Meio 199, p: 2,7 mM de glutamina estável, p: 2,2 g/L de NaHCO₃, p: EBSS

O Medium 199 é um meio de cultura celular versátil e amplamente utilizado, especialmente formulado para o cultivo de explantes primários. Este meio completo combina vitaminas essenciais, aminoácidos e outros fatores para proporcionar uma fonte de nutrientes totalmente definida para uma variedade de tipos de células. É particularmente adequado para células não transformadas, o que o torna uma ferramenta inestimável para a investigação biológica.

O Meio 199 oferece uma vasta gama de aplicações neste campo. É capaz de manter eficazmente o complexo cumulus-oócito (COC) e de apoiar a maturação in vitro dos oócitos. Além disso, é utilizado na lavagem das linhas de aspiração durante a recolha de óvulos de vacas da raça Holstein alemã. Por outro lado, o Meio 199 constitui um excelente meio para a cultura de células endoteliais cardíacas derivadas de ratos. Estas aplicações demonstram a versatilidade e a adaptabilidade do Meio 199 a diversas necessidades experimentais.

História

O desenvolvimento do Meio 199 na década de 1950 marcou um avanço significativo nos meios de cultura de tecidos. Antes da sua introdução, muitos meios de cultura dependiam de produtos de origem animal e de extratos de tecidos. No entanto, Morgan e os seus colegas revolucionaram a área ao formularem uma fonte nutricional completamente definida para culturas celulares. Através das suas experiências envolvendo diferentes combinações de vitaminas, aminoácidos e outros fatores, descobriram as excecionais propriedades promotoras do crescimento do Meio 199.

Controlo de qualidade

• pH = 7,2 ± 0,02 a 20-25 °C. 
• Cada lote foi testado quanto à esterilidade e à ausência de micoplasmas e bactérias.

Conservação  

• Manter refrigerado a +2 °C a +8 °C, ao abrigo da luz. O congelamento e o aquecimento até +37 °C prejudicam a qualidade do produto. 
• Não aqueça o meio a mais de 37 °C nem utilize fontes de calor incontroláveis (por exemplo, micro-ondas). 
• Se apenas uma parte do meio for utilizada, retire essa quantidade do frasco e aqueça-a à temperatura ambiente.
• O prazo de validade de qualquer meio, exceto o meio básico, é de 8 semanas a partir da data de fabrico.

Composição

	Componentes	mg/L
Sais inorgânicos	Cloreto de cálcio x 2H₂O	264,92
	Nitrato de ferro (III) x 9H₂O	0,72
	Sulfato de magnésio	97,67
	Cloreto de potássio	400,00
	Acetato de sódio x 3H₂O	82,95
	Cloreto de sódio	6 800,00
	Dihidrogenofosfato de sódio x H₂O	140,00
Outros componentes	Sulfato de adenina	10,00
	AMP	0,20
	ATP	1,00
	Colesterol	0,20
	2'-Desoxirribose	0,50
	D(+)-Glicose anidra	1 000,00
	Glutationa (red.)	0,05
	Guanina x HCl	0,30
	Hipoxantina	0,30
	Vermelho de fenol	10,00
	D-ribose	0,50
	Timina	0,30
	Tween 80	4,90
	Uracilo	0,30
	Xantina	0,30
	NaHCO₃	2 200,00
Aminoácidos	L-alanina	25,00
	L-arginina x HCl	70,00
	Ácido L-aspártico	30,00
	L-cisteína x HCl x H₂O	0,10
	L-cistina	20,00
	L-glutamina estável	149,00
	Ácido L-glutâmico	67,00
	Glicina	50,00
	L-histidina x HCl x H₂O	21,88
	L-hidroxiprolina	10,00
	L-isoleucina	20,00
	L-leucina	60,00
	L-Lisina x HCl	70,00
	L-metionina	15,00
	L-fenilalanina	25,00
	L-prolina	40,00
	L-serina	25,00
	L-treonina	30,00
	L-triptofano	10,00
	L-tirosina	40,00
	L-valina	25,00
Vitaminas	Ácido 4-aminobenzóico	0,05
	Ácido ascórbico	0,05
	D(+)-biotina	0,01
	Calciferol	0,10
	Pantotenato de cálcio D	0,01
	Cloreto de colina	0,50
	Ácido fólico	0,01
	mio-inositol	0,05
	Menadiona	0,01
	Ácido nicotínico	0,025
	Nicotinamida	0,025
	Piridoxal x HCl	0,025
	Piridoxol x HCl	0,025
	Riboflavina	0,01
	Sal dissódico do fosfato de DL-α-tocoferol	0,01
	Tiamina x HCl	0,01
	Acetato de vitamina A	0,14