Medio 199, p/v: 2,7 mM de glutamina estable, p/v: 2,2 g/L de NaHCO₃, p/v: EBSS

El medio 199 es un medio de cultivo celular versátil y ampliamente utilizado, formulado especialmente para el cultivo de explantes primarios. Este medio completo combina vitaminas esenciales, aminoácidos y otros factores para proporcionar una fuente de nutrientes totalmente definida para una gran variedad de tipos celulares. Es especialmente adecuado para células no transformadas, lo que lo convierte en una herramienta inestimable para la investigación biológica.

El Medio 199 ofrece una amplia gama de aplicaciones en este campo. Es capaz de mantener eficazmente el complejo cumulo-ovocitario (COC) y favorecer la maduración in vitro de los ovocitos. Además, se emplea en el lavado de los tubos de aspiración durante la recogida de óvulos de vacas de la raza Holstein alemana. Por otra parte, el Medio 199 constituye un excelente medio para el cultivo de células endoteliales cardíacas derivadas de ratas. Estas aplicaciones demuestran la versatilidad y adaptabilidad del Medio 199 a diversas necesidades experimentales.

Historia

El desarrollo del Medio 199 en la década de 1950 supuso un avance significativo en los medios de cultivo tisular. Antes de su introducción, muchos medios de cultivo se basaban en productos de origen animal y extractos de tejidos. Sin embargo, Morgan y sus colegas revolucionaron el campo al formular una fuente nutricional completamente definida para los cultivos celulares. A través de sus experimentos, en los que utilizaron diferentes combinaciones de vitaminas, aminoácidos y otros factores, descubrieron las excepcionales propiedades del Medio 199 para promover el crecimiento.

Control de calidad

• pH = 7,2 ± 0,02 a 20-25 °C. 
• Se ha comprobado la esterilidad de cada lote, así como la ausencia de micoplasmas y bacterias.

Conservación  

• Conservar refrigerado a una temperatura de +2 °C a +8 °C, protegido de la luz. La congelación y el calentamiento hasta +37 °C reducen la calidad del producto. 
• No caliente el medio a más de 37 °C ni utilice fuentes de calor incontrolables (por ejemplo, microondas). 
• Si solo se va a utilizar una parte del medio, extraiga dicha cantidad del frasco y caliéntela a temperatura ambiente.
• El plazo de conservación de cualquier medio, excepto el medio básico, es de 8 semanas a partir de la fecha de fabricación.

Composición

	Componentes	mg/L
Sales inorgánicas	Cloruro de calcio x 2H₂O	264,92
	Nitrato de hierro (III) x 9H₂O	0,72
	Sulfato de magnesio	97,67
	Cloruro de potasio	400,00
	Acetato de sodio x 3H₂O	82,95
	Cloruro de sodio	6.800,00
	Dihidrogenofosfato de sodio x H₂O	140,00
Otros componentes	Sulfato de adenina	10,00
	AMP	0,20
	ATP	1,00
	Colesterol	0,20
	2'-Desoxirribosa	0,50
	D(+)-Glucosa anhidra	1,000.00
	Glutatión (red.)	0,05
	Guanina x HCl	0,30
	Hipoxantina	0,30
	Rojo de fenol	10,00
	D-ribosa	0,50
	Timina	0,30
	Tween 80	4,90
	Uracilo	0,30
	Xantina	0,30
	NaHCO₃	2 200,00
Aminoácidos	L-alanina	25,00
	L-arginina x HCl	70,00
	Ácido L-aspártico	30,00
	L-cisteína x HCl x H₂O	0,10
	L-cistina	20,00
	L-glutamina estable	149,00
	Ácido L-glutámico	67,00
	Glicina	50,00
	L-histidina x HCl x H₂O	21,88
	L-hidroxiprolina	10,00
	L-isoleucina	20,00
	L-leucina	60,00
	L-lisina x HCl	70,00
	L-metionina	15,00
	L-fenilalanina	25,00
	L-prolina	40,00
	L-serina	25,00
	L-treonina	30,00
	L-triptófano	10,00
	L-tirosina	40,00
	L-valina	25,00
Vitaminas	Ácido 4-aminobenzoico	0,05
	Ácido ascórbico	0,05
	D(+)-biotina	0,01
	Calciferol	0,10
	Pantotenato de calcio D	0,01
	Cloruro de colina	0,50
	Ácido fólico	0,01
	mio-inositol	0,05
	Menadiona	0,01
	Ácido nicotínico	0,025
	Nicotinamida	0,025
	Piridoxal x HCl	0,025
	Piridoxol x HCl	0,025
	Riboflavina	0,01
	Sal disódica del fosfato de DL-α-tocoferol	0,01
	Tiamina x HCl	0,01
	Acetato de vitamina A	0,14