Barotne 199, satur: 2,7 mM stabilu glutamīnu, satur: 2,2 g/l NaHCO₃, satur: EBSS

„Medium 199“ ir daudzfunkcionāla un plaši izmantota šūnu kultūras barotne, kas īpaši izstrādāta primāro eksplantātu audzēšanai. Šī visaptverošā barotne apvieno būtiskos vitamīnus, aminoskābes un citus faktorus, nodrošinot pilnībā definētu barības vielu avotu dažādiem šūnu tipiem. Tā ir īpaši piemērota netransformētām šūnām, tādējādi kļūstot par nenovērtējamu palīgu bioloģiskajos pētījumos.

Medium 199 piedāvā plašu pielietojumu šajā jomā. Tas spēj efektīvi uzturēt kumulu-olšūnu kompleksu (COC) un veicināt olšūnu in vitro nobriešanu. Turklāt to izmanto aspirācijas cauruļu skalošanai olšūnu ieguves laikā no Vācijas Holšteinas šķirnes govīm. Bez tam, Medium 199 ir lielisks barotnes līdzeklis no žurkām iegūtu sirds endotēlija šūnu kultivēšanai. Šie pielietojumi liecina par Medium 199 daudzpusību un pielāgojamību dažādām eksperimentālām vajadzībām.

Vēsture

Vides 199 izstrāde 1950. gados iezīmēja nozīmīgu sasniegumu audu kultūru barotņu jomā. Pirms tās ieviešanas daudzas kultūru barotnes balstījās uz dzīvnieku izcelsmes produktiem un audu ekstraktiem. Tomēr Morgan un kolēģi revolucionizēja šo jomu, izstrādājot pilnībā definētu barības avotu šūnu kultūrām. Veicot eksperimentus ar dažādām vitamīnu, aminoskābju un citu faktoru kombinācijām, viņi atklāja Medium 199 izcilās augšanas veicinošās īpašības.

Kvalitātes kontrole

• pH = 7,2 ± 0,02 pie 20–25 °C. 
• Katra partija ir pārbaudīta uz sterilitāti un mikoplazmu un baktēriju neesamību.

Uzglabāšana  

• Uzglabāt ledusskapī +2–+8 °C temperatūrā tumsā. Iesaldēšana un uzsildīšana līdz +37 °C samazina produkta kvalitāti. 
• Nesildiet barotni virs 37 °C un neizmantojiet nekontrolējamos siltuma avotus (piem., mikroviļņu krāsnis). 
• Ja paredzēts izmantot tikai daļu barotnes, izņemiet šo daudzumu no pudeles un uzsildiet to istabas temperatūrā.
• Jebkuras barotnes, izņemot pamatbarotni, glabāšanas termiņš ir 8 nedēļas no ražošanas datuma.

Sastāvs

	Sastāvdaļas	mg/l
Neorganiskie sāļi	Kalcija hlorīds x 2H₂O	264,92
	Dzelzs(III) nitrāts x 9H₂O	0,72
	Magnija sulfāts	97,67
	Kālija hlorīds	400,00
	Nātrija acetāts x 3H₂O	82,95
	Nātrija hlorīds	6 800,00
	Nātrija dihidrogēnfosfāts x H₂O	140,00
Citas sastāvdaļas	Adenīna sulfāts	10,00
	AMP	0,20
	ATP	1,00
	Holesterīns	0,20
	2'-dezoksiriboze	0,50
	D(+)-glikozes bezūdens	1,000.00
	Glutationa (sarkans)	0,05
	Guanīns x HCl	0,30
	Hipoksantīns	0,30
	Fenolsarkans	10,00
	D-riboze	0,50
	Tīmīns	0,30
	Tween 80	4,90
	Uracils	0,30
	Ksantīns	0,30
	NaHCO₃	2 200,00
Aminoskābes	L-alanīns	25,00
	L-arginīns x HCl	70,00
	L-asparagīnskābe	30,00
	L-cisteīns x HCl x H2O	0,10
	L-cistīns	20,00
	L-glutamīns (stabils)	149,00
	L-glutamīnskābe	67,00
	Glicīns	50,00
	L-histidīns x HCl x H₂O	21,88
	L-hidroksiprolīns	10,00
	L-izoleicīns	20,00
	L-leicīns	60,00
	L-lizīns x HCl	70,00
	L-metionīns	15,00
	L-fenilalanīns	25,00
	L-prolīns	40,00
	L-serīns	25,00
	L-treonīns	30,00
	L-triptofāns	10,00
	L-tirozīns	40,00
	L-valīns	25,00
Vitamīni	4-aminobenzojskābe	0,05
	Askorbīnskābe	0,05
	D(+)-biotīns	0,01
	Kalciferols	0,10
	D-kalcija pantotenāts	0,01
	Holīna hlorīds	0,50
	Folijskābe	0,01
	mio-inozitols	0,05
	Menadions	0,01
	Nikotīnskābe	0,025
	Nikotinamīds	0,025
	Piridoksāls x HCl	0,025
	Piridoksols x HCl	0,025
	Riboflavīns	0,01
	DL-α-tokoferola fosfāta dinātrija sāls	0,01
	Tiamīns x HCl	0,01
	A vitamīna acetāts	0,14