Siirry sisältöön

Mykoplasmatestaus

Mykoplasmakontaminaation luotettava havaitseminen

Suojelkaa viljelmiänne piilevältä kontaminaatiolta

Mykoplasmat ovat pieniä prokaryoottisia organismeja, jotka ovat liian pieniä nähtäväksi mikroskoopissa eikä niitä voida poistaa tavallisilla antibiooteilla. Ne voivat vaikuttaa solulinjojen kasvuun, lisääntymiseen ja morfologiaan, mikä voi johtaa epäluotettaviin koetuloksiin.

Noin 15–35 % jatkuvista solulinjoista on mykoplasman saastuttamia1,2. Siksi suositellaan säännöllistä valvontaa mykoplasmavapaan ympäristön takaamiseksi.

Cell culture work in the Cytion laboratory

Kaksi testausvaihtoehtoa

Cytion tarjoaa sekä lyhyt- että pitkäaikaista testausta

Nopea mykoplasmatesti
Lyhytaikainen testi. Näytteenne testataan välittömästi saapumisen jälkeen
Premium-mykoplasmatesti
Pitkäaikainen testi. Soluviljelmä aloitetaan ja solut testataan 14 päivän antibiootittoman viljelyn jälkeen

Analyysimenetelmät

Kolorimetrinen reportterimääritys

Tämä testi on soluperustainen kolorimetrinen määritys. Mykoplasman läsnä ollessa reportterisolulinja käynnistää signalointikaskadin, joka muuttaa kasvatusliuoksen värin punaisesta siniseksi. Määritys tehdään 96-well-levyillä ja luetaan mikrolevyspektrofotometrillä 620–655 nm:n kohdalla. Kaikki mykoplasma- ja akoleplasmalajit havaitaan, samoin kuin muut bakteeriperäiset epäpuhtaudet soluviljelmässä.

Isoterminen amplifikaatio

Nopea ja luotettava testi, joka perustuu mykoplasmaspesifisen DNA:n isotermiseen amplifikaatioon ja reaaliaikaiseen havaitsemiseen DNA:han kiinnittyvän väriaineen avulla. Se havaitsee kuusi yleisintä lajia, jotka muodostavat yli 95 % kontaminaatioista: M. orale, M. hyorhinis, M. arginini, M. fermentans, M. hominis ja A. laidlawii. Sekvenssihomologian vuoksi havaitaan myös muita lajeja (M. pneumoniae, M. gallisepticum ja M. synoviae). Positiiviset ja negatiiviset näytteet erotetaan sulamislämpötilan (Tm) perusteella.

Näytteet

Nopea testi
Vähintään 50 µl solususpensiota, joka sisältää 50,000 solua. Suspensio voidaan lähettää ympäristön lämpötilassa
Premium-testi
Vähintään 1 miljoona solua sopivassa pakastusliuoksessa vankan ja terveen viljelmän varmistamiseksi. Lähettäkää näytteet kuivajäällä

Täyttäkää mykoplasmatestauksen näytelomake ja liittäkää se näytelähetyksenne mukaan.

Ladatkaa näytelomake

Konsultaatiopyyntö

Kertokaa meille projektistanne

Ensimmäiseen vaiheeseen riittää muutama tieto. Tieteellinen tiimimme tarkastelee pyyntöänne ja ottaa teihin yhteyttä.

Jannes Steinmann
YHTEYSHENKILÖNNE
Jannes Steinmann
Solubiologian johtaja
Konsultaatiopyyntö
LÄHTEET
  1. Uphoff CC, Drexler HG. Comparative PCR analysis for detection of mycoplasma infections in continuous cell lines. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2002;38(2):79–85. doi:10.1290/1071-2690(2002)038<0079:CPAFDO>2.0.CO;2
  2. Drexler HG, Uphoff CC. Mycoplasma contamination of cell cultures: incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention. Cytotechnology. 2002;39(2):75–90. doi:10.1023/A:1022913015916