Protegga le Sue colture dalla contaminazione nascosta
I micoplasmi sono piccoli organismi procarioti, troppo piccoli per essere visibili al microscopio e non eliminabili con i comuni antibiotici. Possono influenzare la crescita, la proliferazione e la morfologia delle linee cellulari, portando a risultati sperimentali non affidabili.
Circa dal 15 al 35 % delle linee cellulari continue è contaminato da micoplasma1,2. Si raccomanda pertanto un controllo frequente per garantire un ambiente privo di micoplasma.
Due opzioni di test
Cytion offre sia test a breve termine sia test a lungo termine
Metodi di analisi
Saggio reporter colorimetrico
Questo test è un saggio colorimetrico basato su cellule. In presenza di micoplasma, una linea cellulare reporter innesca una cascata di segnalazione che cambia il colore del terreno da rosso a blu. Il saggio viene eseguito in piastre 96-well e letto in uno spettrofotometro per micropiastre a 620-655 nm. Vengono rilevate tutte le specie di micoplasma e acholeplasma, nonché altri contaminanti batterici nella coltura cellulare.
Amplificazione isotermica
Un test rapido e affidabile basato sull'amplificazione isotermica di DNA specifico per micoplasma con rilevamento in tempo reale mediante un colorante intercalante del DNA. Rileva le sei specie più comuni, che rappresentano oltre il 95 % delle contaminazioni: M. orale, M. hyorhinis, M. arginini, M. fermentans, M. hominis e A. laidlawii. A causa dell'omologia di sequenza, vengono rilevate anche altre specie (M. pneumoniae, M. gallisepticum e M. synoviae). I campioni positivi e negativi si distinguono in base alla temperatura di melting (Tm).
Campioni
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- Uphoff CC, Drexler HG. Comparative PCR analysis for detection of mycoplasma infections in continuous cell lines. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2002;38(2):79–85. doi:10.1290/1071-2690(2002)038<0079:CPAFDO>2.0.CO;2
- Drexler HG, Uphoff CC. Mycoplasma contamination of cell cultures: incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention. Cytotechnology. 2002;39(2):75–90. doi:10.1023/A:1022913015916

