Médium 199, obsah: 2,7 mM stabilního glutaminu, obsah: 2,2 g/l NaHCO₃, obsah: EBSS

Medium 199 je univerzální a široce používané kultivační médium, které bylo speciálně vyvinuto pro kultivaci primárních explantátů. Toto komplexní médium kombinuje esenciální vitamíny, aminokyseliny a další faktory, čímž poskytuje plně definovaný zdroj živin pro celou řadu buněčných typů. Je zvláště vhodné pro netransformované buňky, což z něj činí neocenitelný nástroj pro biologický výzkum.

Medium 199 nabízí v této oblasti široké spektrum použití. Dokáže účinně udržovat komplex cumulus-oocyt (COC) a podporovat in vitro zrání oocytů. Kromě toho se používá k proplachování aspiračních hadiček při odběru vajíček od krav plemene German Holstein. Médium 199 navíc slouží jako vynikající médium pro kultivaci srdečních endoteliálních buněk odvozených od potkanů. Tyto aplikace dokládají všestrannost a přizpůsobivost média 199 různým experimentálním potřebám.

Historie

Vývoj média 199 v 50. letech minulého století znamenal významný pokrok v oblasti tkáňových kultivačních médií. Před jeho zavedením se mnoho kultivačních médií opíralo o produkty živočišného původu a tkáňové extrakty. Morgan a jeho kolegové však v této oblasti způsobili revoluci tím, že vyvinuli zcela definovaný zdroj živin pro buněčné kultury. Prostřednictvím experimentů zahrnujících různé kombinace vitamínů, aminokyselin a dalších faktorů objevili výjimečné vlastnosti média 199 podporující růst.

Kontrola kvality

• pH = 7,2 ± 0,02 při teplotě 20–25 °C. 
• Každá šarže byla testována na sterilitu a nepřítomnost mykoplazmat a bakterií.

Skladování  

• Skladujte v chladničce při teplotě +2 °C až +8 °C na tmavém místě. Zmrazení a ohřátí na teplotu vyšší než +37 °C snižují kvalitu produktu. 
• Nezahřívejte médium na teplotu vyšší než 37 °C a nepoužívejte nekontrolovatelné zdroje tepla (např. mikrovlnné trouby). 
• Pokud se má použít pouze část média, odeberte toto množství z láhve a ohřejte jej na pokojovou teplotu.
• Doba použitelnosti všech médií s výjimkou základního média je 8 týdnů od data výroby.

Složení

	Složky	mg/l
Anorganické soli	Chlorid vápenatý x 2H₂O	264,92
	Dusičnan železnatý (III) x 9H₂O	0,72
	Síran hořečnatý	97,67
	Chlorid draselný	400,00
	Acetát sodný x 3H₂O	82,95
	Chlorid sodný	6 800,00
	Dihydrogenfosforečnan sodný x H₂O	140,00
Ostatní složky	Síran adeninu	10,00
	AMP	0,20
	ATP	1,00
	Cholesterol	0,20
	2‘-deoxyribóza	0,50
	D(+)-glukóza bezvodá	1 000,00
	Glutathion (červený)	0,05
	Guanin x HCl	0,30
	Hypoxantin	0,30
	Fenolová červeň	10,00
	D-ribóza	0,50
	Tymin	0,30
	Tween 80	4,90
	Uracil	0,30
	Xantin	0,30
	NaHCO₃	2 200,00
Aminokyseliny	L-alanin	25,00
	L-arginin x HCl	70,00
	Kyselina L-asparagová	30,00
	L-cystein x HCl x H₂O	0,10
	L-cystin	20,00
	L-glutamin stabilní	149,00
	Kyselina L-glutamová	67,00
	Glycin	50,00
	L-histidin x HCl x H₂O	21,88
	L-hydroxyprolin	10,00
	L-isoleucin	20,00
	L-leucin	60,00
	L-lysin x HCl	70,00
	L-methionin	15,00
	L-fenylalanin	25,00
	L-prolin	40,00
	L-serin	25,00
	L-threonin	30,00
	L-tryptofan	10,00
	L-tyrosin	40,00
	L-valin	25,00
Vitamíny	Kyselina 4-aminobenzoová	0,05
	Kyselina askorbová	0,05
	D(+)-biotin	0,01
	Kalciferol	0,10
	D-pantothenát vápenatý	0,01
	Cholin chlorid	0,50
	Kyselina listová	0,01
	myo-inositol	0,05
	Menadion	0,01
	Kyselina nikotinová	0,025
	Nikotinamid	0,025
	Pyridoxal x HCl	0,025
	Pyridoxol x HCl	0,025
	Riboflavin	0,01
	DL-α-tokoferolfosfát, sodná sůl	0,01
	Thiamin x HCl	0,01
	Vitamín A acetát	0,14