Terreno di coltura 199, con: 2,7 mM di glutammina stabile, con: 2,2 g/L di NaHCO₃, con: EBSS

Il Medium 199 è un terreno di coltura cellulare versatile e ampiamente utilizzato, appositamente formulato per la coltura di espianti primari. Questo terreno completo combina vitamine essenziali, aminoacidi e altri fattori per fornire una fonte nutritiva completamente definita per una varietà di tipi cellulari. È particolarmente indicato per le cellule non trasformate, il che lo rende uno strumento prezioso per la ricerca biologica.

Il Medium 199 offre una vasta gamma di applicazioni sul campo. È in grado di mantenere efficacemente il complesso cumulo-ovocitario (COC) e di favorire la maturazione in vitro degli ovociti. Inoltre, viene impiegato per il risciacquo delle linee di aspirazione durante la raccolta degli ovociti da vacche di razza Holstein tedesca. Il Medium 199 costituisce inoltre un eccellente terreno di coltura per le cellule endoteliali cardiache derivate dai ratti. Queste applicazioni dimostrano la versatilità e l’adattabilità del Medium 199 alle diverse esigenze sperimentali.

Storia

Lo sviluppo del Medium 199 negli anni ’50 ha segnato un significativo progresso nel campo dei terreni di coltura tissutale. Prima della sua introduzione, molti terreni di coltura si basavano su prodotti di origine animale ed estratti tissutali. Tuttavia, Morgan e i suoi colleghi hanno rivoluzionato il settore formulando una fonte nutrizionale completamente definita per le colture cellulari. Attraverso i loro esperimenti, che prevedevano diverse combinazioni di vitamine, aminoacidi e altri fattori, scoprirono le eccezionali proprietà di promozione della crescita del Medium 199.

Controllo di qualità

• pH = 7,2 ± 0,02 a 20-25 °C. 
• Ogni lotto è stato testato per verificarne la sterilità e l’assenza di micoplasmi e batteri.

Conservazione  

• Conservare in frigorifero a una temperatura compresa tra +2 °C e +8 °C al riparo dalla luce. Il congelamento e il riscaldamento fino a +37 °C compromettono la qualità del prodotto. 
• Non riscaldare il terreno oltre i 37 °C né utilizzare fonti di calore non controllabili (ad es. forni a microonde). 
• Se si intende utilizzare solo una parte del terreno, prelevare tale quantità dal flacone e portarla a temperatura ambiente.
• La durata di conservazione di tutti i terreni, ad eccezione del terreno di base, è di 8 settimane dalla data di produzione.

Composizione

	Componenti	mg/L
Sali inorganici	Cloruro di calcio x 2H₂O	264,92
	Nitrato di ferro (III) x 9H₂O	0,72
	Solfato di magnesio	97,67
	Cloruro di potassio	400,00
	Acetato di sodio x 3H₂O	82,95
	Cloruro di sodio	6.800,00
	Dihidrogenofosfato di sodio x H₂O	140,00
Altri componenti	Solfato di adenina	10,00
	AMP	0,20
	ATP	1,00
	Colesterolo	0,20
	2'-Desossiribosio	0,50
	D(+)-Glucosio anidro	1.000,00
	Glutatione (rid.)	0,05
	Guanina x HCl	0,30
	Ipoxantina	0,30
	Rosso fenolo	10,00
	D-ribosio	0,50
	Timina	0,30
	Tween 80	4,90
	Uracile	0,30
	Xantina	0,30
	NaHCO₃	2.200,00
Aminoacidi	L-alanina	25,00
	L-arginina x HCl	70,00
	Acido L-aspartico	30,00
	L-cisteina x HCl x H₂O	0,10
	L-cistina	20,00
	L-glutammina stabile	149,00
	Acido L-glutammico	67,00
	Glicina	50,00
	L-istidina x HCl x H₂O	21,88
	L-idrossiprolina	10,00
	L-isoleucina	20,00
	L-leucina	60,00
	L-lisina x HCl	70,00
	L-metionina	15,00
	L-fenilalanina	25,00
	L-prolina	40,00
	L-serina	25,00
	L-treonina	30,00
	L-triptofano	10,00
	L-tirosina	40,00
	L-valina	25,00
Vitamine	Acido 4-amminobenzoico	0,05
	Acido ascorbico	0,05
	D(+)-biotina	0,01
	Calciferolo	0,10
	D-pantotenato di calcio	0,01
	Cloruro di colina	0,50
	Acido folico	0,01
	mio-inositolo	0,05
	Menadione	0,01
	Acido nicotinico	0,025
	Nicotinamide	0,025
	Piridossale x HCl	0,025
	Piridossolo x HCl	0,025
	Riboflavina	0,01
	DL-α-tocoferolo fosfato, sale disodico	0,01
	Tiamina x HCl	0,01
	Acetato di vitamina A	0,14