Media 199, dengan: 2,7 mM glutamin stabil, dengan: 2,2 g/L NaHCO₃, dengan: EBSS

Medium 199 adalah media kultur sel serbaguna dan banyak digunakan yang diformulasikan khusus untuk budidaya eksplan primer. Media lengkap ini menggabungkan vitamin esensial, asam amino, dan faktor-faktor lain untuk menyediakan sumber nutrisi yang sepenuhnya terdefinisi bagi berbagai jenis sel. Media ini sangat cocok untuk sel-sel yang belum mengalami transformasi, sehingga menjadikannya alat yang sangat berharga bagi penelitian biologi.

Media 199 menawarkan berbagai aplikasi di lapangan. Media ini dapat secara efektif mempertahankan kompleks kumulus-oosit (COC) dan mendukung pematangan oosit secara in vitro. Selain itu, medium ini digunakan untuk membilas saluran aspirasi selama pengumpulan ovum dari sapi Holstein Jerman. Lebih lanjut, Medium 199 berfungsi sebagai medium yang sangat baik untuk kultur sel endotel jantung yang berasal dari tikus. Aplikasi-aplikasi ini menunjukkan keserbagunaan dan kemampuan adaptasi Medium 199 terhadap berbagai kebutuhan eksperimental.

Sejarah

Pengembangan Medium 199 pada tahun 1950-an menandai kemajuan signifikan dalam media kultur jaringan. Sebelum diperkenalkan, banyak media kultur bergantung pada produk yang berasal dari hewan dan ekstrak jaringan. Namun, Morgan dan rekan-rekannya merevolusi bidang ini dengan merumuskan sumber nutrisi yang sepenuhnya terdefinisi untuk kultur sel. Melalui eksperimen mereka yang melibatkan berbagai kombinasi vitamin, asam amino, dan faktor lainnya, mereka menemukan sifat Medium 199 yang luar biasa dalam mendorong pertumbuhan.

Pengendalian kualitas

• pH = 7,2 ± 0,02 pada suhu 20–25°C. 
• Setiap lot telah diuji sterilitasnya serta bebas dari mikoplasma dan bakteri.

Penyimpanan  

• Simpan dalam lemari pendingin pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Pembekuan dan pemanasan hingga +37°C akan mengurangi kualitas produk. 
• Jangan memanaskan media hingga melebihi 37° C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali (misalnya, microwave). 
• Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah tersebut dari botol dan hangatkan pada suhu kamar.
• Umur simpan untuk semua media kecuali media dasar adalah 8 minggu sejak tanggal produksi.

Komposisi

	Komponen	mg/L
Garam Anorganik	Kalsium klorida x 2H₂O	264,92
	Nitrat besi (III) x 9H₂O	0,72
	Magnesium sulfat	97,67
	Klorida kalium	400,00
	Natrium asetat x 3H₂O	82,95
	Natrium klorida	6.800,00
	Natrium dihidrogen fosfat x H₂O	140,00
Komponen Lain	Adenin sulfat	10,00
	AMP	0,20
	ATP	1,00
	Kolesterol	0,20
	2'-Deoksiribosa	0,50
	D(+)-Glukosa anhidrat	1.000,00
	Glutathione (merah)	0,05
	Guanin x HCl	0,30
	Hipoksantin	0,30
	Fenol merah	10,00
	D-Ribosa	0,50
	Timin	0,30
	Tween 80	4,90
	Urasil	0,30
	Xantin	0,30
	NaHCO₃	2.200,00
Asam Amino	L-Alanin	25,00
	L-Arginine x HCl	70,00
	Asam L-aspartat	30,00
	L-Sistein x HCl x H₂O	0,10
	L-Sistin	20,00
	L-Glutamin stabil	149,00
	Asam L-Glutamat	67,00
	Glisin	50,00
	L-Histidin x HCl x H₂O	21,88
	L-hidroksiprolin	10,00
	L-Isoleusin	20,00
	L-Leusin	60,00
	L-Lisin x HCl	70,00
	L-Metionin	15,00
	L-fenilalanin	25,00
	L-Prolin	40,00
	L-Serin	25,00
	L-Treonin	30,00
	L-Triptofan	10,00
	L-Tirosin	40,00
	L-Valin	25,00
Vitamin	Asam 4-amino benzoat	0,05
	Asam askorbat	0,05
	D(+)-Biotin	0,01
	Kalsiferol	0,10
	D-Kalsium pantotenat	0,01
	Klorida kolin	0,50
	Asam folat	0,01
	myo-inositol	0,05
	Menadion	0,01
	Asam nikotinat	0,025
	Nikotinamida	0,025
	Piridoksal x HCl	0,025
	Piridoksol x HCl	0,025
	Riboflavin	0,01
	DL-α-Tokoferol fosfat garam disodium	0,01
	Tiamin x HCl	0,01
	Asetat vitamin A	0,14