وسط 199، يحتوي على: 2.7 مليمول/لتر من الجلوتامين المستقر، و2.2 غ/لتر من NaHCO3، وEBSS

يُعد «ميديا 199» وسطًا متعدد الاستخدامات وواسع الانتشار لزراعة الخلايا، وقد تمت صياغته خصيصًا لزراعة العينات الأولية. يجمع هذا الوسط الشامل بين الفيتامينات الأساسية والأحماض الأمينية وعوامل أخرى لتوفير مصدر مغذٍ محدد تمامًا لمجموعة متنوعة من أنواع الخلايا. وهو مناسب بشكل خاص للخلايا غير المُحوَّرة، مما يجعله أداة لا غنى عنها في مجال البحوث البيولوجية.

يوفر الوسط 199 مجموعة واسعة من التطبيقات في هذا المجال. فهو قادر على الحفاظ بفعالية على مركب الكومولوس-البويضة (COC) ودعم نضوج البويضات في المختبر. بالإضافة إلى ذلك، تُستخدم في شطف أنابيب الشفط أثناء جمع البويضات من أبقار هولشتاين الألمانية. وعلاوة على ذلك، تُعد الوسط 199 وسطًا ممتازًا لزراعة الخلايا البطانية القلبية المستمدة من الفئران. وتُظهر هذه التطبيقات تنوع الوسط 199 وقدرته على التكيف مع مختلف الاحتياجات التجريبية.

التاريخ

شكل تطوير الوسط 199 في الخمسينيات من القرن الماضي تقدمًا كبيرًا في مجال أوساط زراعة الأنسجة. قبل ظهوره، كانت العديد من أوساط الزراعة تعتمد على منتجات مشتقة من الحيوانات ومستخلصات الأنسجة. ومع ذلك، أحدث مورغان وزملاؤه ثورة في هذا المجال من خلال صياغة مصدر غذائي محدد تمامًا لزراعة الخلايا. من خلال تجاربهم التي تضمنت تركيبات مختلفة من الفيتامينات والأحماض الأمينية وعوامل أخرى، اكتشفوا الخصائص الاستثنائية للوسط 199 في تعزيز النمو.

مراقبة الجودة

• الرقم الهيدروجيني (pH) = 7.2 ± 0.02 عند درجة حرارة 20-25 درجة مئوية. 
• تم اختبار كل دفعة للتأكد من تعقيمها وخلوها من الميكوبلازما والبكتيريا.

التخزين  

• يُحفظ في الثلاجة في درجة حرارة تتراوح بين +2 و+8 درجات مئوية في مكان مظلم. يؤدي التجميد والتسخين حتى +37 درجة مئوية إلى انخفاض جودة المنتج. 
• لا تقم بتسخين الوسط إلى أكثر من 37 درجة مئوية أو استخدام مصادر حرارة لا يمكن التحكم فيها (مثل أجهزة الميكروويف). 
• إذا كان سيتم استخدام جزء فقط من الوسط، فقم بإخراج هذه الكمية من الزجاجة وقم بتسخينها في درجة حرارة الغرفة.
• مدة الصلاحية لأي وسط باستثناء الوسط الأساسي هي 8 أسابيع من تاريخ التصنيع.

التركيب

	المكونات	ملغ/لتر
الأملاح غير العضوية	كلوريد الكالسيوم × 2H₂O	264,92
	نترات الحديد (III) × 9H₂O	0,72
	كبريتات المغنيسيوم	97,67
	كلوريد البوتاسيوم	400,00
	أسيتات الصوديوم × 3H₂O	82,95
	كلوريد الصوديوم	6,800.00
	ثنائي هيدروجين فوسفات الصوديوم × H₂O	140,00
مكونات أخرى	كبريتات الأدينين	10,00
	AMP	0,20
	ATP	1,00
	الكوليسترول	0,20
	2'-ديوكسيريبوز	0,50
	D(+)-جلوكوز لا مائي	1,000.00
	الجلوتاثيون (المختزل)	0,05
	غوانين × حمض الهيدروكلوريك	0,30
	هيبوكسانثين	0,30
	الفينول الأحمر	10,00
	دي-ريبوز	0,50
	الثيمين	0,30
	توين 80	4,90
	أوراسيل	0,30
	الزانثين	0,30
	NaHCO3	2,200.00
الأحماض الأمينية	L-ألانين	25,00
	L-أرجينين × حمض الهيدروكلوريك	70,00
	حمض L-الأسبارتيك	30,00
	L-سيستين × حمض الهيدروكلوريك × H₂O	0,10
	L-سيستين	20,00
	L-جلوتامين مستقر	149,00
	حمض L-الجلوتاميك	67,00
	الجليسين	50,00
	L-هيستيدين × حمض الهيدروكلوريك × H2O	21,88
	L-هيدروكسيبرولين	10,00
	L-إيزولوسين	20,00
	L-ليوسين	60,00
	L-ليسين × حمض الهيدروكلوريك	70,00
	L-ميثيونين	15,00
	L-فينيل ألانين	25,00
	L-برولين	40,00
	L-سيرين	25,00
	L-ثريونين	30,00
	L-تريبتوفان	10,00
	L-تيروزين	40,00
	L-فالين	25,00
الفيتامينات	حمض 4-أمينوبنزويك	0,05
	حمض الأسكوربيك	0,05
	D(+)-البيوتين	0,01
	كالسيفيرول	0,10
	D-بانتوثينات الكالسيوم	0,01
	كلوريد الكولين	0,50
	حمض الفوليك	0,01
	ميو-إينوزيتول	0,05
	ميناديون	0,01
	حمض النيكوتينيك	0,025
	نيكوتيناميد	0,025
	البيريدوكسال × حمض الهيدروكلوريك	0.025
	بيريدوكسول × حمض الهيدروكلوريك	0.025
	الريبوفلافين	0,01
	ملح ثنائي الصوديوم لفوسفات DL-α-توكوفيرول	0,01
	الثيامين × حمض الهيدروكلوريك	0,01
	أسيتات فيتامين أ	0,14