Proteja as suas culturas contra a contaminação oculta
Os micoplasmas são pequenos organismos procariotas, demasiado pequenos para serem visíveis ao microscópio e que não podem ser eliminados pelos antibióticos comuns. Podem afetar o crescimento, a proliferação e a morfologia das linhas celulares, o que pode conduzir a resultados experimentais pouco fiáveis.
Aproximadamente 15 a 35 % das linhas celulares contínuas estão contaminadas com micoplasma1,2. Recomenda-se, por isso, um controlo frequente para garantir um ambiente livre de micoplasma.
Duas opções de teste
A Cytion oferece testes de curto e de longo prazo
Métodos de análise
Ensaio colorimétrico de repórter
Este teste é um ensaio colorimétrico baseado em células. Na presença de micoplasma, uma linha celular repórter induz uma cascata de sinalização que altera a cor do meio de vermelho para azul. O ensaio é realizado em placas de 96-well e lido num espetrofotómetro de microplacas a 620 a 655 nm. São detetadas todas as espécies de micoplasma e acholeplasma, bem como outros contaminantes bacterianos em cultura celular.
Amplificação isotérmica
Um teste rápido e fiável baseado na amplificação isotérmica de DNA específico de micoplasma, com deteção em tempo real através de um corante intercalante de DNA. Deteta as seis espécies mais comuns, responsáveis por mais de 95 % das contaminações: M. orale, M. hyorhinis, M. arginini, M. fermentans, M. hominis e A. laidlawii. Devido à homologia de sequência, são também detetadas outras espécies (M. pneumoniae, M. gallisepticum e M. synoviae). As amostras positivas e negativas são distinguidas pela temperatura de fusão (Tm).
Amostras
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- Uphoff CC, Drexler HG. Comparative PCR analysis for detection of mycoplasma infections in continuous cell lines. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2002;38(2):79–85. doi:10.1290/1071-2690(2002)038<0079:CPAFDO>2.0.CO;2
- Drexler HG, Uphoff CC. Mycoplasma contamination of cell cultures: incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention. Cytotechnology. 2002;39(2):75–90. doi:10.1023/A:1022913015916

