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Meios e reagentes

40 produtos

Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

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Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€310.00

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Cytion Endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850006

Meio de Cultivo Avançado para Células Endoteliais

O Meio Avançado de Crescimento de Células Endoteliais é utilizado para a cultura de células endoteliais humanas provenientes de vasos de grande calibre. Fatores de crescimento recombinantes humanos definidos, incluindo VEGF e IGF-1 Long R3, substituem o suplemento bruto de crescimento de células endoteliais. O meio completo contém soro fetal de vitelo, L-glutamina, heparina, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, ácido ascórbico e hidrocortisona. Para uma expansão mais rápida com um teor de soro mais elevado, opte pelo Meio de Proliferação de Células Endoteliais. Para uma formulação sem VEGF, opte pelo Meio de Crescimento de Células Endoteliais. Oferecemos o meio na forma de 500 ml de meio basal, isoladamente ou em conjunto com os suplementos, quer como componentes individuais, quer como uma mistura pré-misturada (Supplement-Mix). Os componentes individuais permitem ajustar ou omitir fatores específicos, enquanto a mistura de suplementos é adicionada numa única etapa. O meio basal também está disponível sem vermelho de fenol nos mesmos formatos, o que evita interferências com leituras por fluorescência e colorimétricas, bem como a fraca atividade semelhante à do estrogénio do vermelho de fenol. Os suplementos são necessários para a utilização, e ambos os formatos de suplemento também estão disponíveis separadamente. Uma vez suplementado, o meio completo contém 2 % de FCS (10 ml por 500 ml de meio basal).

€180.00

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Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850019

Meio de Cultivo Avançado para Células Endoteliais Microvasculares

O Meio Avançado de Crescimento de Células Endoteliais Microvasculares é utilizado para a cultura de células endoteliais microvasculares humanas, por exemplo, provenientes da derme, do pulmão ou do coração. Os fatores de crescimento recombinantes humanos definidos substituem o suplemento bruto de crescimento de células endoteliais. O meio completo contém soro fetal de vitelo, L-glutamina, EGF, bFGF, VEGF, Long R3 IGF-1, ácido ascórbico e hidrocortisona. Para uma formulação com ECGS/H e sem VEGF, opte pelo Meio de Crescimento de Células Endoteliais Microvasculares. Oferecemos o meio na forma de 500 ml de meio basal, isoladamente ou em conjunto com os suplementos, quer como componentes individuais, quer como uma mistura pré-misturada de suplementos (Supplement-Mix). Os componentes individuais permitem ajustar ou omitir fatores específicos, enquanto a mistura de suplementos (Supplement-Mix) é adicionada numa única etapa. O meio basal também está disponível sem vermelho de fenol nos mesmos formatos, o que evita interferências com leituras de fluorescência e colorimétricas, bem como a fraca atividade semelhante à do estrogénio do vermelho de fenol. São necessários suplementos para a utilização, e ambos os formatos de suplementos também estão disponíveis separadamente. Uma vez suplementado, o meio completo contém 5 % de FCS (25 ml por cada 500 ml de meio basal).

€200.00

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Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

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DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p/v: 0,5 mM de piruvato de sódio, p/v: 1,2 g/L de NaHCO₃

O DMEM:Ham's F12 é um meio basal amplamente reconhecido e extensivamente utilizado em cultura celular para investigação biológica. Serve como fonte fundamental de nutrientes para o crescimento de várias linhas celulares de mamíferos, particularmente quando suplementado com soro fetal bovino (FBS). Esta formulação única combina o Meio Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) e o Ham's F-12 (Mistura de Nutrientes F-12 de Ham) numa proporção precisa de 1:1. A adição de L-glutamina melhora ainda mais a sua composição. O DMEM, derivado do Meio Essencial Mínimo de Eagle (EMEM), oferece uma concentração mais elevada de aminoácidos e vitaminas em comparação com o seu antecessor. Em contrapartida, o Ham’s F-12 baseia-se no meio Ham’s F-10, fornecendo um conjunto complementar de componentes essenciais. Para apoiar o crescimento celular ideal, é prática comum suplementar o DMEM:Ham's F-12 com soro fetal bovino (FBS) a uma concentração típica de 5 a 10%. Esta adição é necessária, uma vez que o meio carece de hormonas de crescimento, lípidos e proteínas cruciais para o desenvolvimento celular. O DMEM:Ham's F12 incorpora um sistema tampão de pH e é frequentemente suplementado com vermelho de fenol, um indicador de pH. As células cultivadas em DMEM:Ham's F12, ou em qualquer meio que utilize o sistema tampão de bicarbonato, requerem um ambiente com CO₂ controlado entre 5 % e 10 % para manter níveis de pH adequados. Controlo de Qualidade • Filtrado esterilizado Armazenamento e prazo de validade • Armazenar a +2 °C a +8 °C, protegido da luz. • Após a abertura, conservar a 4 °C e utilizar no prazo de 6 a 8 semanas. Condições de envio • Temperatura ambiente Manutenção • Manter refrigerado a uma temperatura entre +2 °C e +8 °C, ao abrigo da luz. Evitar o congelamento e o aquecimento frequente até +37 °C, uma vez que isso reduz a qualidade do produto. • Não aqueça o meio para além de 37 °C nem utilize fontes de calor não controladas, tais como micro-ondas. • Se apenas for utilizada uma parte do meio, retire a quantidade necessária e aqueça-a até à temperatura ambiente antes de a utilizar. Composição Categoria Componentes Concentração (mg/L) Aminoácidos Glicina 18,75 L-alanina 4,45 L-arginina HCl 147,50 L-asparagina H₂O 7,50 Ácido L-aspártico 6,65 L-cisteína HCl H₂O 17,56 L-cistina 2 HCl 31,29 Ácido L-glutâmico 7,35 L-glutamina 365,00 HCl de L-histidina H₂O 31,48 L-isoleucina 54,47 L-Leucina 59,05 L-lisina HCl 91,25 L-metionina 17,24 L-fenilalanina 35,48 L-prolina 17,25 L-serina 26,25 L-treonina 53,45 L-triptofano 9,02 L-tirosina 2 Na 2 H₂O 55,79 L-valina 52,85 Vitaminas D-biotina 0,0035 Cloreto de colina 8,98 Pantotenato de cálcio D 2,24 Ácido fólico 2,66 mio-inositol 12,60 Nicotinamida 2,02 Cloridrato de piridoxina 0,031 Cloridrato de piridoxal 2,00 Riboflavina 0,219 Cloridrato de tiamina 2,17 Vitamina B12 0,68 Sais inorgânicos CaCl₂·2 H₂O 154,50 CuSO₄·5H₂O 0,0013 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,05 FeSO₄ 7 H₂O 0,417 KCl 311,80 MgCl₂ 6 H₂O 61,20 MgSO₄ 7 H₂O 100,00 NaCl 6996,00 NaHCO₃ 1200,00 Na₂HPO₄ 71,02 NaH₂PO₄·2 H₂O 70,87 ZnSO₄ 7 H₂O 0,432 Outros componentes D-Glicose 3151,00 Hipoxantina 2,40 HEPES 3574,50 Ácido linoleico 0,042 Ácido lipóico 0,105 Sal de sódio do vermelho de fenol 8,63 Putrescina 2 HCl 0,081 Piruvato de sódio 55,00 Timidina 0,365

€25.00

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DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio

O DMEM (Meio de Eagle Modificado por Dulbecco) é um meio basal altamente versátil e amplamente utilizado, concebido para apoiar o crescimento de uma vasta gama de células de mamíferos na investigação biológica. Serve como meio ideal para a cultura de fibroblastos primários, neurónios, células gliais, HUVECs, células musculares lisas, bem como de linhas celulares populares como HeLa, 293, Cos-7 e PC-12. O que distingue o DMEM de outros meios é a sua composição única. Contém uma concentração de aminoácidos e vitaminas quatro vezes superior à do Meio Essencial Mínimo de Eagle original. Inicialmente desenvolvido com baixo teor de glicose (1 g/L) e piruvato de sódio, o DMEM é frequentemente utilizado com níveis mais elevados de glicose, com ou sem piruvato de sódio. É de salientar que o DMEM não contém proteínas, lípidos nem fatores de crescimento, o que torna necessária a sua suplementação. Para alcançar um crescimento ideal, uma abordagem comum consiste em suplementar o DMEM com 10% de soro fetal bovino (FBS). Além disso, o DMEM utiliza um sistema tampão de bicarbonato de sódio, exigindo um ambiente com 5-10% de CO₂ para manter um pH fisiológico. O Meio Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) é altamente considerado entre os meios definidos para cultura celular e tecidular, atendendo às necessidades de crescimento de vários fenótipos de células aderentes. Este meio supera o Meio de Eagle original, desenvolvido na década de 1950 para o cultivo de células de galinha, graças à formulação suplementar melhorada conhecida como modificação de Dulbecco. Esta modificação aumenta significativamente o teor de determinados aminoácidos e vitaminas, podendo chegar a quadruplicá-lo em comparação com o meio original. No campo da cultura celular, o DMEM desempenha um papel vital como meio de crescimento para diferentes tipos de células, incluindo células primárias, células estaminais e células transformadas. Os investigadores também utilizam a versão modificada do DMEM para uma vasta gama de aplicações de investigação, tais como a descoberta de fármacos, a engenharia de tecidos e o estudo das vias de sinalização celular. Controlo de Qualidade • Filtrado esterilizado Armazenamento e prazo de validade • Armazenar a +2 °C a +8 °C, protegido da luz. • Após a abertura, conservar a 4 °C e utilizar no prazo de 6 a 8 semanas. Condições de envio • Temperatura ambiente Manutenção • Manter refrigerado entre +2 °C e +8 °C, ao escuro. Evitar o congelamento e o aquecimento frequente até +37 °C, uma vez que isso reduz a qualidade do produto. • Não aqueça o meio para além de 37 °C nem utilize fontes de calor não controladas, tais como micro-ondas. • Se apenas for utilizada uma parte do meio, retire a quantidade necessária e aqueça-a até à temperatura ambiente antes de a utilizar. Composição Categoria Componentes Concentração (mg/L) Aminoácidos Glicina 30,00 HCl de L-arginina 84,00 L-cistina 2 HCl 62,57 L-glutamina 584,00 L-histidina HCl H₂O 42,00 L-isoleucina 105,00 L-Leucina 105,00 L-lisina HCl 146,00 L-metionina 30,00 L-fenilalanina 66,00 L-serina 42,00 L-treonina 95,00 L-triptofano 16,00 L-tirosina 2 Na 2H₂O 103,79 L-valina 94,00 Vitaminas Cloreto de colina 4,00 Pantotenato de cálcio D 4,00 Ácido fólico 4,00 mio-inositol 7,20 Nicotinamida 4,00 Cloridrato de piridoxal 4,00 Riboflavina 0,40 Cloridrato de tiamina 4,00 Sais inorgânicos CaCl₂·2 H₂O 265,00 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,10 KCl 400,00 MgSO₄ 7H₂O 200,10 NaCl 6400,00 NaHCO₃ 3700,00 NaH₂PO₄·2H₂O 141,73 Outros componentes D-glicose 4500,00 Sal de sódio do vermelho de fenol 15,90 Piruvato de sódio 110,00

€25.00

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EMEM (MEM Eagle), p.p.: 2 mM de L-glutamina, p.p.: 2,2 g/L de NaHCO₃, p.p.: EBSS

O Meio Mínimo Essencial de Eagle (EMEM) é um dos meios basais mais utilizados para o cultivo de uma vasta gama de células de mamíferos, nomeadamente linhas celulares aderentes. Originalmente desenvolvida por Harry Eagle, esta formulação clássica contém os aminoácidos essenciais, as vitaminas e os sais inorgânicos necessários para apoiar o crescimento tanto de células primárias como de linhas celulares estabelecidas em condições de cultura padrão. Esta formulação líquida, pronta a utilizar e filtrada esterilmente, é suplementada com a Solução Salina Equilibrada de Earle (EBSS), 2 mM de L-glutamina, D-glicose (1,0 g/L) e 2,2 g/L de bicarbonato de sódio (NaHCO₃), tornando-a adequada para utilização numa atmosfera de incubadora com controlo de CO₂ (normalmente 5 % de CO₂). O vermelho de fenol incluído atua como indicador de pH, permitindo uma monitorização visual conveniente do estado do meio durante a cultura celular. Características principais • Formulação clássica do MEM de Eagle com Solução Salina Equilibrada de Earle (EBSS) • 2 mM de L-glutamina incluída – pronto a utilizar • 2,2 g/L de bicarbonato de sódio – tamponado para incubação com 5 % de CO₂ • Com D-glicose (1,0 g/L) como fonte primária de carbono • Com vermelho de fenol como indicador de pH • Sem HEPES e sem piruvato de sódio • Meio líquido filtrado esterilizado, pronto a utilizar • pH 7,0 – 7,6 Aplicações típicas O EMEM permite o cultivo de uma ampla variedade de linhas celulares de mamíferos, incluindo HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 e muitas células primárias. As aplicações mais comuns incluem: • Manutenção e expansão de rotina de linhas celulares aderentes • Fluxos de trabalho de propagação de vírus e produção de vacinas • Aplicações de citotoxicidade e bioensaios • Estudos de transfecção e expressão proteica • Investigação fundamental em biologia celular e biologia molecular Para um crescimento celular ideal, o EMEM é normalmente suplementado com 5–10 % de soro fetal bovino (FBS) e, dependendo da linha celular, com aminoácidos não essenciais (NEAA) e antibióticos, tais como penicilina/estreptomicina. Manuseamento e armazenamento Armazene o frasco fechado a uma temperatura entre +2 °C e +8 °C, protegido da luz. Após a abertura, utilize em condições assépticas. A L-glutamina em solução está sujeita a uma degradação gradual — recomendamos utilizar o meio no prazo de 4 semanas após a abertura para obter o melhor desempenho, ou suplementá-lo com L-glutamina fresca antes da utilização, caso seja armazenado por períodos mais longos. Deixe o meio aquecer até 37 °C antes de o adicionar às células. Qualidade Fabricado de acordo com rigorosos padrões de qualidade. Cada lote é testado quanto à esterilidade, pH, osmolalidade e níveis de endotoxinas, para garantir um desempenho consistente em aplicações de cultura celular. Especificações do produto Especificação Detalhe Tipo de produtoMEM Categoria do produtoMeios de cultura celular FormatoLíquido EstérilSim Tamanho500 ml L-glutaminaCom L-glutamina (2 mM) GlicoseCom glicose (1,0 g/L) Bicarbonato de sódioCom NaHCO₃ (2,2 g/L) HEPESSem HEPES Piruvato de sódioSem piruvato de sódio Vermelho de fenolCom vermelho de fenol Solução salinaSolução Salina Equilibrada de Earle (EBSS) pH7,0 – 7,6 Teor de endotoxinasNão especificado Armazenamento+2 °C a +8 °C Formulação (Composição por litro)

€25.00

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Meio de congelação CM-1 - 100 ml

O Freeze Medium CM-1 da Cytion é um meio de criopreservação de última geração, concebido para garantir o mais elevado nível de viabilidade e funcionalidade celular após o descongelamento. Este meio versátil é adequado para um vasto leque de tipos de células, incluindo células humanas e animais, tornando-o uma ferramenta essencial para diversas aplicações de investigação. Formulado com uma combinação meticulosamente equilibrada de crioprotetores e nutrientes essenciais, o Freeze Medium CM-1 minimiza a formação de cristais de gelo e o stress celular durante o processo de congelação, preservando assim a integridade celular. As principais características do Freeze Medium CM-1 incluem: • Ampla compatibilidade: Eficaz para uma vasta gama de tipos de células, incluindo células primárias, células estaminais e linhas celulares estabelecidas. • Elevada viabilidade: Otimizado para maximizar a recuperação e a viabilidade celular após o descongelamento, garantindo resultados experimentais fiáveis. • Pronto a usar: Convenientemente preparado e esterilizado para aplicação imediata, reduzindo o tempo de preparação e o risco de contaminação. • Estabilidade reforçada: Mantém um desempenho consistente em condições normais de criopreservação, garantindo resultados reprodutíveis. • Longa vida útil: O CM-1 é um meio de criopreservação pronto a usar, contendo soro, que pode ser armazenado no frigorífico por um período de até um ano. Utilização do CM-1 para o congelamento de células Para utilizar o CM-1 no congelamento de células aderentes e em suspensão, siga estes passos: • No caso das células aderentes, lave-as e dissociá-las do substrato de cultura. No caso das células em suspensão, avance diretamente para o passo seguinte. • Conte as células para garantir que se encontram na concentração adequada. • Centrifugue as células para as sedimentar e, em seguida, ressuspende-as no meio de congelação CM-1. • Transfira as células ressuspensas para criotubos. • Utilize um método de congelação lenta antes de transferir as células para armazenamento a longo prazo. Método Descrição Etapas ❄️ Congelação manual Um método passo a passo que envolve a redução gradual da temperatura para garantir a viabilidade celular. 1️⃣ Coloque as células num meio de congelação num congelador a 4 °C durante 40 minutos. 2️⃣ Transfira-as para um congelador a -80 °C durante 24 horas. 3️⃣ Armazene as células em azoto líquido para conservação a longo prazo. ❄️ Utilização do Mr. Frosty Um dispositivo prático que permite taxas de congelação controladas sem necessidade de energia elétrica. 1️⃣ Prepare as células em criotubos com meio de congelação. 2️⃣ Coloque os criotubos no recipiente do Mr. Frosty. 3️⃣ Armazene a -80 °C durante 24 horas antes de transferir para nitrogénio líquido. ❄️ Congelador de taxa controlada Um congelador de alta precisão da Thermo Fisher ou de outros fabricantes, concebido para a redução controlada da temperatura. 1️⃣ Programe o dispositivo para diminuir gradualmente a temperatura. 2️⃣ Coloque as células preparadas no congelador. 3️⃣ Após o ciclo de congelação, transfira as células para nitrogénio líquido. • Armazene os criotubos a temperaturas inferiores a -130 °C ou em nitrogénio líquido para conservação a longo prazo. Ingredientes • Contém FBS, DMSO, glicose, sais • Capacidade tampão: pH = 7,2 a 7,6 O Meio de Congelação CM-1 da Cytion oferece uma solução fiável para a criopreservação, garantindo elevada viabilidade celular e funcionalidade após o descongelamento para uma vasta gama de aplicações de investigação.

€99.00

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Meio de congelação CM-1 - 50 ml

O Freeze Medium CM-1 da Cytion é um meio de criopreservação de última geração, concebido para garantir o mais elevado nível de viabilidade e funcionalidade celular após o descongelamento. Este meio versátil é adequado para um vasto leque de tipos de células, incluindo células humanas e animais, tornando-o uma ferramenta essencial para diversas aplicações de investigação. Formulado com uma combinação meticulosamente equilibrada de crioprotetores e nutrientes essenciais, o Freeze Medium CM-1 minimiza a formação de cristais de gelo e o stress celular durante o processo de congelação, preservando assim a integridade celular. As principais características do Freeze Medium CM-1 incluem: • Ampla compatibilidade: Eficaz para uma vasta gama de tipos de células, incluindo células primárias, células estaminais e linhas celulares estabelecidas. • Elevada viabilidade: Otimizado para maximizar a recuperação e a viabilidade celular após o descongelamento, garantindo resultados experimentais fiáveis. • Pronto a usar: Convenientemente preparado e esterilizado para aplicação imediata, reduzindo o tempo de preparação e o risco de contaminação. • Estabilidade reforçada: Mantém um desempenho consistente em condições normais de criopreservação, garantindo resultados reprodutíveis. • Longa vida útil: O CM-1 é um meio de criopreservação pronto a usar, contendo soro, que pode ser armazenado no frigorífico por um período de até um ano. Utilização do CM-1 para o congelamento de células Para utilizar o CM-1 no congelamento de células aderentes e em suspensão, siga estes passos: • No caso das células aderentes, lave-as e dissociá-las do substrato de cultura. No caso das células em suspensão, avance diretamente para o passo seguinte. • Conte as células para garantir que se encontram na concentração adequada. • Centrifugue as células para formar um sedimento e, em seguida, ressuspende-as no meio de congelação CM-1. • Transfira as células ressuspensas para criotubos. • Utilize um método de congelação lenta antes de transferir as células para armazenamento a longo prazo. Método Descrição Etapas ❄️ Congelação manual Um método passo a passo que envolve a redução gradual da temperatura para garantir a viabilidade celular. 1️⃣ Coloque as células num meio de congelação num congelador a 4 °C durante 40 minutos. 2️⃣ Transfira-as para um congelador a -80 °C durante 24 horas. 3️⃣ Armazene as células em azoto líquido para conservação a longo prazo. ❄️ Utilização do Mr. Frosty Um dispositivo prático que permite taxas de congelação controladas sem necessidade de energia elétrica. 1️⃣ Prepare as células em criotubos com meio de congelação. 2️⃣ Coloque os criotubos no recipiente do Mr. Frosty. 3️⃣ Armazene a -80 °C durante 24 horas antes de transferir para nitrogénio líquido. ❄️ Congelador de taxa controlada Um congelador de alta precisão da Thermo Fisher ou de outros fabricantes, concebido para a redução controlada da temperatura. 1️⃣ Programe o dispositivo para diminuir gradualmente a temperatura. 2️⃣ Coloque as células preparadas no congelador. 3️⃣ Após o ciclo de congelação, transfira as células para nitrogénio líquido. • Armazene os criotubos a temperaturas inferiores a -130 °C ou em nitrogénio líquido para conservação a longo prazo. Ingredientes • Contém FBS, DMSO, glicose, sais • Capacidade tampão: pH = 7,2 a 7,6 O Meio de Congelação CM-1 da Cytion oferece uma solução fiável para a criopreservação, garantindo elevada viabilidade celular e funcionalidade após o descongelamento para uma vasta gama de aplicações de investigação.

€59.00

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Médio F12K de Ham, contendo: 2,0 mM de L-glutamina, 2,0 mM de piruvato de sódio e 2,5 g/L de NaHCO₃

Apresentamos o Meio F-12K (Kaighn's) de Ham, uma modificação especializada do meio F-12 de Ham, concebida para satisfazer os requisitos específicos da investigação biológica. Este meio avançado oferece vantagens distintas, melhorando o cultivo de hepatócitos humanos primários, bem como de células hepáticas de rato e de galinha, particularmente em condições de soro reduzido. O meio Ham's F-12K (Kaighn's) foi cuidadosamente formulado para otimizar as condições de cultura celular. Apresenta uma composição enriquecida, fornecendo níveis elevados de componentes essenciais, tais como aminoácidos e piruvato de sódio, bem como elementos adicionais, incluindo putrescina, timidina, hipoxantina e zinco. Estas adições permitem aos investigadores suplementar o meio com soro mínimo ou componentes definidos para tipos celulares específicos, facilitando a criação de condições experimentais precisas. É de salientar que o meio F-12K (Kaighn) de Ham não contém proteínas nem fatores de crescimento. Consequentemente, é frequentemente necessária a suplementação com fatores de crescimento e soro fetal bovino (FBS), permitindo aos investigadores adaptar o meio às necessidades das suas linhas celulares específicas. Para um desempenho ideal, a concentração de FBS deve ser cuidadosamente otimizada para cada linha celular, garantindo um crescimento e uma funcionalidade ótimos. Para manter o pH fisiológico, o meio F-12K (Kaighn) de Ham utiliza um sistema tampão de bicarbonato de sódio (2,5 g/L), o que requer um ambiente com concentração controlada de CO₂ entre 5 % e 10 % durante o cultivo. Isto garante que o pH do meio se mantenha dentro do intervalo ideal para o crescimento e a viabilidade celular. Controlo de qualidade • pH = 7,2 ± 0,02 a 20-25 °C. • Cada lote foi testado quanto à esterilidade e à ausência de micoplasmas e bactérias. Manutenção • Manter refrigerado a +2 °C a +8 °C, ao escuro. Tanto a congelação como o aquecimento até +37 °C prejudicam a qualidade do produto. • Não aqueça o meio a mais de 37 °C nem utilize fontes de calor não controláveis (por exemplo, micro-ondas). • Se for utilizada apenas uma parte do meio, retire essa quantidade do frasco e aqueça-a à temperatura ambiente. • O prazo de validade de qualquer meio, exceto o meio básico, é de 8 semanas a contar da data de fabrico. Composição Componentes mg/L Sais inorgânicos Cloreto de cálcio x 2H₂O 135,24 Sulfato de cobre(II) x 5H₂O 0,00 Sulfato de ferro (II) x 7H₂O 0,83 Cloreto de magnésio x 6H₂O 105,72 Sulfato de magnésio x 7H₂O 394,49 Cloreto de potássio 283,29 Dihidrogenofosfato de potássio 58,52 Cloreto de sódio 7597,20 Hidrogenofosfato dissódico anidro 115,02 Sulfato de zinco x 7H₂O 0,14 Outros componentes D(+)-Glicose anidra 1260,00 Hipoxantina 4,08 Ácido DL-α-lipóico 0,21 Vermelho de fenol 3,00 Putrescina x 2HCl 0,32 Piruvato de sódio 220,00 NaHCO₃ 2500,00 Timidina 0,73 Aminoácidos L-alanina 17,82 L-arginina x HCl 421,40 L-asparagina x H₂O 30,02 Ácido L-aspártico 26,62 L-cisteína x HCl x H₂O 70,24 L-glutamina 292,20 Ácido L-glutâmico 29,42 Glicina 15,01 L-histidina x HCl x H₂O 41,92 L-isoleucina 7,87 L-Leucina 26,24 L-Lisina x HCl 73,04 L-metionina 8,95 L-fenilalanina 9,91 L-prolina 69,06 L-serina 21,02 L-treonina 23,82 L-triptofano 4,08 L-tirosina 10,87 L-valina 23,42 Vitaminas D(+)-Biotina 0,07 D-Pantotenato de cálcio 0,48 Cloreto de colina 13,96 Ácido fólico 1,32 mio-inositol 18,02 Nicotinamida 0,04 Piridoxina x HCl 0,06 Riboflavina 0,04 Tiamina x HCl 0,34 Vitamina B12 1,36

€108.00

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Ham's F12 Médio, contendo: 1,0 mM de glutamina estável, contendo: 1,0 mM de piruvato de sódio, contendo: 1,176 g/L de NaHCO₃

O Meio F-12 de Ham, também conhecido como Mistura de Nutrientes F-12 de Ham, é um meio basal amplamente utilizado, concebido especificamente para cultura celular. Tem sido amplamente utilizado para a cultura em placa, sem soro e em célula única, de células de ovário de hamster chinês (CHO), células pulmonares e células L de ratinho. Além disso, o Ham’s F-12 é o meio de eleição para o ensaio de toxicidade clonal (CTA). Uma das suas vantagens notáveis é a capacidade de suportar o crescimento celular sem a necessidade de suplementação com soro. Isto elimina potenciais interferências causadas por componentes do soro, garantindo resultados experimentais consistentes e fiáveis. Ao proporcionar um ambiente de cultura isento de soro, o meio Ham's F-12 oferece aos investigadores um maior controlo sobre as suas investigações. Outra característica fundamental do meio Ham's F-12 é a sua adequação à placa de células únicas. Isto torna-o uma excelente escolha para uma variedade de linhas celulares, incluindo células CHO, células pulmonares e células L de ratinho. A composição nutricional otimizada do meio facilita a adesão e o crescimento eficientes de células individuais, permitindo o estabelecimento de culturas celulares homogéneas com melhor reprodutibilidade. Além disso, o meio Ham's F-12 ganhou reconhecimento como o meio preferido para o Ensaio de Toxicidade Clonal (CTA). Este ensaio desempenha um papel fundamental na avaliação dos efeitos citotóxicos de substâncias nas células. Ao utilizar o meio F-12 de Ham no CTA, os investigadores podem avaliar com precisão o impacto de vários compostos ou tratamentos em células individuais, proporcionando informações valiosas sobre os perfis toxicológicos. Controlo de qualidade • pH = 7,2 ± 0,02 a 20-25 °C. • Cada lote foi testado quanto à esterilidade e à ausência de micoplasmas e bactérias. Conservação • Manter refrigerado a +2 °C a +8 °C, ao abrigo da luz. O congelamento e o aquecimento até +37 °C prejudicam a qualidade do produto. • Não aqueça o meio a mais de 37 °C nem utilize fontes de calor incontroláveis (por exemplo, micro-ondas). • Se apenas uma parte do meio for utilizada, retire essa quantidade do frasco e aqueça-a à temperatura ambiente. • O prazo de validade de qualquer meio, exceto o meio básico, é de 8 semanas a partir da data de fabrico. Composição Componentes mg/L Sais inorgânicos Cloreto de cálcio x 2H₂O 44,00 Sulfato de cobre(II) x 5H₂O 0,00 Sulfato de ferro (II) x 7H₂O 0,83 Cloreto de magnésio x 6H₂O 122,00 Cloreto de potássio 223,65 Cloreto de sódio 7599,00 Hidrogenofosfato dissódico anidro 142,04 Sulfato de zinco x 7H₂O 0,86 Outros componentes D(+)-Glicose anidra 1801,60 Hipoxantina 4,08 Ácido linoleico 0,08 Ácido DL-α-lipóico 0,21 Vermelho de fenol 1,20 Putrescina x 2HCl 0,16 Piruvato de sódio 110,00 Timidina 0,73 NaHCO₃ 1176,00 Aminoácidos L-alanina 8,91 L-arginina x HCl 210,70 L-asparagina x H₂O 15,01 Ácido L-aspártico 13,31 L-cisteína x HCl x H₂O 35,12 L-alanil-L-glutamina 217,30 Ácido L-glutâmico 14,71 Glicina 7,51 L-histidina x HCl x H₂O 20,96 L-isoleucina 3,94 L-Leucina 13,12 L-lisina x HCl 36,54 L-metionina 4,48 L-fenilalanina 4,96 L-prolina 34,53 L-serina 10,51 L-treonina 11,91 L-triptofano 2,04 L-tirosina 5,44 L-valina 11,71 Vitaminas D(+)-Biotina 0,01 D-Pantotenato de cálcio 0,24 Cloreto de colina 13,96 Ácido fólico 1,32 mio-inositol 18,02 Nicotinamida 0,04 Piridoxina x HCl 0,06 Riboflavina 0,04 Tiamina x HCl 0,34 Vitamina B12 1,36

€25.00

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HEPES Buffer Solution (1M)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered HEPES Buffer Solution (1 M), also known as N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid, is a zwitterionic organic buffering agent widely used in cell culture media. It is designed to maintain stable pH conditions in the physiological range of 6.7 to 8.6, supporting optimal cellular function during in vitro applications. Application and Benefits HEPES provides reliable buffering capacity in cell culture systems, particularly when cells are handled outside a CO₂ incubator. The addition of 10–25 mM HEPES to culture media offers enhanced pH stability during extended manipulation periods, helping to maintain consistent experimental conditions. This buffer is membrane-impermeable, has minimal interference with biochemical reactions, and demonstrates strong chemical and enzymatic stability. These properties make it suitable for a wide range of cell culture and biochemical applications. Formulation and Usage The solution is supplied as a 1 M concentrate prepared in cell culture–grade water and is sterile-filtered for use in contamination-sensitive environments. It can be diluted to the desired working concentration depending on application requirements. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to preserve product integrity. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

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IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

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Meios de cultura celular: uma visão geral

No domínio das ciências da vida, uma das metodologias mais importantes é a cultura celular. A remoção de células, tecidos ou órgãos de um animal ou planta e a subsequente implantação dessas células, tecidos ou órgãos num ambiente artificial favorável à sua sobrevivência e/ou crescimento é o que se entende por «cultura celular». As necessidades ambientais fundamentais para o desenvolvimento celular ideal são a temperatura controlada, um substrato para a adesão celular, um meio de crescimento adequado e uma incubadora que mantenha o pH e a osmolalidade ideais. As células necessitam destas condições para crescerem até ao seu pleno potencial.

A seleção de um meio de crescimento adequado para o cultivo in vitro é a etapa da cultura celular que é simultaneamente a mais crítica e a mais vital. Um meio de crescimento, também conhecido como meio de cultura, é um líquido ou gel formulado para estimular o desenvolvimento de organismos à escala microscópica, celular ou vegetal. O meio utilizado para cultivar células contém frequentemente um fornecimento adequado de energia e substâncias que controlam o ciclo celular. Os principais componentes de um meio de cultura incluem aminoácidos, vitaminas, sais inorgânicos, glicose e soro. O soro é adicionado ao meio porque atua como fonte de fatores de crescimento, hormonas e fatores de adesão. Além de fornecer nutrientes, o meio também contribui para a manutenção dos níveis de pH e osmolalidade.

Tipos de meio utilizados na cultura celular

Tanto as células humanas como as animais podem ser cultivadas num meio artificial ou sintético, ou num meio inteiramente natural, suplementado com elementos naturais. A seguir, apresentamos uma visão geral dos diferentes tipos de meios atualmente disponíveis.

Meios naturais

Nos meios naturais, só se encontram fluidos biológicos que existem no seu estado natural. Os meios naturais são muito úteis e fáceis de utilizar para o cultivo de uma ampla variedade de tipos de células animais. A falta de conhecimento sobre os componentes exatos que constituem os meios naturais é o principal fator que contribui para a baixa repetibilidade dos resultados obtidos com a utilização destes meios.

Meios artificiais

A preparação de meios artificiais ou sintéticos envolve a adição de nutrientes (tanto orgânicos como inorgânicos), proteínas séricas, hidratos de carbono, cofatores, vitaminas e sais, bem como as fases gasosas de O₂ e CO₂ [1].

Foram desenvolvidos vários tipos de meios artificiais com o objetivo de cumprir uma ou mais das seguintes funções: 1) Sobrevivência imediata (uma solução salina equilibrada com um pH e uma pressão osmótica precisos). 2) Sobrevivência prolongada (uma solução salina equilibrada suplementada com diferentes formulações de compostos orgânicos e/ou soro). 3) Desenvolvimento por tempo indeterminado. 4) Funções especializadas.

Existem quatro classificações distintas para os meios artificiais:

Meios contendo soro

O tipo de suplemento mais frequente encontrado nos meios utilizados para o crescimento de células animais é o soro fetal bovino. É adicionado ao meio de cultura como um suplemento de baixo custo, a fim de alcançar as melhores condições de crescimento possíveis. Para além de atuar como transportador ou quelante de nutrientes instáveis ou insolúveis em água, hormonas e fatores de crescimento, inibidores de proteases e outras substâncias, o soro também se liga a moléculas nocivas e neutraliza-as.

Meio sem soro

A presença de soro nos meios de cultura apresenta várias desvantagens e tem o potencial de causar erros graves na interpretação da investigação imunológica [2, 3]. Foram criados diversos meios de cultura isentos de soro [4, 5]. Estes meios são geralmente formulados especificamente para suportar a cultura de um único tipo de célula, tais como o Knockout Serum Replacement e o Knockout DMEM da Thermo Fisher Scientific, e o meio mTESR da Stem Cell Technologies [6], para células estaminais [7].

Além disso, estes meios incorporam quantidades definidas de fatores de crescimento purificados, lipoproteínas e outras proteínas, que, de outra forma, seriam normalmente fornecidas pelo soro [8]. Estes meios são frequentemente designados por «meios de cultura definidos», uma vez que os componentes que os constituem são bem conhecidos.

Meios quimicamente definidos

Estes meios incluem componentes inorgânicos e orgânicos ultrapuros que não foram afetados por qualquer tipo de contaminação. Podem também incluir adições de proteínas puras, tais como fatores de crescimento.

 A modificação genética de bactérias ou leveduras, juntamente com a adição de ácidos gordos específicos, vitaminas, colesterol e aminoácidos, resulta na produção dos seus componentes [9].

Meios isentos de proteínas

Os meios isentos de proteínas são aqueles que não incluem qualquer proteína e, em vez disso, incluem apenas elementos não proteicos. Quando comparados com meios com soro adicionado, a utilização de meios sem proteínas adicionadas promove uma maior proliferação celular e expressão proteica e facilita a purificação de qualquer produto gerado num processo a jusante [10-12]. A proteína não está incluída em formulações como o MEM e o RPMI-1640. No entanto, pode ser administrado um suplemento proteico, caso seja necessário.

Meios de cultura e os seus componentes básicos

Os meios de cultura comerciais podem ser adquiridos na forma de pó ou líquido e incluem frequentemente uma variedade de nutrientes, tais como aminoácidos, glicose, sais, vitaminas e outros suplementos alimentares. 

As necessidades destes componentes variam consoante a linha celular, e estas variações são responsáveis pela grande diversidade de formulações de meios de cultura. Cada componente desempenha uma determinada função, que será descrita nos parágrafos seguintes:

Sistemas tampão

Para manter condições de crescimento ideais, o pH deve ser controlado, o que é frequentemente feito por um de dois sistemas tampão:

Sistema tampão natural

A proporção de CO₂/H₂CO₃ na atmosfera é igual à do meio, criando um mecanismo tampão natural. Para preservar este mecanismo tampão natural, as culturas devem ser mantidas num ambiente com 5-10% de CO₂, o que é frequentemente conseguido através da utilização de uma incubadora de CO₂. Uma das principais vantagens da utilização de um tampão natural é o facto de ser económico e seguro.

HEPES

A tamponagem química utilizando o zwitterião HEPES apresenta uma maior capacidade de tamponagem na faixa de pH de 7,2 a 7,4 e não requer um ambiente gasoso regulado. Para determinados tipos de células, uma dose mais elevada de HEPES pode ser prejudicial. Os meios que contêm HEPES são, da mesma forma, muito mais suscetíveis aos efeitos fototóxicos da luz fluorescente [13].

Vermelho de fenol

O indicador de pH vermelho de fenol é frequentemente incluído em meios de cultura disponíveis no mercado, permitindo a monitorização contínua do pH. À medida que as células se multiplicam, os metabolitos por elas produzidos provocam uma alteração no pH e, consequentemente, uma mudança de cor do meio. O vermelho de fenol tem um efeito duplo na cor do meio, tornando-o amarelo em pH ácido e roxo em pH alcalino. O pH 7,4, o valor ideal para a cultura celular, faz com que o meio apresente uma cor vermelha fluorescente.

No entanto, o vermelho de fenol apresenta algumas desvantagens: em primeiro lugar, é capaz de simular a ação de várias hormonas esteróides, principalmente o estrogénio [14]. Por conseguinte, ao estudar células sensíveis ao estrogénio, como o tecido mamário, recomenda-se a utilização de um meio isento de vermelho de fenol. O equilíbrio sódio-potássio é perturbado pela presença de vermelho de fenol em várias formulações sem soro. A adição de soro ou de hormona hipofisária bovina aos meios pode contrariar este efeito [15]. Em terceiro lugar, a deteção em experiências de citometria de fluxo é dificultada pela presença de vermelho de fenol.

Sais inorgânicos

Os meios que contêm sais inorgânicos, tais como iões de sódio, potássio e cálcio, ajudam a manter o equilíbrio osmótico e a regular o potencial de membrana.

Aminoácidos

Uma vez que os aminoácidos são os componentes fundamentais das proteínas, constituem um componente essencial de todos os meios de crescimento celular alguma vez concebidos. Como as células são incapazes de produzir determinados aminoácidos por si próprias, é importante que o meio de cultura inclua aminoácidos essenciais. São necessários para a proliferação celular, e a concentração em que se encontram determina a densidade celular máxima que pode ser atingida. Em particular, a L-glutamina, um aminoácido essencial, é especialmente crucial.

A L-glutamina funciona como fonte secundária de energia para o metabolismo e fornece azoto para a produção de NAD, NADPH e nucleótidos. Dado que a L-glutamina é um aminoácido instável que, com o tempo, se transforma numa forma que as células não conseguem utilizar, deve ser adicionada ao meio de cultura.

Além disso, os aminoácidos não essenciais podem ser fornecidos ao meio de cultura, a fim de repor aqueles que foram consumidos ao longo do processo de crescimento. O crescimento das células é estimulado e a sua viabilidade é aumentada quando o meio de cultura é suplementado com aminoácidos não essenciais.

Hidratos de carbono

Os hidratos de carbono sob a forma de açúcares são a principal fonte de energia. Muitos dos meios incluem também maltose e frutose, para além dos açúcares mais comuns, como a glicose e a galactose.

Proteínas e péptidos

A albumina, a transferrina e a fibronectina são as proteínas e os péptidos mais frequentemente utilizados. São especialmente importantes em meios que não incluem soro. A albumina, a transferrina, a aprotinina, a fetuína e a fibronectina são algumas das proteínas que podem ser encontradas no soro, que constitui uma fonte rica em proteínas.

A albumina é a principal proteína presente no sangue e a sua função consiste em ligar e transportar várias substâncias — incluindo água, sais, ácidos gordos livres, hormonas e vitaminas — entre diferentes órgãos e células. A capacidade da albumina de se ligar a substâncias químicas torna-a uma candidata eficaz para remover compostos nocivos do meio em que as células são cultivadas.

A aprotinina é um agente protetor em sistemas de cultura celular, uma vez que é estável em pH neutro e ácido, bem como resistente a altas temperaturas e à destruição que pode ser causada por enzimas proteolíticas. É capaz de inibir várias proteases de serina, incluindo a tripsina, entre outras.

A fetuína é uma glicoproteína que pode ser detetada em quantidades mais elevadas no soro de fetos e recém-nascidos, em comparação com o soro de adultos. Além disso, atua como inibidor de proteases de serina. A proteína fibronectina é um componente essencial no processo de adesão celular. A transferrina é uma proteína que transporta ferro e é responsável pelo fornecimento de ferro às membranas celulares.

Ácidos gordos e lípidos

Desempenham um papel crucial em meios sem soro, quando este está ausente.

Vitaminas

São necessárias inúmeras vitaminas para o desenvolvimento e a proliferação celular. As vitaminas não podem ser produzidas em quantidades adequadas pelas células, sendo, por isso, essenciais na cultura de tecidos como suplementos alimentares.

Na cultura celular, o soro é a principal fonte de vitaminas; no entanto, os meios também são enriquecidos com várias vitaminas para se adequarem a um tipo específico de célula. Normalmente, as vitaminas do grupo B são utilizadas para estimular o crescimento.

Oligoelementos

Elementos químicos como o cobre, o zinco, o selénio e os intermediários do ácido tricarboxílico são conhecidos como oligoelementos. Os oligoelementos são frequentemente adicionados a meios que não incluem soro, a fim de substituir aqueles que estão normalmente presentes no soro. Estes elementos são componentes químicos importantes, necessários para o desenvolvimento saudável das células. Muitas reações bioquímicas dependem de determinados micronutrientes, como a atividade enzimática.

Suplementos para meios de cultura

O meio de crescimento completo recomendado para determinadas linhas celulares necessita de componentes adicionais que estão ausentes dos meios de base e do soro. Estes suplementos alimentares apoiam o crescimento celular e o funcionamento metabólico adequado.

Embora as hormonas, os fatores de crescimento e as moléculas de sinalização sejam essenciais para a proliferação adequada de determinadas linhas celulares, devem ser sempre tomadas as seguintes precauções: uma vez que a adição de suplementos pode alterar a osmolalidade do meio de crescimento completo, o que pode inibir o desenvolvimento celular, é sempre aconselhável verificar a osmolalidade após a adição dos suplementos. Para a maioria das linhas celulares, a osmolalidade ideal situa-se entre 260 e 320 mOSM/kg.

Antibióticos

Os antibióticos são frequentemente utilizados para inibir o desenvolvimento de contaminantes bacterianos e fúngicos [16], embora não sejam essenciais para o crescimento celular. Uma vez que os antibióticos podem ocultar a contaminação por micoplasmas e bactérias resistentes, a sua utilização de rotina não é recomendada para a cultura celular [17, 18].

Além disso, os antibióticos podem perturbar o metabolismo de células hipersensíveis. São frequentemente utilizadas as combinações de penicilina e estreptomicina fabricadas pela MilliporeSigma e pela Life Technologies. A plasmocina tem sido utilizada na cultura das linhas celulares de glioma TS603, TS516 e BT260 [19], tendo-se revelado eficaz na remoção da contaminação por micoplasma (20).

Soro

O soro contém albuminas, fatores de crescimento e inibidores de crescimento. O soro é um dos componentes mais importantes do meio de cultura celular, pois fornece aminoácidos, proteínas, vitaminas (especialmente vitaminas lipossolúveis, como A, D, E e K), hidratos de carbono, lípidos, hormonas, fatores de crescimento, minerais e oligoelementos.

O soro de origem fetal e de vitelo bovino é frequentemente utilizado para promover o desenvolvimento de células em cultura. O soro fetal é uma fonte abundante de fatores de crescimento e é adequado para a clonagem celular e o desenvolvimento de células sensíveis. Devido às suas capacidades reduzidas de promoção do crescimento, o soro de vitelo é utilizado em experiências de inibição por contacto. Os meios de crescimento normais incluem frequentemente 2% a 10% de soro. A adição de soro ao meio de cultura tem os seguintes objetivos [21]:

  • O soro fornece os nutrientes essenciais às células (tanto em solução como ligados a proteínas).

  • O soro contém vários fatores de crescimento e hormonas envolvidos na promoção do crescimento e na atividade celular especializada.

  • Fornece muitas proteínas de ligação, como a albumina e a transferrina, que transportam outras substâncias químicas para o interior da célula. Por exemplo, a albumina transporta gorduras, vitaminas, hormonas, etc., para as células.

  • Fornece também proteínas, como a fibronectina, que aumentam a adesão celular ao substrato. Além disso, produz elementos de espalhamento que auxiliam na expansão celular antes da divisão.

  • Fornece inibidores de proteases que impedem a proteólise nas células.

  • Contém ainda minerais como Na+, K+, Zn2+ e Fe2+.

  • Aumenta a viscosidade do meio, protegendo assim as células de lesões mecânicas durante a agitação da cultura em suspensão.

  • Funciona também como tampão.

Referências

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Nutrição de células animais em cultura de tecidos; estudos iniciais sobre um meio sintético. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

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