Medium 199, innehåll: 2,7 mM stabilt glutamin, innehåll: 2,2 g/L NaHCO₃, innehåll: EBSS

Medium 199 är ett mångsidigt och ofta använt cellodlingsmedium som är särskilt framtaget för odling av primära explantat. Detta heltäckande medium kombinerar viktiga vitaminer, aminosyror och andra faktorer för att tillhandahålla en fullständigt definierad näringskälla för en mängd olika celltyper. Det är särskilt lämpligt för icke-transformerade celler, vilket gör det till ett ovärderligt verktyg för biologisk forskning.

Medium 199 erbjuder en rad olika tillämpningar inom området. Det kan effektivt upprätthålla cumulus-oocytkomplexet (COC) och stödja in vitro-mognaden av oocyter. Dessutom används det vid sköljning av aspirationsslangar vid ägguttag från tyska Holstein-kor. Vidare fungerar Medium 199 som ett utmärkt odlingsmedium för hjärtendotelceller från råttor. Dessa tillämpningar visar på Medium 199:s mångsidighet och anpassningsförmåga till olika experimentella behov.

Historia

Utvecklingen av Medium 199 på 1950-talet innebar ett betydande framsteg inom vävnadsodlingsmedier. Innan det introducerades baserades många odlingsmedier på animaliska produkter och vävnadsextrakt. Morgan och hans kollegor revolutionerade dock området genom att ta fram en helt definierad näringskälla för cellodlingar. Genom sina experiment med olika kombinationer av vitaminer, aminosyror och andra faktorer upptäckte de de exceptionella tillväxtfrämjande egenskaperna hos Medium 199.

Kvalitetskontroll

• pH = 7,2 ± 0,02 vid 20–25 °C. 
• Varje sats har testats med avseende på sterilitetskrav samt frånvaro av mykoplasma och bakterier.

Förvaring  

• Förvaras i kylskåp vid +2–8 °C i mörker. Frysning och uppvärmning till +37 °C försämrar produktens kvalitet. 
• Värm inte mediet till mer än 37 °C och använd inte okontrollerade värmekällor (t.ex. mikrovågsugnar). 
• Om endast en del av mediet ska användas, ta ut denna mängd ur flaskan och värm upp den till rumstemperatur.
• Hållbarhetstiden för alla medier, med undantag för basmediet, är 8 veckor från tillverkningsdatum.

Sammansättning

	Beståndsdelar	mg/l
Oorganiska salter	Kalciumklorid x 2H₂O	264,92
	Järn(III)nitrat x 9H₂O	0,72
	Magnesiumsulfat	97,67
	Kaliumklorid	400,00
	Natriumacetat x 3H₂O	82,95
	Natriumklorid	6 800,00
	Natriumdihydrogenfosfat x H₂O	140,00
Övriga beståndsdelar	Adeninsulfat	10,00
	AMP	0,20
	ATP	1,00
	Kolesterol	0,20
	2'-deoxiribos	0,50
	D(+)-glukos, vattenfri	1 000,00
	Glutation (red.)	0,05
	Guanin x HCl	0,30
	Hypoxantin	0,30
	Fenolrött	10,00
	D-ribos	0,50
	Tym	0,30
	Tween 80	4,90
	Uracil	0,30
	Xantin	0,30
	NaHCO₃	2 200,00
Aminosyror	L-alanin	25,00
	L-arginin x HCl	70,00
	L-asparaginsyra	30,00
	L-cystein x HCl x H₂O	0,10
	L-cystin	20,00
	L-glutamin, stabilt	149,00
	L-glutaminsyra	67,00
	Glycin	50,00
	L-histidin x HCl x H₂O	21,88
	L-hydroxiprolin	10,00
	L-isoleucin	20,00
	L-leucin	60,00
	L-lysin x HCl	70,00
	L-metionin	15,00
	L-fenylalanin	25,00
	L-prolin	40,00
	L-serin	25,00
	L-treonin	30,00
	L-tryptofan	10,00
	L-tyrosin	40,00
	L-valin	25,00
Vitaminer	4-aminobensoesyra	0,05
	Askorbinsyra	0,05
	D(+)-biotin	0,01
	Kalciferol	0,10
	D-kalciumpantotenat	0,01
	Kolin klorid	0,50
	Folsyra	0,01
	myo-inositol	0,05
	Menadion	0,01
	Nikotinsyra	0,025
	Nikotinamid	0,025
	Pyridoxal x HCl	0,025
	Pyridoxol x HCl	0,025
	Riboflavin	0,01
	DL-α-tokoferolfosfat, dinatriumsalt	0,01
	Tiamin x HCl	0,01
	Vitamin A-acetat	0,14