Langsung ke isi

Media & Reagen

40 produk

Insulin, Human recombinant, Solution (5 mg/ml)

Volume: 5 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin Human Recombinant Solution is a chemically defined supplement commonly used for the cultivation of mammalian cell lines, including Chinese Hamster Ovary (CHO) cells. This cell culture–grade solution contains recombinant human insulin expressed in Saccharomyces cerevisiae, ensuring high purity and consistent performance in research applications. Application and Benefits Insulin is routinely added to serum-free and chemically defined media to promote cell growth and productivity. As a key regulatory hormone, insulin supports cellular uptake, utilization, and storage of glucose, amino acids, and fatty acids. It also inhibits the breakdown of glycogen, proteins, and lipids, thereby contributing to improved cell viability and metabolic stability in culture systems. The chemically defined formulation supports reproducibility and minimizes variability in sensitive cell culture workflows. Biological Properties and Usage Insulin is a two-chain polypeptide hormone naturally produced by the β-cells of the pancreatic islets. It has a molecular weight of approximately 5,800 Da. The α- and β-chains are linked by two interchain disulfide bonds, and the α-chain contains one intrachain disulfide bond. For cell culture applications, the solution should be handled under aseptic conditions and stored at +2°C to +8°C to maintain stability and performance. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€109.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Insulin-Transferrin-Selenium (ITS), Solution 100x

Volume: 10 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) Solution (100x) is a chemically defined supplement designed for a wide range of cell culture applications. It is most commonly used as an additive to basal cell culture media to support cell growth under reduced-serum or serum-free conditions. Application and Benefits Our ITS supplement provides essential components required for the optimal performance of serum-free media. By supplementing conventional nutrient media with ITS, the fetal bovine serum (FBS) requirement for the routine maintenance of many cell lines can be significantly reduced. This helps minimize variability associated with serum use while maintaining consistent cell growth and viability. Insulin supports cellular uptake and metabolism of key nutrients, transferrin facilitates iron transport, and selenium contributes to antioxidant defense and enzymatic activity. Together, these components promote balanced cell metabolism and improved reproducibility in defined culture systems. Formulation and Usage Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) is supplied as a 100x concentrated solution in Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) without phenol red. For standard applications, dilute 1:100 into the appropriate basal medium to achieve the recommended working concentration. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to maintain product stability and sterility. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€59.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

McCoys 5A medium (dimodifikasi), w: 3,0 g/L glukosa, w: glutamin stabil, w: 2,0 mM natrium piruvat, w: 2,2 g/L NaHCO₃

McCoy's 5A Medium adalah media khusus yang sangat direkomendasikan dan dirancang untuk memfasilitasi pertumbuhan serta replikasi virus dalam kultur sel primer. Media ini telah mendapatkan pengakuan yang signifikan berkat kinerjanya yang luar biasa dalam berbagai aplikasi penelitian biologi. Salah satu aplikasi utama McCoy's 5A Medium adalah penggunaannya dalam kultur garis sel karsinoma kolon manusia. Secara khusus, media ini telah digunakan dalam studi tentang reseptor terikat protein G yang mengandung pengulangan leusin (LGR5) dan perannya dalam metastasis kanker kolon. Media ini telah digunakan secara efektif dalam pembiakan beberapa garis sel karsinoma kolon, termasuk HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b, dan TENN, sehingga memungkinkan para peneliti untuk menggali lebih dalam mekanisme yang mendasari metastasis kanker kolon. Selain aplikasinya dalam penelitian kanker, Medium McCoy 5A telah terbukti sangat penting dalam studi tentang osteoblas. Para peneliti yang meneliti reaktivitas ion hidroksiapatit yang kekurangan kalsium dalam media kultur sel standar telah memanfaatkan media ini untuk membiakkan osteoblas. Penerapan ini telah memfasilitasi pemahaman yang lebih baik mengenai interaksi antara osteoblas dan hidroksiapatit yang kekurangan kalsium, sehingga berkontribusi pada kemajuan di bidang penelitian tulang. Media McCoy 5A diformulasikan secara cermat dengan memodifikasi asam amino yang terdapat dalam Basal Medium Eagle untuk memberikan dukungan optimal bagi sel tumor hati. Formulasi yang diperkaya ini membuatnya cocok untuk berbagai lini sel yang telah mapan, serta sel primer, sehingga semakin meningkatkan keserbagunaan dan penerapannya dalam berbagai lingkungan penelitian. Media McCoy's 5A memperluas efek biokimia dan fisiologisnya melampaui sel tumor hati. Media ini telah berhasil digunakan untuk mendukung pertumbuhan kultur primer sumsum tulang, kulit, gusi, ginjal, omentum, adrenal, paru-paru, limpa, embrio tikus, dan jenis sel lainnya. Ragam aplikasi yang luas ini membuktikan kegunaan yang luas dari Medium 5A McCoy dalam mendukung pertumbuhan dan pemeliharaan berbagai jenis sel untuk penelitian biologi yang komprehensif. Formulasi Media McCoy's 5A (yang dimodifikasi) ini mengandung 3,0 g/L glukosa, glutamin stabil, 2,0 mM natrium piruvat, dan 2,2 g/L NaHCO3. Kontrol kualitas • pH = 7,2 ± 0,02 pada suhu 20–25°C. • Setiap lot telah diuji sterilitasnya serta bebas dari mikoplasma dan bakteri. Penyimpanan • Simpan dalam lemari pendingin pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Pembekuan dan pemanasan hingga +37°C akan mengurangi kualitas produk. • Jangan memanaskan media hingga melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali (misalnya, alat microwave). • Jika hanya sebagian media yang akan digunakan, keluarkan jumlah tersebut dari botol dan hangatkan pada suhu kamar. • Umur simpan untuk semua media kecuali media dasar adalah 6 hingga 8 minggu sejak tanggal pembukaan. Komposisi Komponen mg/L Garam AnorganikKalsium klorida x 2H₂O132,00 Magnesium sulfat97,67 Klorida kalium400,00 Natrium klorida6.460,00 Disodium hidrogen fosfat (anhidrat)504,00 Komponen LainD(+)-Glukosa (anhidrat)3.000,00 Glutathione (tereduksi)0,50 Pepton Daging600,00 Garam natrium fenol merah11,00 Asam AminoL-alanin13,36 L-Arginine x HCl42,14 L-Asparagin x H₂O45,03 Asam L-aspartat19,97 L-Sistein × HCl × H₂O31,75 L-Glutamin (stabil)219,15 Asam L-glutamat22,07 Glisin7,51 L-histidin x HCl x H₂O20,96 L-hidroksiprolin19,67 L-Isoleusin39,36 L-Leusin39,36 L-Lisin x HCl36,54 L-Metionin14,92 L-fenilalanin16,52 L-prolin17,27 L-Serin26,28 L-Treonin17,87 L-Triptofan3,06 garam disodium L-tirosin26,10 L-Valin17,57 VitaminAsam p-aminobenzoat1,00 Asam askorbat0,56 D(+)-Biotin0,20 D-Kalsium pantotenat0,20 Klorida kolin5,00 Asam folat10,00 myo-inositol36,00 Nikotinamida0,50 Asam nikotinat0,50 Pyridoxal HCl0,50 Piridoksin HCl0,50 Riboflavin0,20 Tiamin HCl0,20 Vitamin B122,00

€30.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Media 199, dengan: 2,7 mM glutamin stabil, dengan: 2,2 g/L NaHCO₃, dengan: EBSS

Medium 199 adalah media kultur sel serbaguna dan banyak digunakan yang diformulasikan khusus untuk budidaya eksplan primer. Media lengkap ini menggabungkan vitamin esensial, asam amino, dan faktor-faktor lain untuk menyediakan sumber nutrisi yang sepenuhnya terdefinisi bagi berbagai jenis sel. Media ini sangat cocok untuk sel-sel yang belum mengalami transformasi, sehingga menjadikannya alat yang sangat berharga bagi penelitian biologi. Media 199 menawarkan berbagai aplikasi di lapangan. Media ini dapat secara efektif mempertahankan kompleks kumulus-oosit (COC) dan mendukung pematangan oosit secara in vitro. Selain itu, medium ini digunakan untuk membilas saluran aspirasi selama pengumpulan ovum dari sapi Holstein Jerman. Lebih lanjut, Medium 199 berfungsi sebagai medium yang sangat baik untuk kultur sel endotel jantung yang berasal dari tikus. Aplikasi-aplikasi ini menunjukkan keserbagunaan dan kemampuan adaptasi Medium 199 terhadap berbagai kebutuhan eksperimental. Sejarah Pengembangan Medium 199 pada tahun 1950-an menandai kemajuan signifikan dalam media kultur jaringan. Sebelum diperkenalkan, banyak media kultur bergantung pada produk yang berasal dari hewan dan ekstrak jaringan. Namun, Morgan dan rekan-rekannya merevolusi bidang ini dengan merumuskan sumber nutrisi yang sepenuhnya terdefinisi untuk kultur sel. Melalui eksperimen mereka yang melibatkan berbagai kombinasi vitamin, asam amino, dan faktor lainnya, mereka menemukan sifat Medium 199 yang luar biasa dalam mendorong pertumbuhan. Pengendalian kualitas • pH = 7,2 ± 0,02 pada suhu 20–25°C. • Setiap lot telah diuji sterilitasnya serta bebas dari mikoplasma dan bakteri. Penyimpanan • Simpan dalam lemari pendingin pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Pembekuan dan pemanasan hingga +37°C akan mengurangi kualitas produk. • Jangan memanaskan media hingga melebihi 37° C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali (misalnya, microwave). • Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah tersebut dari botol dan hangatkan pada suhu kamar. • Umur simpan untuk semua media kecuali media dasar adalah 8 minggu sejak tanggal produksi. Komposisi Komponen mg/L Garam Anorganik Kalsium klorida x 2H₂O 264,92 Nitrat besi (III) x 9H₂O 0,72 Magnesium sulfat 97,67 Klorida kalium 400,00 Natrium asetat x 3H₂O 82,95 Natrium klorida 6.800,00 Natrium dihidrogen fosfat x H₂O 140,00 Komponen Lain Adenin sulfat 10,00 AMP 0,20 ATP 1,00 Kolesterol 0,20 2'-Deoksiribosa 0,50 D(+)-Glukosa anhidrat 1.000,00 Glutathione (merah) 0,05 Guanin x HCl 0,30 Hipoksantin 0,30 Fenol merah 10,00 D-Ribosa 0,50 Timin 0,30 Tween 80 4,90 Urasil 0,30 Xantin 0,30 NaHCO₃ 2.200,00 Asam Amino L-Alanin 25,00 L-Arginine x HCl 70,00 Asam L-aspartat 30,00 L-Sistein x HCl x H₂O 0,10 L-Sistin 20,00 L-Glutamin stabil 149,00 Asam L-Glutamat 67,00 Glisin 50,00 L-Histidin x HCl x H₂O 21,88 L-hidroksiprolin 10,00 L-Isoleusin 20,00 L-Leusin 60,00 L-Lisin x HCl 70,00 L-Metionin 15,00 L-fenilalanin 25,00 L-Prolin 40,00 L-Serin 25,00 L-Treonin 30,00 L-Triptofan 10,00 L-Tirosin 40,00 L-Valin 25,00 Vitamin Asam 4-amino benzoat 0,05 Asam askorbat 0,05 D(+)-Biotin 0,01 Kalsiferol 0,10 D-Kalsium pantotenat 0,01 Klorida kolin 0,50 Asam folat 0,01 myo-inositol 0,05 Menadion 0,01 Asam nikotinat 0,025 Nikotinamida 0,025 Piridoksal x HCl 0,025 Piridoksol x HCl 0,025 Riboflavin 0,01 DL-α-Tokoferol fosfat garam disodium 0,01 Tiamin x HCl 0,01 Asetat vitamin A 0,14

€40.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Media Pertumbuhan Sel NCI-H295R

Temukan Media Pertumbuhan Sel NCI-H295R yang canggih, larutan nutrisi yang diformulasikan secara ahli dan dirancang khusus untuk mendukung pertumbuhan serta pemeliharaan garis sel mamalia, termasuk sel NCI-H295R yang khusus. Media ini menonjol berkat perpaduan unik antara Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) dan Ham's F-12 (Nutrient Mixture F-12) dalam perbandingan 1:1 yang tepat, serta diperkaya dengan suplemen esensial untuk memenuhi kebutuhan kompleks kultur sel. Formulasi yang Disempurnakan untuk Kinerja Kultur Sel yang Unggul • Dasar Media yang Diperkaya: Media dasarnya sudah kaya, menggabungkan konsentrasi asam amino dan vitamin yang tinggi dari DMEM dengan nutrisi beragam dari Ham's F-12. Pada campuran yang kuat ini, kami menambahkan 5% Serum Sapi Janin (FBS), yang menyediakan faktor pertumbuhan, hormon, dan protein yang krusial. • Aditif yang Disesuaikan: Selain FBS, media ini diperkaya dengan suplemen penting termasuk Insulin, Transferrin, Albumin Serum Sapi, Asam Selenius, dan Asam Linoleat. Penambahan ini memenuhi kebutuhan seluler tertentu, mendorong pertumbuhan sel yang lebih baik, fungsi metabolisme, dan kesehatan secara keseluruhan. • Peningkatan L-Glutamin: Kehadiran L-glutamin semakin meningkatkan keefektifan media ini, mendukung proses metabolisme esensial, dan mendorong proliferasi sel yang kuat. Dioptimalkan untuk Kultur Sel • Lingkungan dengan pH Terkendali: Dengan menggabungkan sistem penyangga bikarbonat dan indikator fenol merah, media ini memastikan lingkungan pH yang stabil. Media ini dioptimalkan untuk atmosfer CO₂ 5%, sehingga memungkinkan pemantauan dan penyesuaian pH yang akurat. • Kualitas dan Kemurnian: Setiap lot media dasar menjalani pengujian ketat terhadap sterilitas, mikoplasma, dan bakteri, memastikan integritas media. Dengan media yang pH-nya terjaga, Anda dapat mempercayai kualitas dan kinerja yang konsisten dari media ini. Penanganan dan Penyimpanan Jaga kualitas media dengan menyimpannya dalam lemari pendingin pada suhu +2°C hingga +8°C, jauh dari cahaya. Hindari suhu ekstrem, seperti pembekuan atau pemanasan berlebihan, untuk menjaga keefektifannya. Untuk penggunaan sebagian, hangatkan jumlah yang dibutuhkan secara perlahan pada suhu kamar, pastikan media mencapai kondisi yang tepat tanpa merusak komponennya. Masa Simpan Dengan masa simpan 8 minggu sejak tanggal produksi, Media Pertumbuhan Sel NCI-H295R merupakan pilihan yang andal untuk kebutuhan kultur sel Anda, memastikan vitalitas dan produktivitas penelitian Anda.

€150.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

PBS

Larutan garam yang dibuffer dengan fosfat (PBS) merupakan larutan penyangga yang banyak digunakan dalam penelitian biologi dan kimia. Larutan ini memainkan peran penting dalam menjaga keseimbangan pH dan osmolaritas selama berbagai prosedur eksperimental, termasuk pengolahan jaringan dan kultur sel. Larutan PBS kami diformulasikan dengan cermat menggunakan bahan-bahan dengan kemurnian tinggi untuk memastikan stabilitas dan keandalan dalam setiap eksperimen. Osmolaritas dan konsentrasi ion PBS kami sangat mirip dengan yang terdapat dalam tubuh manusia, sehingga bersifat isotonik dan tidak beracun bagi sebagian besar sel. Komposisi Larutan PBS Kami Larutan PBS kami merupakan campuran larutan penyangga fosfat dan larutan garam dengan tingkat kemurnian ultra tinggi yang telah disesuaikan pH-nya. Pada konsentrasi kerja 1X, larutan ini mengandung: • 8000 mg/L Natrium klorida (NaCl) • 200 mg/L Kalium klorida (KCl) • 1.150 mg/L natrium fosfat dibasik anhidrat (Na₂HPO₄) • 200 mg/L Kalium fosfat monobasik anhidrat (KH₂PO₄) Komposisi ini memastikan pH dan keseimbangan ionik yang optimal, sehingga cocok untuk berbagai aplikasi biologis. Aplikasi Larutan PBS Kami Larutan PBS kami sangat ideal untuk berbagai aplikasi dalam penelitian biologi. Sifatnya yang isotonik dan tidak beracun membuatnya cocok untuk pengenceran zat dan pembilasan wadah sel. Larutan PBS yang mengandung EDTA efektif untuk melepaskan sel-sel yang menempel dan menggumpal. Namun, logam divalen seperti seng tidak boleh ditambahkan ke dalam PBS, karena hal ini dapat menyebabkan pengendapan. Dalam kasus seperti itu, disarankan untuk menggunakan buffer Good. Selain itu, larutan PBS kami merupakan alternatif yang dapat diterima sebagai media transportasi virus untuk pengangkutan dan penyimpanan virus RNA, termasuk SARS-CoV-2. Pengendalian Kualitas • Disaring secara steril Penyimpanan dan Umur Simpan • Simpan pada suhu +2°C hingga +25°C, terlindung dari cahaya. • Setelah dibuka, simpan pada suhu 2°C hingga 25°C dan gunakan dalam waktu 24 bulan. Kondisi Pengiriman • Suhu kamar Perawatan • Simpan dalam lemari pendingin pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan berulang hingga +37°C, karena hal ini dapat menurunkan kualitas produk. • Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti alat microwave. • Jika hanya sebagian media yang akan digunakan, ambil jumlah yang diperlukan dan panaskan hingga suhu kamar sebelum digunakan. Komposisi Kategori Komponen Konsentrasi (mg/L) Garam Kalium klorida 200 Fosfat kalium monobasik anhidrat 200 Natrium klorida 8000 Natrium fosfat dibasik anhidrat 1150

€20.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

RPMI 1640, dengan: 2,0 mM glutamin stabil, dengan: 2,0 g/L NaHCO₃

Media RPMI 1640, yang juga dikenal sebagai media RPMI, adalah media kultur sel yang sangat serbaguna dan banyak digunakan dalam penelitian biologi untuk membiakkan berbagai jenis sel mamalia. Dikembangkan oleh George E. Moore, Robert E. Gerner, dan H. Addison Franklin pada tahun 1966 di Roswell Park Comprehensive Cancer Center yang terkenal, media ini mendapatkan namanya dari asal-usulnya di Roswell Park Memorial Institute (RPMI). Awalnya dirancang untuk mendukung pertumbuhan sel leukemia manusia baik dalam kultur suspensi maupun monolayer, Media RPMI 1640 telah berkembang melalui modifikasi oleh para peneliti dan pemasok komersial sehingga menjadi cocok untuk berbagai jenis sel mamalia. Media ini sangat kompatibel dengan garis sel seperti HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrosit, dan karsinoma. Media RPMI 1640 menonjol dibandingkan media kultur sel lainnya berkat komposisinya yang unik. Media ini mengandung jumlah fosfat, asam amino, dan vitamin yang cukup besar. Secara khusus, media ini mengandung biotin, vitamin B12, dan PABA, yang tidak terdapat dalam Eagle's Minimal Essential Medium atau Dulbecco's Modified Eagle Medium. Selain itu, Media RPMI 1640 menunjukkan konsentrasi vitamin inositol dan kolin yang jauh lebih tinggi. Namun, media ini tidak mengandung protein, lipid, atau faktor pertumbuhan. Oleh karena itu, penambahan 10% Serum Janin Sapi (FBS) umumnya diperlukan untuk menyediakan kondisi optimal bagi pertumbuhan sel. Sistem penyangga Medium RPMI 1640 bergantung pada natrium bikarbonat dan memerlukan lingkungan dengan konsentrasi CO₂ 5–10% untuk mempertahankan pH yang sesuai secara fisiologis. Penambahan agen pereduksi glutathione semakin membedakan medium ini dari medium lainnya. Pengendalian Mutu • Disaring secara steril Penyimpanan dan Umur Simpan • Simpan pada suhu +2°C hingga +8°C, terlindung dari cahaya. • Setelah dibuka, simpan pada suhu 4°C dan gunakan dalam waktu 6–8 minggu. Kondisi Pengiriman • Suhu kamar Perawatan • Simpan dalam lemari pendingin pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan berulang hingga +37°C, karena hal ini dapat menurunkan kualitas produk. • Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti microwave. • Jika hanya sebagian media yang akan digunakan, ambil jumlah yang diperlukan dan panaskan hingga suhu kamar sebelum digunakan. Komposisi Kategori Komponen Konsentrasi (mg/L) Asam Amino Glisin 10,00 L-Alanil-L-Glutamin 434,40 L-Arginine 200,00 L-AsparaginH₂O 56,82 Asam L-Aspartat 20,00 L-Sistin 2HCl 65,20 Asam L-Glutamat 20,00 L-Histidin HClH₂O 20,27 L-hidroksi-L-prolin 20,00 L-Isoleusin 50,00 L-Leusin 50,00 L-Lisin HCl 40,00 L-Metionin 15,00 L-fenilalanin 15,00 L-prolin 20,00 L-Serin 30,00 L-Treonin 20,00 L-Triptofan 5,00 L-Tirosin 2Na2H₂O 28,83 L-Valin 20,00 Vitamin Asam p-Amino Benzoat 1,00 D-Biotin 0,20 Klorida Kolin 3,00 D-Kalsium Pantotenat 0,25 Asam Folat 1,00 myo-inositol 35,00 Nikotinamida 1,00 Pyridoxine HCl 1,00 Riboflavin 0,20 Tiamin HCl 1,00 VitaminB12 0,005 Garam Anorganik Ca(NO₃)₂4H₂O 100,00 KCl 400,00 MgSO₄7H₂O 100,00 NaCl 6.000,00 NaHCO₃ 2000,00 Na₂HPO₄ 800,00 Komponen Lain D-Glukosa 2000,00 L-Glutathione Tereduksi 1,00 Garam Natrium Fenol Merah 5,30

€25.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Stable Glutamin (200mM), L-Alanyl-L-Glutamine Solution

Volume: 100 ml Storage: ≤ –15°C Sterility: Sterile-filtered Stable Glutamine Solution (L-Alanyl-L-Glutamine, 200 mM) is a highly stable dipeptide form of L-glutamine designed as a direct replacement for conventional L-glutamine in cell culture media. L-glutamine is an essential amino acid and a major energy source for cultured cells, playing a critical role in cell growth, metabolism, and protein synthesis. Application and Benefits In standard liquid media, L-glutamine degrades relatively quickly at 37°C, leading to the formation of toxic byproducts such as ammonium ions that can negatively affect cell viability and experimental outcomes. Stable glutamine overcomes this limitation by providing a non-degrading dipeptide form that remains intact in culture conditions. Cells enzymatically cleave the dipeptide bond to release L-glutamine as needed, ensuring a continuous fresh supply while preventing the accumulation of harmful waste products. This makes the solution particularly advantageous for long-term cell cultures and high-density growth systems. Formulation and Usage The L-Alanyl-L-Glutamine solution is prepared in cell culture–grade water at a concentration of 200 mM and is sterile-filtered for contamination-sensitive applications. It can be diluted directly into complete media according to experimental requirements. Store at ≤ –15°C and avoid repeated freeze-thaw cycles to maintain product stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Media kultur sel: Gambaran umum

Dalam bidang ilmu hayati, salah satu metodologi terpenting adalah kultur sel. Pengambilan sel, jaringan, atau organ dari hewan atau tumbuhan, serta penanaman sel, jaringan, atau organ tersebut dalam lingkungan buatan yang mendukung kelangsungan hidup dan/atau pertumbuhannya, itulah yang dimaksud dengan istilah "kultur sel." Kebutuhan lingkungan mendasar untuk perkembangan sel yang optimal adalah suhu yang terkendali, substrat untuk pelekatan sel, media pertumbuhan yang memadai, dan inkubator yang menjaga pH dan osmolalitas optimal. Sel harus memiliki kondisi-kondisi ini agar dapat tumbuh secara maksimal.

Pemilihan media pertumbuhan yang memadai untuk budidaya in vitro merupakan tahap dalam kultur sel yang paling kritis sekaligus paling vital. Media pertumbuhan, yang juga dikenal sebagai media kultur, adalah cairan atau gel yang diformulasikan untuk mendorong perkembangan organisme pada skala mikroskopis, seluler, atau tumbuhan. Media yang digunakan untuk membudidayakan sel sering kali mengandung pasokan energi yang memadai serta zat-zat yang mengatur siklus sel. Komponen utama media kultur meliputi asam amino, vitamin, garam anorganik, glukosa, dan serum. Serum ditambahkan ke dalam media karena berfungsi sebagai sumber faktor pertumbuhan, hormon, dan faktor perlekatan. Selain menyediakan nutrisi, media juga berperan dalam menjaga tingkat pH dan osmolalitas.

Jenis-jenis media yang digunakan dalam kultur sel

Baik sel manusia maupun sel hewan berpotensi ditumbuhkan baik dalam media buatan atau sintetis maupun media yang sepenuhnya alami yang dilengkapi dengan unsur-unsur alami. Berikut ini, kami akan memberikan gambaran umum mengenai berbagai jenis media yang saat ini tersedia.

Media alami

Hanya cairan biologis yang ada dalam keadaan alami yang dapat ditemukan dalam media alami. Media alami sangat bermanfaat dan mudah digunakan untuk membiakkan berbagai jenis sel hewan. Kurangnya pemahaman tentang komponen tepat yang menyusun media alami merupakan faktor utama yang menyebabkan rendahnya tingkat pengulangan hasil yang diperoleh dengan menggunakan media alami.

Media buatan

Persiapan media buatan atau sintetis melibatkan penambahan nutrisi (baik organik maupun anorganik), protein serum, karbohidrat, kofaktor, vitamin, dan garam, serta fase gas O₂ dan CO₂ [1].

Berbagai jenis media buatan telah dikembangkan untuk memenuhi satu atau lebih fungsi berikut: 1) Kelangsungan hidup segera (larutan garam seimbang dengan pH dan tekanan osmotik yang tepat). 2) Kelangsungan hidup jangka panjang (larutan garam seimbang yang ditambah dengan berbagai formulasi bahan kimia organik dan/atau serum). 3) Perkembangan tanpa batas waktu. 4) Fungsi khusus.

Ada empat klasifikasi berbeda untuk media buatan:

Media yang mengandung serum

Jenis suplemen yang paling sering ditemukan dalam media yang digunakan untuk menumbuhkan sel hewan adalah serum janin sapi. Serum ini ditambahkan ke media kultur sebagai suplemen berbiaya rendah guna mencapai kondisi pertumbuhan terbaik. Selain bertindak sebagai pengangkut atau pengkelat untuk nutrisi yang tidak stabil atau tidak larut dalam air, hormon dan faktor pertumbuhan, penghambat protease, serta zat lainnya, serum juga mengikat dan menetralkan molekul berbahaya.

Media Bebas Serum

Kehadiran serum dalam media memiliki sejumlah kelemahan dan berpotensi menyebabkan kesalahan interpretasi yang signifikan dalam penelitian imunologi [2, 3]. Berbagai jenis media bebas serum telah dikembangkan [4, 5]. Media-media ini umumnya diformulasikan secara khusus untuk mendukung kultur satu jenis sel, seperti Knockout Serum Replacement dan Knockout DMEM dari Thermo Fisher Scientific, serta media mTESR dari Stem Cell Technologies [6], untuk sel punca [7].

Selain itu, media ini mengandung jumlah yang telah ditentukan dari faktor pertumbuhan yang dimurnikan, lipoprotein, dan protein lainnya, yang biasanya disediakan oleh serum [8]. Media ini sering disebut sebagai "media kultur terdefinisi" karena komponen yang menyusunnya telah dipahami dengan baik.

Media yang didefinisikan secara kimiawi

Media ini mengandung komponen anorganik dan organik ultra-murni yang tidak terkontaminasi oleh zat apa pun. Media ini juga dapat mengandung tambahan protein murni, seperti faktor pertumbuhan.

 Modifikasi genetik bakteri atau ragi, bersama dengan penambahan asam lemak, vitamin, kolesterol, dan asam amino tertentu, menghasilkan komponen-komponennya [9].

Media bebas protein

Media bebas protein adalah media yang sama sekali tidak mengandung protein dan hanya mengandung unsur-unsur non-protein. Dibandingkan dengan media yang ditambahkan serum, penggunaan media tanpa penambahan protein mendorong proliferasi sel dan ekspresi protein yang lebih baik serta memudahkan pemurnian produk apa pun yang dihasilkan dalam proses hilir [10-12]. Protein tidak termasuk dalam formulasi seperti MEM dan RPMI-1640. Namun, suplemen protein dapat diberikan jika diperlukan.

Media kultur dan komponen dasarnya

Media kultur komersial dapat dibeli dalam bentuk bubuk atau cairan dan sering kali mengandung berbagai nutrisi seperti asam amino, glukosa, garam, vitamin, dan suplemen makanan lainnya. 

Kebutuhan akan komponen-komponen ini berbeda untuk setiap lini sel, dan variasi inilah yang menyebabkan banyaknya formulasi media yang berbeda. Setiap komponen memiliki fungsi tertentu, yang akan dijelaskan dalam paragraf berikut:

Sistem penyangga

Untuk menjaga kondisi pertumbuhan yang optimal, pH harus dikontrol, yang sering dilakukan dengan salah satu dari dua sistem penyangga berikut:

Sistem penyangga alami

Rasio CO₂/H₂CO₃ di atmosfer sama dengan yang ada di media, sehingga menciptakan mekanisme penyangga alami. Untuk mempertahankan mekanisme penyangga alami ini, kultur harus disimpan dalam lingkungan udara dengan kadar CO₂ 5–10%, yang sering dicapai dengan menggunakan inkubator CO₂. Salah satu keunggulan menggunakan penyangga alami adalah harganya yang murah dan aman.

HEPES

Penyangga kimiawi yang menggunakan zwitterion HEPES memiliki kemampuan penyangga yang lebih besar pada kisaran pH 7,2–7,4 dan tidak memerlukan lingkungan gas yang diatur. Untuk jenis sel tertentu, dosis HEPES yang lebih tinggi dapat berbahaya. Media yang mengandung HEPES juga jauh lebih rentan terhadap efek fototoksik dari cahaya fluoresen [13].

Phenol Red

Indikator pH fenol merah sering ditambahkan ke dalam media kultur yang tersedia secara komersial, sehingga memungkinkan pemantauan pH secara terus-menerus. Seiring pertumbuhan sel, metabolit yang dihasilkan oleh sel-sel ini menyebabkan pergeseran pH dan akibatnya perubahan warna media. Phenol Red memiliki efek ganda terhadap warna media, yaitu berubah menjadi kuning pada pH asam dan ungu pada pH basa. pH 7,4, nilai optimal untuk kultur sel, menyebabkan media tampak berwarna merah fluoresen.

Namun, fenol merah memiliki beberapa kelemahan: Pertama, fenol merah mampu meniru fungsi sejumlah hormon steroid, terutama estrogen [14]. Oleh karena itu, saat mempelajari sel yang sensitif terhadap estrogen seperti jaringan payudara, disarankan menggunakan media yang bebas dari fenol merah. Keseimbangan natrium-kalium terganggu oleh adanya fenol merah dalam beberapa formulasi bebas serum. Menambahkan serum atau hormon hipofisis sapi ke dalam media dapat menetralkan efek ini [15]. Ketiga, deteksi dalam eksperimen sitometri aliran terhambat oleh adanya fenol merah.

Garam anorganik

Media yang mengandung garam anorganik, seperti ion natrium, kalium, dan kalsium, membantu menjaga keseimbangan osmotik dan mengatur potensial membran.

Asam amino

Karena asam amino merupakan komponen dasar protein, maka asam amino merupakan komponen esensial dari setiap media pertumbuhan sel yang pernah diciptakan. Karena sel tidak mampu memproduksi asam amino tertentu secara mandiri, penting bagi media kultur untuk mengandung asam amino esensial. Asam amino diperlukan untuk proliferasi sel, dan konsentrasinya menentukan kepadatan sel maksimum yang dapat dicapai. Secara khusus, L-glutamin, sebuah asam amino esensial, sangatlah penting.

L-glutamin berfungsi sebagai sumber energi sekunder untuk metabolisme dan menyumbangkan nitrogen untuk produksi NAD, NADPH, dan nukleotida. Karena L-glutamin merupakan asam amino yang tidak stabil dan seiring waktu berubah menjadi bentuk yang tidak dapat dimanfaatkan oleh sel, maka L-glutamin harus ditambahkan ke dalam media.

Selain itu, asam amino non-esensial dapat ditambahkan ke dalam media untuk mengisi kembali asam amino yang telah habis selama proses pertumbuhan. Pertumbuhan sel akan meningkat dan viabilitasnya akan bertambah jika media pertumbuhan ditambah dengan asam amino non-esensial.

Karbohidrat

Karbohidrat dalam bentuk gula merupakan sumber energi utama. Banyak media juga mengandung maltosa dan fruktosa selain gula yang lebih umum seperti glukosa dan galaktosa.

Protein dan peptida

Albumin, transferrin, dan fibronektin adalah protein dan peptida yang paling umum digunakan. Ketiganya sangat penting terutama dalam media yang tidak mengandung serum. Albumin, transferrin, aprotinin, fetuin, dan fibronektin adalah beberapa protein yang dapat ditemukan dalam serum, yang merupakan sumber protein yang kaya.

Albumin adalah protein utama yang terdapat dalam darah, dan fungsinya adalah mengikat serta mengangkut berbagai zat, termasuk air, garam, asam lemak bebas, hormon, dan vitamin, antar organ dan sel. Kemampuan albumin untuk mengikat zat kimia menjadikannya kandidat yang efektif untuk menghilangkan senyawa berbahaya dari media tempat sel-sel dikultur.

Aprotinin merupakan agen pelindung dalam sistem kultur sel, karena stabil pada pH netral dan asam, serta tahan terhadap suhu tinggi dan kerusakan yang mungkin disebabkan oleh enzim proteolitik. Aprotinin mampu menghambat sejumlah protease serin, termasuk tripsin, di antara enzim lainnya.

Fetuin adalah glikoprotein yang dapat terdeteksi dalam jumlah lebih tinggi pada serum hewan janin dan bayi baru lahir dibandingkan dengan serum hewan dewasa. Selain itu, fetuin juga bertindak sebagai penghambat protease serin. Protein fibronektin merupakan komponen esensial dalam proses adhesi sel. Transferrin adalah protein yang mengangkut zat besi dan bertanggung jawab untuk mengantarkan zat besi ke membran sel.

Asam lemak dan lipid

Keduanya memainkan peran penting dalam media bebas serum ketika serum tidak ada.

Vitamin

Banyak vitamin diperlukan untuk perkembangan dan proliferasi sel. Vitamin tidak dapat diproduksi dalam jumlah yang cukup oleh sel dan oleh karena itu sangat penting dalam kultur jaringan sebagai suplemen makanan.

Dalam kultur sel, serum merupakan sumber utama vitamin; namun, media juga diperkaya dengan berbagai vitamin agar sesuai untuk jenis sel tertentu. Umumnya, vitamin kelompok B digunakan untuk merangsang pertumbuhan.

Unsur jejak

Unsur-unsur kimia seperti tembaga, seng, selenium, dan zat antara asam trikarboksilat dikenal sebagai unsur jejak. Unsur jejak sering ditambahkan ke media yang tidak mengandung serum untuk menggantikan unsur-unsur yang biasanya terdapat dalam serum. Unsur-unsur ini merupakan komponen kimia penting yang diperlukan untuk perkembangan sel yang sehat. Banyak reaksi biokimia bergantung pada mikronutrien tertentu, seperti aktivitas enzim.

Suplemen media

Media pertumbuhan lengkap yang disarankan untuk garis sel tertentu memerlukan komponen tambahan yang tidak terdapat dalam media dasar dan serum. Suplemen ini mendukung pertumbuhan sel dan fungsi metabolik yang tepat.

Meskipun hormon, faktor pertumbuhan, dan molekul pensinyalan sangat penting untuk proliferasi yang tepat dari lini sel tertentu, tindakan pencegahan berikut harus selalu dilakukan: Karena penambahan suplemen dapat mengubah osmolalitas media pertumbuhan lengkap, yang dapat menghambat perkembangan sel, disarankan untuk selalu memverifikasi osmolalitas setelah menambahkan suplemen. Untuk sebagian besar lini sel, osmolalitas optimal berkisar antara 260 dan 320 mOSM/kg.

Antibiotik

Antibiotik sering digunakan untuk menghambat pertumbuhan kontaminan bakteri dan jamur [16], meskipun antibiotik tersebut tidak esensial bagi pertumbuhan sel. Karena antibiotik dapat menyembunyikan kontaminasi oleh mikoplasma dan bakteri resisten, penggunaan rutin antibiotik tidak disarankan dalam kultur sel [17, 18].

Selain itu, antibiotik dapat mengganggu metabolisme sel yang hipersensitif. Kombinasi penisilin-streptomisin yang diproduksi oleh MilliporeSigma dan Life Technologies sering digunakan. Plasmocin telah digunakan dalam kultur garis sel glioma TS603, TS516, dan BT260 [19], dan terbukti efektif dalam menghilangkan kontaminasi mikoplasma (20).

Serum

Albumin, faktor pertumbuhan, dan penghambat pertumbuhan semuanya terdapat dalam serum. Serum merupakan salah satu komponen terpenting dalam medium kultur sel karena menyediakan asam amino, protein, vitamin (terutama vitamin larut lemak seperti A, D, E, dan K), karbohidrat, lipid, hormon, faktor pertumbuhan, mineral, dan unsur jejak.

Serum dari sumber janin sapi dan anak sapi sering digunakan untuk mendorong perkembangan sel yang dikultur. Serum janin merupakan sumber faktor pertumbuhan yang melimpah dan cocok untuk kloning sel serta pengembangan sel yang sensitif. Karena kemampuannya dalam mendorong pertumbuhan yang lebih rendah, serum anak sapi digunakan dalam eksperimen penghambatan kontak. Media pertumbuhan normal biasanya mengandung 2% hingga 10% serum. Penambahan serum ke dalam media kultur memiliki tujuan sebagai berikut [21]:

  • Serum menyediakan nutrisi esensial bagi sel (baik dalam bentuk larutan maupun terikat pada protein).

  • Beberapa faktor pertumbuhan dan hormon yang berperan dalam mendorong pertumbuhan dan aktivitas sel khusus terdapat dalam serum.

  • Serum menyediakan banyak protein pengikat, seperti albumin dan transferrin, yang mengangkut zat kimia lain ke dalam sel. Misalnya, albumin mengantarkan lemak, vitamin, hormon, dll. ke dalam sel.

  • Serum juga menyediakan protein, seperti fibronektin, yang meningkatkan adhesi sel ke substrat. Selain itu, serum menghasilkan unsur-unsur penyebaran yang membantu ekspansi sel sebelum pembelahan.

  • Serum mengantarkan penghambat protease yang mencegah proteolisis dalam sel.

  • Serum juga mengandung mineral seperti Na+, K+, Zn2+, dan Fe2+.

  • Media ini meningkatkan viskositas, sehingga melindungi sel dari cedera mekanis selama pengadukan kultur suspensi.

  • Albumin juga berfungsi sebagai penyangga.

Referensi

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Nutrisi sel hewan dalam kultur jaringan; studi awal mengenai media sintetis. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Adsorpsi cepat komponen serum janin sapi oleh sel mamalia dalam kultur. Sumber potensial artefak dalam studi antiserum terhadap antigen spesifik sel. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Penambahan serum ke dalam medium yang digunakan untuk persiapan suspensi sel sebagai sumber potensial artefak dalam reaksi yang dimediasi sel yang diteliti melalui uji kelenjar getah bening popliteal. J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Media bebas serum komersial: pertumbuhan hibridoma dan produksi antibodi monoklonal. J Immunol Methods. 1991;145:175-83

[5] Barnes D, Sato G. Metode pertumbuhan sel kultur dalam media bebas serum. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O, dkk. HSP70 mengarahkan TDP-43 bebas RNA ke dalam cangkang cair intranuklear berbentuk bola yang anisotropik. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, dkk. Penuaan yang dipicu oleh sindrom Down mengganggu arsitektur nukleus sel progenitor saraf. Cell Stem Cell. 2022;29:116-130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Penggantian total serum dengan albumin, transferrin, dan lipid kedelai dalam kultur limfosit B yang reaktif terhadap lipopolisakarida. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Peningkatan sistematis terhadap media bebas protein yang didefinisikan secara kimiawi untuk pertumbuhan hibridoma dan produksi antibodi monoklonal. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] Darfler F. Media bebas protein untuk pertumbuhan hibridoma dan sel-sel sistem kekebalan lainnya. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Barnes D, Sato G. Kultur sel bebas serum: suatu pendekatan terpadu. Cell. 1980;22:649-55

[12] Hamilton W, Ham R. Pertumbuhan klonal garis sel hamster Cina dalam media bebas protein. In Vitro. 1977;13:537-47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Analisis efek sitotoksik media kultur yang mengandung HEPES dan terpapar cahaya. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Fenol merah dalam media kultur jaringan merupakan estrogen lemah: implikasi terkait studi sel yang responsif terhadap estrogen dalam kultur. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] Karmiol S. Pengembangan media bebas serum. Dalam: Master JRW, editor. Kultur Sel Hewan, edisi ke-3. Oxford: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Penggunaan antibiotik dalam media kultur sel. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Penyebaran dan pengendalian infeksi mikoplasma pada kultur sel. In Vitro. 1976;12:643-8

[18] Masters J, Stacey G. Mengganti media dan melakukan passaging pada garis sel. Nat Protoc. 2007;2:2276-84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M, dkk. Demetilase histon KDM6A secara langsung mendeteksi oksigen untuk mengendalikan kromatin dan nasib sel. Science. 2019;363:1217-1222

[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M, dkk. Efektivitas Plasmocin™ pada berbagai garis sel mamalia yang terinfeksi mollicutes dibandingkan dengan antibiotik yang umum digunakan dalam kultur sel: pengalaman lokal. Cytotechnology. 2011;63:609-20

[21] Kragh Hansen U. Aspek molekuler pengikatan ligan pada albumin serum. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53