 7,4, nilai optimal untuk kultur sel, menyebabkan media tampak berwarna merah fluoresen.

Namun, fenol merah memiliki beberapa kelemahan: Pertama, fenol merah mampu meniru fungsi sejumlah hormon steroid, terutama estrogen [14]. Oleh karena itu, saat mempelajari sel yang sensitif terhadap estrogen seperti jaringan payudara, disarankan menggunakan media yang bebas dari fenol merah. Keseimbangan natrium-kalium terganggu oleh adanya fenol merah dalam beberapa formulasi bebas serum. Menambahkan serum atau hormon hipofisis sapi ke dalam media dapat menetralkan efek ini [15]. Ketiga, deteksi dalam eksperimen sitometri aliran terhambat oleh adanya fenol merah.

Garam anorganik

Media yang mengandung garam anorganik, seperti ion natrium, kalium, dan kalsium, membantu menjaga keseimbangan osmotik dan mengatur potensial membran.

Asam amino

Karena asam amino merupakan komponen dasar protein, maka asam amino merupakan komponen esensial dari setiap media pertumbuhan sel yang pernah diciptakan. Karena sel tidak mampu memproduksi asam amino tertentu secara mandiri, penting bagi media kultur untuk mengandung asam amino esensial. Asam amino diperlukan untuk proliferasi sel, dan konsentrasinya menentukan kepadatan sel maksimum yang dapat dicapai. Secara khusus, L-glutamin, sebuah asam amino esensial, sangatlah penting.

L-glutamin berfungsi sebagai sumber energi sekunder untuk metabolisme dan menyumbangkan nitrogen untuk produksi NAD, NADPH, dan nukleotida. Karena L-glutamin merupakan asam amino yang tidak stabil dan seiring waktu berubah menjadi bentuk yang tidak dapat dimanfaatkan oleh sel, maka L-glutamin harus ditambahkan ke dalam media.

Selain itu, asam amino non-esensial dapat ditambahkan ke dalam media untuk mengisi kembali asam amino yang telah habis selama proses pertumbuhan. Pertumbuhan sel akan meningkat dan viabilitasnya akan bertambah jika media pertumbuhan ditambah dengan asam amino non-esensial.

Karbohidrat

Karbohidrat dalam bentuk gula merupakan sumber energi utama. Banyak media juga mengandung maltosa dan fruktosa selain gula yang lebih umum seperti glukosa dan galaktosa.

Protein dan peptida

Albumin, transferrin, dan fibronektin adalah protein dan peptida yang paling umum digunakan. Ketiganya sangat penting terutama dalam media yang tidak mengandung serum. Albumin, transferrin, aprotinin, fetuin, dan fibronektin adalah beberapa protein yang dapat ditemukan dalam serum, yang merupakan sumber protein yang kaya.

Albumin adalah protein utama yang terdapat dalam darah, dan fungsinya adalah mengikat serta mengangkut berbagai zat, termasuk air, garam, asam lemak bebas, hormon, dan vitamin, antar organ dan sel. Kemampuan albumin untuk mengikat zat kimia menjadikannya kandidat yang efektif untuk menghilangkan senyawa berbahaya dari media tempat sel-sel dikultur.

Aprotinin merupakan agen pelindung dalam sistem kultur sel, karena stabil pada pH netral dan asam, serta tahan terhadap suhu tinggi dan kerusakan yang mungkin disebabkan oleh enzim proteolitik. Aprotinin mampu menghambat sejumlah protease serin, termasuk tripsin, di antara enzim lainnya.

Fetuin adalah glikoprotein yang dapat terdeteksi dalam jumlah lebih tinggi pada serum hewan janin dan bayi baru lahir dibandingkan dengan serum hewan dewasa. Selain itu, fetuin juga bertindak sebagai penghambat protease serin. Protein fibronektin merupakan komponen esensial dalam proses adhesi sel. Transferrin adalah protein yang mengangkut zat besi dan bertanggung jawab untuk mengantarkan zat besi ke membran sel.

Asam lemak dan lipid

Keduanya memainkan peran penting dalam media bebas serum ketika serum tidak ada.

Vitamin

Banyak vitamin diperlukan untuk perkembangan dan proliferasi sel. Vitamin tidak dapat diproduksi dalam jumlah yang cukup oleh sel dan oleh karena itu sangat penting dalam kultur jaringan sebagai suplemen makanan.

Dalam kultur sel, serum merupakan sumber utama vitamin; namun, media juga diperkaya dengan berbagai vitamin agar sesuai untuk jenis sel tertentu. Umumnya, vitamin kelompok B digunakan untuk merangsang pertumbuhan.

Unsur jejak

Unsur-unsur kimia seperti tembaga, seng, selenium, dan zat antara asam trikarboksilat dikenal sebagai unsur jejak. Unsur jejak sering ditambahkan ke media yang tidak mengandung serum untuk menggantikan unsur-unsur yang biasanya terdapat dalam serum. Unsur-unsur ini merupakan komponen kimia penting yang diperlukan untuk perkembangan sel yang sehat. Banyak reaksi biokimia bergantung pada mikronutrien tertentu, seperti aktivitas enzim.

Suplemen media

Media pertumbuhan lengkap yang disarankan untuk garis sel tertentu memerlukan komponen tambahan yang tidak terdapat dalam media dasar dan serum. Suplemen ini mendukung pertumbuhan sel dan fungsi metabolik yang tepat.

Meskipun hormon, faktor pertumbuhan, dan molekul pensinyalan sangat penting untuk proliferasi yang tepat dari lini sel tertentu, tindakan pencegahan berikut harus selalu dilakukan: Karena penambahan suplemen dapat mengubah osmolalitas media pertumbuhan lengkap, yang dapat menghambat perkembangan sel, disarankan untuk selalu memverifikasi osmolalitas setelah menambahkan suplemen. Untuk sebagian besar lini sel, osmolalitas optimal berkisar antara 260 dan 320 mOSM/kg.

Antibiotik

Antibiotik sering digunakan untuk menghambat pertumbuhan kontaminan bakteri dan jamur [16], meskipun antibiotik tersebut tidak esensial bagi pertumbuhan sel. Karena antibiotik dapat menyembunyikan kontaminasi oleh mikoplasma dan bakteri resisten, penggunaan rutin antibiotik tidak disarankan dalam kultur sel [17, 18].

Selain itu, antibiotik dapat mengganggu metabolisme sel yang hipersensitif. Kombinasi penisilin-streptomisin yang diproduksi oleh MilliporeSigma dan Life Technologies sering digunakan. Plasmocin telah digunakan dalam kultur garis sel glioma TS603, TS516, dan BT260 [19], dan terbukti efektif dalam menghilangkan kontaminasi mikoplasma (20).

Serum

Albumin, faktor pertumbuhan, dan penghambat pertumbuhan semuanya terdapat dalam serum. Serum merupakan salah satu komponen terpenting dalam medium kultur sel karena menyediakan asam amino, protein, vitamin (terutama vitamin larut lemak seperti A, D, E, dan K), karbohidrat, lipid, hormon, faktor pertumbuhan, mineral, dan unsur jejak.

Serum dari sumber janin sapi dan anak sapi sering digunakan untuk mendorong perkembangan sel yang dikultur. Serum janin merupakan sumber faktor pertumbuhan yang melimpah dan cocok untuk kloning sel serta pengembangan sel yang sensitif. Karena kemampuannya dalam mendorong pertumbuhan yang lebih rendah, serum anak sapi digunakan dalam eksperimen penghambatan kontak. Media pertumbuhan normal biasanya mengandung 2% hingga 10% serum. Penambahan serum ke dalam media kultur memiliki tujuan sebagai berikut [21]:

  • Serum menyediakan nutrisi esensial bagi sel (baik dalam bentuk larutan maupun terikat pada protein).

  • Beberapa faktor pertumbuhan dan hormon yang berperan dalam mendorong pertumbuhan dan aktivitas sel khusus terdapat dalam serum.

  • Serum menyediakan banyak protein pengikat, seperti albumin dan transferrin, yang mengangkut zat kimia lain ke dalam sel. Misalnya, albumin mengantarkan lemak, vitamin, hormon, dll. ke dalam sel.

  • Serum juga menyediakan protein, seperti fibronektin, yang meningkatkan adhesi sel ke substrat. Selain itu, serum menghasilkan unsur-unsur penyebaran yang membantu ekspansi sel sebelum pembelahan.

  • Serum mengantarkan penghambat protease yang mencegah proteolisis dalam sel.

  • Serum juga mengandung mineral seperti Na+, K+, Zn2+, dan Fe2+.

  • Media ini meningkatkan viskositas, sehingga melindungi sel dari cedera mekanis selama pengadukan kultur suspensi.

  • Albumin juga berfungsi sebagai penyangga.

Referensi

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Nutrisi sel hewan dalam kultur jaringan; studi awal mengenai media sintetis. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Adsorpsi cepat komponen serum janin sapi oleh sel mamalia dalam kultur. Sumber potensial artefak dalam studi antiserum terhadap antigen spesifik sel. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Penambahan serum ke dalam medium yang digunakan untuk persiapan suspensi sel sebagai sumber potensial artefak dalam reaksi yang dimediasi sel yang diteliti melalui uji kelenjar getah bening popliteal. J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Media bebas serum komersial: pertumbuhan hibridoma dan produksi antibodi monoklonal. J Immunol Methods. 1991;145:175-83

[5] Barnes D, Sato G. Metode pertumbuhan sel kultur dalam media bebas serum. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O, dkk. HSP70 mengarahkan TDP-43 bebas RNA ke dalam cangkang cair intranuklear berbentuk bola yang anisotropik. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, dkk. Penuaan yang dipicu oleh sindrom Down mengganggu arsitektur nukleus sel progenitor saraf. Cell Stem Cell. 2022;29:116-130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Penggantian total serum dengan albumin, transferrin, dan lipid kedelai dalam kultur limfosit B yang reaktif terhadap lipopolisakarida. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Peningkatan sistematis terhadap media bebas protein yang didefinisikan secara kimiawi untuk pertumbuhan hibridoma dan produksi antibodi monoklonal. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] Darfler F. Media bebas protein untuk pertumbuhan hibridoma dan sel-sel sistem kekebalan lainnya. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Barnes D, Sato G. Kultur sel bebas serum: suatu pendekatan terpadu. Cell. 1980;22:649-55

[12] Hamilton W, Ham R. Pertumbuhan klonal garis sel hamster Cina dalam media bebas protein. In Vitro. 1977;13:537-47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Analisis efek sitotoksik media kultur yang mengandung HEPES dan terpapar cahaya. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Fenol merah dalam media kultur jaringan merupakan estrogen lemah: implikasi terkait studi sel yang responsif terhadap estrogen dalam kultur. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] Karmiol S. Pengembangan media bebas serum. Dalam: Master JRW, editor. Kultur Sel Hewan, edisi ke-3. Oxford: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Penggunaan antibiotik dalam media kultur sel. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Penyebaran dan pengendalian infeksi mikoplasma pada kultur sel. In Vitro. 1976;12:643-8

[18] Masters J, Stacey G. Mengganti media dan melakukan passaging pada garis sel. Nat Protoc. 2007;2:2276-84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M, dkk. Demetilase histon KDM6A secara langsung mendeteksi oksigen untuk mengendalikan kromatin dan nasib sel. Science. 2019;363:1217-1222

[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M, dkk. Efektivitas Plasmocin™ pada berbagai garis sel mamalia yang terinfeksi mollicutes dibandingkan dengan antibiotik yang umum digunakan dalam kultur sel: pengalaman lokal. Cytotechnology. 2011;63:609-20

[21] Kragh Hansen U. Aspek molekuler pengikatan ligan pada albumin serum. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53