Medium 199, med: 2,7 mM stabilt glutamin, med: 2,2 g/L NaHCO₃, med: EBSS

Medium 199 er et alsidigt og udbredt cellekulturmedium, der er specielt udviklet til dyrkning af primære eksplantater. Dette omfattende medium kombinerer essentielle vitaminer, aminosyrer og andre faktorer for at tilvejebringe en fuldt defineret næringskilde til en lang række celletyper. Det er særligt velegnet til ikke-transformerede celler, hvilket gør det til et uvurderligt redskab inden for biologisk forskning.

Medium 199 har en række anvendelsesmuligheder inden for området. Det kan effektivt opretholde cumulus-oocyt-komplekset (COC) og understøtte in vitro-modningen af oocytter. Derudover anvendes det til skylning af aspirationsslanger under ægudtagning fra tyske Holstein-køer. Desuden fungerer Medium 199 som et fremragende medium til dyrkning af hjerteendotelceller fra rotter. Disse anvendelsesmuligheder demonstrerer Medium 199’s alsidighed og tilpasningsevne til forskellige eksperimentelle behov.

Historie

Udviklingen af Medium 199 i 1950’erne markerede et betydeligt fremskridt inden for vævskulturmedier. Før dets introduktion var mange kulturmedier afhængige af animalske produkter og vævsekstrakter. Morgan og kolleger revolutionerede imidlertid området ved at formulere en fuldstændig defineret næringskilde til cellekulturer. Gennem deres eksperimenter med forskellige kombinationer af vitaminer, aminosyrer og andre faktorer opdagede de de enestående vækstfremmende egenskaber ved Medium 199.

Kvalitetskontrol

• pH = 7,2 ± 0,02 ved 20–25 °C. 
• Hvert parti er testet for sterilitet og fravær af mycoplasma og bakterier.

Opbevaring  

• Opbevares i køleskab ved +2 °C til +8 °C i mørke. Frysning og opvarmning til +37 °C forringer produktets kvalitet. 
• Mediet må ikke opvarmes til over 37 °C, og der må ikke anvendes ukontrollerbare varmekilder (f.eks. mikrobølgeovne). 
• Hvis kun en del af mediet skal anvendes, skal denne mængde tages ud af flasken og opvarmes til stuetemperatur.
• Holdbarheden for alle medier undtagen basismediet er 8 uger fra fremstillingsdatoen.

Sammensætning

	Bestanddele	mg/L
Uorganiske salte	Calciumchlorid x 2H₂O	264,92
	Jern(III)nitrat x 9H₂O	0,72
	Magnesiumsulfat	97,67
	Kaliumchlorid	400,00
	Natriumacetat x 3H₂O	82,95
	Natriumchlorid	6.800,00
	Natriumdihydrogenphosphat x H₂O	140,00
Andre komponenter	Adeninsulfat	10,00
	AMP	0,20
	ATP	1,00
	Kolesterol	0,20
	2'-Deoxyribose	0,50
	D(+)-glukose, vandfri	1,000,00
	Glutathion (red.)	0,05
	Guanin x HCl	0,30
	Hypoxanthin	0,30
	Fenolrød	10,00
	D-ribose	0,50
	Thymin	0,30
	Tween 80	4,90
	Uracil	0,30
	Xanthin	0,30
	NaHCO₃	2.200,00
Aminosyrer	L-alanin	25,00
	L-arginin x HCl	70,00
	L-asparaginsyre	30,00
	L-cystein x HCl x H₂O	0,10
	L-cystin	20,00
	L-glutamin, stabil	149,00
	L-glutaminsyre	67,00
	Glycin	50,00
	L-histidin x HCl x H₂O	21,88
	L-hydroxyprolin	10,00
	L-isoleucin	20,00
	L-leucin	60,00
	L-lysin x HCl	70,00
	L-methionin	15,00
	L-phenylalanin	25,00
	L-prolin	40,00
	L-serin	25,00
	L-threonin	30,00
	L-tryptofan	10,00
	L-tyrosin	40,00
	L-valin	25,00
Vitaminer	4-Aminobenzoesyre	0,05
	Ascorbinsyre	0,05
	D(+)-biotin	0,01
	Calciferol	0,10
	D-calciumpantothenat	0,01
	Cholinchlorid	0,50
	Folinsyre	0,01
	myo-inositol	0,05
	Menadion	0,01
	Nikotinsyre	0,025
	Nikotinamid	0,025
	Pyridoxal x HCl	0,025
	Pyridoxol x HCl	0,025
	Riboflavin	0,01
	DL-α-tocopherolfosfat-dinatriumsalt	0,01
	Thiamin x HCl	0,01
	A-vitaminacetat	0,14