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Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

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Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

€310.00

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Cytion Endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850006

Medio de cultivo avanzado para células endoteliales

El medio avanzado de crecimiento de células endoteliales se utiliza para el cultivo de células endoteliales humanas procedentes de vasos sanguíneos de gran calibre. Los factores de crecimiento recombinantes humanos definidos, entre los que se incluyen el VEGF y el IGF-1 Long R3, sustituyen al suplemento bruto de crecimiento de células endoteliales. El medio completo contiene suero fetal bovino, L-glutamina, heparina, EGF, bFGF, VEGF, IGF-1 Long R3, ácido ascórbico e hidrocortisona. Para una expansión más rápida con un mayor contenido de suero, elija el medio de proliferación de células endoteliales. Para una formulación sin VEGF, elija el Medio de Crecimiento de Células Endoteliales. Ofrecemos el medio en formato de 500 ml de medio basal, solo o junto con los suplementos, ya sea como componentes individuales o como una mezcla de suplementos premezclada. Los componentes individuales permiten ajustar u omitir factores concretos, mientras que la mezcla de suplementos se añade en un solo paso. El medio basal también está disponible sin rojo de fenol en los mismos formatos, lo que evita interferencias con las lecturas fluorescentes y colorimétricas, así como la débil actividad estrogénica del rojo de fenol. Para su uso se requieren suplementos, y ambos formatos de suplemento también están disponibles por separado. Una vez suplementado, el medio completo contiene un 2 % de FCS (10 ml por cada 500 ml de medio basal).

€180.00

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Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850019

Medio avanzado de cultivo para células endoteliales microvasculares

El medio de cultivo avanzado para células endoteliales microvasculares se utiliza para el cultivo de células endoteliales microvasculares humanas, por ejemplo, procedentes de la dermis, el pulmón o el corazón. Los factores de crecimiento recombinantes humanos definidos sustituyen al suplemento de crecimiento celular endotelial sin refinar. El medio completo contiene suero fetal bovino, L-glutamina, EGF, bFGF, VEGF, IGF-1 Long R3, ácido ascórbico e hidrocortisona. Para una formulación con ECGS/H y sin VEGF, elija el medio de crecimiento para células endoteliales microvasculares. Ofrecemos el medio en formato de 500 ml de medio basal, solo o junto con los suplementos, ya sea como componentes individuales o como una mezcla de suplementos premezclada. Los componentes individuales permiten ajustar u omitir factores concretos, mientras que la mezcla de suplementos se añade en un solo paso. El medio basal también está disponible sin rojo de fenol en los mismos formatos, lo que evita interferencias con las lecturas fluorescentes y colorimétricas, así como la débil actividad estrogénica del rojo de fenol. Para su uso se requieren suplementos, y ambos formatos de suplementos también están disponibles por separado. Una vez suplementado, el medio completo contiene un 5 % de FCS (25 ml por cada 500 ml de medio basal).

€200.00

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Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

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Cytion Chondrocyte growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850048

Medio de cultivo para condrocitos

El medio de crecimiento para condrocitos se utiliza para la expansión en monocapa de condrocitos humanos y bovinos, por ejemplo, antes de su transferencia a un cultivo en sedimento o en andamio. Ofrecemos el medio en forma de medio basal de 500 ml, solo o junto con los suplementos, ya sea como componentes individuales o como una mezcla de suplementos premezclada. Los componentes individuales permiten ajustar u omitir factores concretos, mientras que la mezcla de suplementos se añade en un solo paso. El medio basal también está disponible sin rojo de fenol en los mismos formatos, lo que evita interferencias con las lecturas fluorescentes y colorimétricas, así como la débil actividad similar a la de los estrógenos del rojo de fenol. Para su uso se requieren suplementos, y ambos formatos de suplemento también están disponibles por separado. Una vez suplementado, el medio completo contiene un 10 % de FCS (50 ml por cada 500 ml de medio basal).

€310.00

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Cytion Defined fibroblast growth medium-maintenance, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850143

Medio de mantenimiento definido para fibroblastos

El medio de mantenimiento definido para fibroblastos es un medio sin suero y totalmente definido que mantiene los fibroblastos humanos en un estado estable, en lugar de provocar una expansión rápida. Es adecuado para trabajos de análisis del secretoma, la matriz extracelular y de compuestos en los que el suero podría interferir. El medio completo contiene L-glutamina, bFGF recombinante humano e insulina recombinante humana. Para la proliferación de fibroblastos, elija el medio de crecimiento de fibroblastos. Ofrecemos el medio en forma de 500 ml de medio basal, solo o junto con los suplementos sin suero, ya sea como componentes individuales o como una mezcla de suplementos premezclada. Los componentes individuales permiten ajustar u omitir factores concretos, mientras que la «Supplement-Mix» se añade en un solo paso. Los suplementos son necesarios para su uso, y ambos formatos de suplementos también están disponibles por separado.

€170.00

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D-Glucose Solution (Dextrose Solution), 250 g/L

Volume: 50 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered D-(+)-Glucose Solution (Dextrose Solution) is a sterile, ready-to-use supplement containing the naturally occurring sugar D-(+)-glucose, a central component of cellular metabolism. Glucose is involved in essential biological processes such as energy production, glycosylation, and the formation of glycans that contribute to cellular structure and function. Application and Benefits This glucose solution is widely used as a supplement in cell culture media and in numerous cellular and molecular biology applications. As a primary carbon and energy source, glucose supports cell growth, proliferation, and metabolic activity. Its involvement in biosynthetic pathways also makes it critical for maintaining normal cellular physiology and experimental consistency. Formulation and Usage The solution is supplied at a high concentration of 250 g/L glucose, allowing flexible dilution into culture media according to experimental requirements. It is sterile-filtered to ensure suitability for contamination-sensitive applications. Store at +2°C to +8°C and handle aseptically to maintain product quality and stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€32.00

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DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p/v: 0,5 mM de piruvato de sodio, p/v: 1,2 g/L de NaHCO₃

El DMEM:Ham's F12 es un medio basal ampliamente reconocido y muy utilizado en el cultivo celular para la investigación biológica. Sirve como fuente fundamental de nutrientes para el crecimiento de diversas líneas celulares de mamíferos, especialmente cuando se complementa con suero fetal bovino (FBS). Esta fórmula única combina el medio Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) y el F-12 de Ham (mezcla de nutrientes F-12 de Ham) en una proporción precisa de 1:1. La adición de L-glutamina mejora aún más su composición. El DMEM, derivado del medio esencial mínimo de Eagle (EMEM), ofrece una mayor concentración de aminoácidos y vitaminas en comparación con su predecesor. Por el contrario, el F-12 de Ham se basa en el medio F-10 de Ham, lo que proporciona un conjunto complementario de componentes esenciales. Para favorecer un crecimiento celular óptimo, es habitual complementar el DMEM:Ham's F-12 con suero fetal bovino (FBS) a una concentración típica del 5-10 %. Esta adición es necesaria, ya que el medio carece de hormonas de crecimiento, lípidos y proteínas cruciales para el desarrollo celular. El DMEM:Ham's F12 incorpora un sistema tampón de pH y a menudo se le añade rojo de fenol, un indicador de pH. Las células cultivadas en DMEM:Ham's F12, o en cualquier medio que utilice el sistema tampón de bicarbonato, requieren un entorno con un nivel controlado de CO₂ del 5-10 % para mantener unos niveles de pH adecuados. Control de calidad • Filtrado estéril Almacenamiento y vida útil • Conservar a una temperatura de +2 °C a +8 °C, protegido de la luz. • Una vez abierto, conservar a 4 °C y utilizar en un plazo de 6 a 8 semanas. Condiciones de envío • Temperatura ambiente Conservación • Mantener refrigerado a una temperatura comprendida entre +2 °C y +8 °C, al abrigo de la luz. Evitar la congelación y el calentamiento frecuente a +37 °C, ya que reduce la calidad del producto. • No caliente el medio por encima de 37 °C ni utilice fuentes de calor no controladas, como los microondas. • Si solo se va a utilizar una parte del medio, extraiga la cantidad necesaria y caliéntela a temperatura ambiente antes de su uso. Composición Categoría Componentes Concentración (mg/L) Aminoácidos Glicina 18,75 L-alanina 4,45 L-arginina HCl 147,50 L-asparagina H₂O 7,50 Ácido L-aspártico 6,65 L-cisteína HCl H₂O 17,56 L-cistina 2 HCl 31,29 Ácido L-glutámico 7,35 L-glutamina 365,00 L-histidina HCl H₂O 31,48 L-isoleucina 54,47 L-leucina 59,05 L-lisina HCl 91,25 L-metionina 17,24 L-fenilalanina 35,48 L-prolina 17,25 L-serina 26,25 L-treonina 53,45 L-triptófano 9,02 L-tirosina 2 Na 2 H₂O 55,79 L-valina 52,85 Vitaminas D-biotina 0,0035 Cloruro de colina 8,98 Pantotenato de calcio D 2,24 Ácido fólico 2,66 mio-inositol 12,60 Nicotinamida 2,02 Clorhidrato de piridoxina 0,031 Clorhidrato de piridoxal 2,00 Riboflavina 0,219 Clorhidrato de tiamina 2,17 Vitamina B12 0,68 Sales inorgánicas CaCl₂·2 H₂O 154,50 CuSO₄·5H₂O 0,0013 Fe(NO₃)₃·9H₂O 0,05 FeSO₄·7H₂O 0,417 KCl 311,80 MgCl₂·6 H₂O 61,20 MgSO₄·7H₂O 100,00 NaCl 6996,00 NaHCO₃ 1200,00 Na₂HPO₄ 71,02 NaH₂PO₄·2 H₂O 70,87 ZnSO₄·7 H₂O 0,432 Otros componentes D-glucosa 3151,00 Hipoxantina 2,40 HEPES 3574,50 Ácido linoleico 0,042 Ácido lipoico 0,105 Sal sódica del rojo fenol 8,63 Putrescina 2 HCl 0,081 Piruvato de sodio 55,00 Timidina 0,365

€25.00

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DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio

El DMEM (medio Eagle modificado de Dulbecco) es un medio basal muy versátil y ampliamente utilizado, diseñado para favorecer el crecimiento de una amplia variedad de células de mamíferos en la investigación biológica. Sirve como medio ideal para el cultivo de fibroblastos primarios, neuronas, células gliales, HUVEC, células del músculo liso, así como de líneas celulares populares como HeLa, 293, Cos-7 y PC-12. Lo que distingue al DMEM de otros medios es su composición única. Contiene una impresionante concentración de aminoácidos y vitaminas cuatro veces superior a la del medio mínimo esencial de Eagle original. Desarrollado inicialmente con bajo contenido en glucosa (1 g/L) y piruvato de sodio, el DMEM se emplea con frecuencia con niveles más altos de glucosa, ya sea con o sin piruvato de sodio. Cabe destacar que el DMEM no contiene proteínas, lípidos ni factores de crecimiento, por lo que es necesario añadir suplementos. Para lograr un crecimiento óptimo, un enfoque habitual consiste en suplementar el DMEM con un 10 % de suero fetal bovino (FBS). Además, el DMEM emplea un sistema tampón de bicarbonato de sodio, lo que requiere un entorno con un 5-10 % de CO₂ para mantener un pH fisiológico. El medio Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) goza de gran prestigio entre los medios definidos para el cultivo celular y tisular, ya que satisface las necesidades de crecimiento de diversos fenotipos de células adherentes. Supera al medio de Eagle original, desarrollado en la década de 1950 para el cultivo de células de pollo, gracias a la formulación suplementaria mejorada conocida como la modificación de Dulbecco. Esta modificación eleva significativamente el contenido de determinados aminoácidos y vitaminas, llegando a cuadruplicarlo en comparación con el medio original. En el campo del cultivo celular, el DMEM desempeña un papel fundamental como medio de crecimiento para diferentes tipos de células, incluidas las células primarias, las células madre y las células transformadas. Los investigadores también utilizan la versión modificada del DMEM para una amplia gama de aplicaciones de investigación, como el descubrimiento de fármacos, la ingeniería de tejidos y el estudio de las vías de señalización celular. Control de calidad • Filtrado estéril Almacenamiento y vida útil • Conservar a una temperatura de entre +2 °C y +8 °C, protegido de la luz. • Una vez abierto, conservar a 4 °C y utilizar en un plazo de 6 a 8 semanas. Condiciones de envío • Temperatura ambiente Conservación • Mantener refrigerado a una temperatura comprendida entre +2 °C y +8 °C, al abrigo de la luz. Evitar la congelación y el calentamiento frecuente a +37 °C, ya que reduce la calidad del producto. • No caliente el medio por encima de 37 °C ni utilice fuentes de calor no controladas, como los microondas. • Si solo se va a utilizar una parte del medio, extraiga la cantidad necesaria y caliéntela a temperatura ambiente antes de su uso. Composición Categoría Componentes Concentración (mg/L) Aminoácidos Glicina 30,00 L-arginina HCl 84,00 L-cistina 2 HCl 62,57 L-glutamina 584,00 L-histidina HCl H₂O 42,00 L-isoleucina 105,00 L-leucina 105,00 L-lisina HCl 146,00 L-metionina 30,00 L-fenilalanina 66,00 L-serina 42,00 L-treonina 95,00 L-triptófano 16,00 L-tirosina 2 Na 2H₂O 103,79 L-valina 94,00 Vitaminas Cloruro de colina 4,00 Pantotenato de calcio D 4,00 Ácido fólico 4,00 mio-inositol 7,20 Nicotinamida 4,00 Clorhidrato de piridoxal 4,00 Riboflavina 0,40 Clorhidrato de tiamina 4,00 Sales inorgánicas CaCl₂·2 H₂O 265,00 Fe(NO₃)₃·9H₂O 0,10 KCl 400,00 MgSO₄·7H₂O 200,10 NaCl 6400,00 NaHCO₃ 3700,00 NaH₂PO₄·2H₂O 141,73 Otros componentes D-glucosa 4500,00 Sal sódica del rojo de fenol 15,90 Piruvato de sodio 110,00

€25.00

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EMEM (MEM Eagle), p/v: 2 mM de L-glutamina, p/v: 2,2 g/L de NaHCO₃, p/v: EBSS

El medio mínimo esencial de Eagle (EMEM) es uno de los medios basales más utilizados para el cultivo de una amplia gama de células de mamíferos, en particular de líneas celulares adherentes. Desarrollada originalmente por Harry Eagle, esta fórmula clásica contiene los aminoácidos esenciales, las vitaminas y las sales inorgánicas necesarias para favorecer el crecimiento tanto de células primarias como de líneas celulares establecidas en condiciones de cultivo estándar. Esta formulación líquida, lista para usar y filtrada estérilmente, se complementa con la solución salina equilibrada de Earle (EBSS), 2 mM de L-glutamina, D-glucosa (1,0 g/L) y 2,2 g/L de bicarbonato sódico (NaHCO₃), lo que la hace adecuada para su uso en una atmósfera de incubadora con control de CO₂ (normalmente un 5 % de CO₂). El rojo de fenol incluido actúa como indicador de pH, lo que permite un cómodo control visual del estado del medio durante el cultivo celular. Características principales • Fórmula clásica del MEM de Eagle con la solución salina equilibrada de Earle (EBSS) • Incluye 2 mM de L-glutamina: listo para su uso inmediato • 2,2 g/L de bicarbonato de sodio: tamponado para la incubación con un 5 % de CO₂ • Con D-glucosa (1,0 g/L) como fuente principal de carbono • Con rojo de fenol como indicador de pH • Sin HEPES y sin piruvato de sodio • Medio líquido filtrado estéril, listo para su uso • pH 7,0 – 7,6 Aplicaciones típicas El EMEM permite el cultivo de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, entre las que se incluyen HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 y numerosas células primarias. Entre sus aplicaciones más habituales se encuentran: • Mantenimiento rutinario y expansión de líneas celulares adherentes • Flujos de trabajo de propagación de virus y producción de vacunas • Aplicaciones de citotoxicidad y bioensayos • Estudios de transfección y expresión proteica • Investigación básica en biología celular y biología molecular Para un crecimiento celular óptimo, el medio EMEM suele complementarse con un 5-10 % de suero fetal bovino (FBS) y, dependiendo de la línea celular, con aminoácidos no esenciales (NEAA) y antibióticos como la penicilina y la estreptomicina. Manipulación y almacenamiento Almacenar el frasco sin abrir a una temperatura comprendida entre +2 °C y +8 °C, protegido de la luz. Una vez abierto, utilizar en condiciones asépticas. La L-glutamina en solución está sujeta a una degradación gradual; recomendamos utilizar el medio en un plazo de 4 semanas tras su apertura para obtener un rendimiento óptimo, o bien añadir L-glutamina fresca antes de su uso si se almacena durante períodos más largos. Deje que el medio alcance una temperatura de 37 °C antes de añadirlo a las células. Calidad Fabricado bajo estrictas normas de calidad. Cada lote se somete a pruebas de esterilidad, pH, osmolalidad y niveles de endotoxinas para garantizar un rendimiento constante en aplicaciones de cultivo celular. Especificaciones del producto Especificaciones Detalle Tipo de productoMEM Categoría del productoMedios de cultivo celular FormatoLíquido EstérilSí Tamaño500 ml L-glutaminaCon L-glutamina (2 mM) GlucosaCon glucosa (1,0 g/L) Bicarbonato sódicoCon NaHCO₃ (2,2 g/L) HEPESSin HEPES Piruvato de sodioSin piruvato sódico Rojo de fenolCon rojo de fenol Solución salinaSolución salina equilibrada de Earle (EBSS) pH7,0 – 7,6 Contenido de endotoxinasNo especificado AlmacenamientoDe +2 °C a +8 °C Formulación (composición por litro)

€25.00

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Cytion Endothelial cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850176

Medio de cultivo para células endoteliales

El medio de crecimiento para células endoteliales es el medio estándar para el cultivo de células endoteliales humanas procedentes de vasos sanguíneos de gran calibre, como la vena umbilical, la arteria umbilical, la vena safena y la aorta. El medio completo contiene suero fetal bovino, L-glutamina, ECGS/H (suplemento de crecimiento de células endoteliales con heparina), EGF, bFGF e hidrocortisona. Para factores de crecimiento recombinantes definidos, incluido el VEGF en lugar del ECGS/H, elija el medio de crecimiento avanzado para células endoteliales. Ofrecemos el medio en forma de medio basal de 500 ml, solo o junto con los suplementos, ya sea como componentes individuales o como una mezcla de suplementos premezclada. Los componentes individuales permiten ajustar u omitir factores concretos, mientras que la mezcla de suplementos se añade en un solo paso. El medio basal también está disponible sin rojo de fenol en los mismos formatos, lo que evita interferencias con las lecturas fluorescentes y colorimétricas, así como la débil actividad estrogénica del rojo de fenol. Para su uso se requieren suplementos, y ambos formatos de suplementos también están disponibles por separado. Una vez suplementado, el medio completo contiene un 2 % de FCS (10 ml por cada 500 ml de medio basal).

€200.00

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Cytion Endothelial cell proliferation medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850002

Medio de proliferación de células endoteliales

El medio de proliferación de células endoteliales está diseñado para la rápida expansión de células endoteliales humanas procedentes de vasos de gran calibre, como la vena umbilical, la arteria umbilical, la vena safena, la aorta y las arterias coronarias y pulmonares. El medio completo contiene suero fetal bovino, L-glutamina, heparina, EGF, bFGF, VEGF, IGF-1 Long R3, ácido ascórbico e hidrocortisona. Si se desea un menor contenido de suero, se recomienda elegir el medio avanzado de crecimiento de células endoteliales. Ofrecemos el medio en formato de 500 ml de medio basal, solo o junto con los suplementos, ya sea como componentes individuales o como una mezcla de suplementos premezclada. Los componentes individuales permiten ajustar u omitir factores concretos, mientras que la mezcla de suplementos se añade en un solo paso. El medio basal también está disponible sin rojo de fenol en los mismos formatos, lo que evita interferencias con las lecturas fluorescentes y colorimétricas, así como la débil actividad estrogénica del rojo de fenol. Para su uso se requieren suplementos, y ambos formatos de suplementos también están disponibles por separado. Una vez suplementado, el medio completo contiene un 7 % de FCS (35 ml por cada 500 ml de medio basal).

€170.00

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500 ml bottle Fetal Bovine Serum South America Origin (FBS)

FBS Sudamérica 500 ml

Este suero fetal bovino (FBS), procedente de ganado bovino sudamericano y filtrado de forma estéril, garantiza un rendimiento constante en los cultivos celulares. Antes de su comercialización, cada lote se somete a pruebas de esterilidad, micoplasmas y virus bovinos. Además, cada lote se evalúa para verificar su capacidad para favorecer el crecimiento de células HEK293 y CHO. El suero está disponible en volúmenes de 50 ml y 500 ml, y se puede proporcionar un certificado de análisis (CoA) específico para cada lote previa solicitud.

€310.00

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50 ml bottle Fetal Bovine Serum South America Origin (FBS)

FBS South Origin 50 ml

€32.00

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FBS EE. UU. 500 ml

Este suero fetal bovino (FBS), procedente de Estados Unidos y filtrado de forma estéril, proporciona una base constante para aplicaciones de cultivo celular. Cada lote se somete a controles de calidad para detectar esterilidad, micoplasmas y virus bovinos. Además, cada lote se somete a una validación biológica para confirmar su capacidad para favorecer el crecimiento de las líneas celulares CHO y HEK293. El suero se presenta en envases de 50 ml y 500 ml. Se pueden solicitar certificados de análisis (CoA) específicos para cada lote.

€506.00

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500 ml bottle Fetal Bovine Serum US Origin (FBS)

FBS US Origin 50 ml

Este suero fetal bovino (FBS), procedente de Estados Unidos y filtrado de forma estéril, proporciona una base constante para aplicaciones de cultivo celular. Cada lote se somete a controles de calidad para verificar su esterilidad y la ausencia de micoplasmas y virus bovinos. Además, cada lote se somete a una validación biológica para confirmar su capacidad para favorecer el crecimiento de las líneas celulares CHO y HEK293. El suero se presenta en envases de 50 ml y 500 ml. Se pueden solicitar certificados de análisis (CoA) específicos para cada lote.

€52.00

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Cytion Fibroblast growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850066

Medio de cultivo para fibroblastos

El medio de crecimiento para fibroblastos se utiliza para el cultivo de fibroblastos humanos, por ejemplo, procedentes de la dermis o la encía. Para un cultivo de mantenimiento sin suero en condiciones definidas, elija el medio de mantenimiento definido para fibroblastos. Ofrecemos el medio en forma de medio basal de 500 ml, solo o junto con los suplementos, ya sea como componentes individuales o como una mezcla de suplementos premezclada. Los componentes individuales permiten ajustar u omitir factores concretos, mientras que la mezcla de suplementos se añade en un solo paso. El medio basal también está disponible sin rojo de fenol en los mismos formatos, lo que evita interferencias con las lecturas fluorescentes y colorimétricas, así como la débil actividad estrogénica del rojo de fenol. Para su uso se requieren suplementos, y ambos formatos de suplementos también están disponibles por separado. Una vez suplementado, el medio completo contiene un 10 % de FCS (50 ml por cada 500 ml de medio basal).

€180.00

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Medio de congelación CM-1 - 100 ml

El medio de congelación CM-1 de Cytion es un medio de crioconservación de última generación diseñado para garantizar el máximo nivel de viabilidad y funcionalidad celular tras la descongelación. Este medio versátil es adecuado para una amplia gama de tipos celulares, incluidas tanto las células humanas como las animales, lo que lo convierte en una herramienta esencial para diversas aplicaciones de investigación. Formulado con una combinación meticulosamente equilibrada de crioprotectores y nutrientes esenciales, el Freeze Medium CM-1 minimiza la formación de cristales de hielo y el estrés celular durante el proceso de congelación, preservando así la integridad celular. Las características principales del medio de congelación CM-1 incluyen: • Amplia compatibilidad: eficaz para una amplia gama de tipos celulares, incluidas las células primarias, las células madre y las líneas celulares establecidas. • Alta viabilidad: optimizado para maximizar la recuperación y la viabilidad celular tras la descongelación, lo que garantiza resultados experimentales fiables. • Listo para usar: convenientemente preparado y esterilizado para su aplicación inmediata, lo que reduce el tiempo de preparación y el riesgo de contaminación. • Estabilidad mejorada: mantiene un rendimiento constante en condiciones estándar de crioconservación, lo que garantiza resultados reproducibles. • Larga vida útil: el CM-1 es un medio de crioconservación listo para usar que contiene suero y que puede almacenarse en el frigorífico hasta un año. Uso del CM-1 para la congelación de células Para utilizar el CM-1 en la congelación tanto de células adherentes como en suspensión, siga estos pasos: • En el caso de las células adherentes, lávelas y disociarlas del sustrato de cultivo. En el caso de las células en suspensión, pase directamente al siguiente paso. • Cuente las células para asegurarse de que se encuentran en la concentración adecuada. • Centrifuga las células para obtener un sedimento y, a continuación, resuspendelas en el medio de congelación CM-1. • Transfiera las células resuspendidas a criotubos. • Utilice un método de congelación lenta antes de transferir las células al almacenamiento a largo plazo. Método Descripción Pasos ❄️ Congelación manual Método paso a paso que implica una reducción gradual de la temperatura para garantizar la viabilidad celular. 1️⃣ Coloca las células en medio de congelación en un congelador a 4 °C durante 40 minutos. 2️⃣ Transfiérelas a un congelador a -80 °C durante 24 horas. 3️⃣ Conserva las células en nitrógeno líquido para su conservación a largo plazo. ❄️ Uso de Mr. Frosty Un práctico dispositivo que permite controlar la velocidad de congelación sin necesidad de alimentación eléctrica. 1️⃣ Prepara las células en criotubos con medio de congelación. 2️⃣ Coloca los criotubos en el recipiente de Mr. Frosty. 3️⃣ Conserva a -80 °C durante 24 horas antes de transferirlas a nitrógeno líquido. ❄️ Congelador de velocidad controlada Un congelador de alta precisión de Thermo Fisher u otros fabricantes, diseñado para la reducción controlada de la temperatura. 1️⃣ Programa el dispositivo para que la temperatura disminuya gradualmente. 2️⃣ Coloca las células preparadas en el congelador. 3️⃣ Tras el ciclo de congelación, transfiere las células al nitrógeno líquido. • Conserva los criotubos a temperaturas inferiores a -130 °C o en nitrógeno líquido para su conservación a largo plazo. Ingredientes • Contiene FBS, DMSO, glucosa y sales • Capacidad tampón: pH = 7,2 a 7,6 El medio de congelación CM-1 de Cytion ofrece una solución fiable para la crioconservación, garantizando una alta viabilidad celular y funcionalidad tras la descongelación para una amplia gama de aplicaciones de investigación.

€99.00

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Medio de congelación CM-1 - 50 ml

El Freeze Medium CM-1 de Cytion es un medio de crioconservación de última generación diseñado para garantizar el máximo nivel de viabilidad y funcionalidad celular tras la descongelación. Este medio versátil es adecuado para una amplia gama de tipos celulares, incluidas tanto las células humanas como las animales, lo que lo convierte en una herramienta esencial para diversas aplicaciones de investigación. Formulado con una combinación meticulosamente equilibrada de crioprotectores y nutrientes esenciales, el Freeze Medium CM-1 minimiza la formación de cristales de hielo y el estrés celular durante el proceso de congelación, preservando así la integridad celular. Las características principales del medio de congelación CM-1 incluyen: • Amplia compatibilidad: eficaz para una amplia gama de tipos celulares, incluidas las células primarias, las células madre y las líneas celulares establecidas. • Alta viabilidad: optimizado para maximizar la recuperación y la viabilidad celular tras la descongelación, lo que garantiza resultados experimentales fiables. • Listo para usar: convenientemente preparado y esterilizado para su aplicación inmediata, lo que reduce el tiempo de preparación y el riesgo de contaminación. • Estabilidad mejorada: mantiene un rendimiento constante en condiciones estándar de crioconservación, lo que garantiza resultados reproducibles. • Larga vida útil: el CM-1 es un medio de crioconservación listo para usar que contiene suero y que puede almacenarse en el frigorífico hasta un año. Uso del CM-1 para la congelación de células Para utilizar el CM-1 en la congelación tanto de células adherentes como en suspensión, siga estos pasos: • En el caso de las células adherentes, lávelas y disociarlas del sustrato de cultivo. En el caso de las células en suspensión, pase directamente al siguiente paso. • Cuente las células para asegurarse de que se encuentran en la concentración adecuada. • Centrifuga las células para obtener un sedimento y, a continuación, resuspendelas en el medio de congelación CM-1. • Transfiera las células resuspendidas a criotubos. • Utilice un método de congelación lenta antes de transferir las células al almacenamiento a largo plazo. Método Descripción Pasos ❄️ Congelación manual Método paso a paso que implica una reducción gradual de la temperatura para garantizar la viabilidad celular. 1️⃣ Coloca las células en medio de congelación en un congelador a 4 °C durante 40 minutos. 2️⃣ Transfiérelas a un congelador a -80 °C durante 24 horas. 3️⃣ Conserva las células en nitrógeno líquido para su conservación a largo plazo. ❄️ Uso de Mr. Frosty Un práctico dispositivo que permite controlar la velocidad de congelación sin necesidad de alimentación eléctrica. 1️⃣ Prepara las células en criotubos con medio de congelación. 2️⃣ Coloca los criotubos en el recipiente de Mr. Frosty. 3️⃣ Conserva a -80 °C durante 24 horas antes de transferirlas a nitrógeno líquido. ❄️ Congelador de velocidad controlada Un congelador de alta precisión de Thermo Fisher u otros fabricantes, diseñado para la reducción controlada de la temperatura. 1️⃣ Programa el dispositivo para que la temperatura disminuya gradualmente. 2️⃣ Coloca las células preparadas en el congelador. 3️⃣ Tras el ciclo de congelación, transfiere las células a nitrógeno líquido. • Conserva los criotubos a temperaturas inferiores a -130 °C o en nitrógeno líquido para su conservación a largo plazo. Ingredientes • Contiene FBS, DMSO, glucosa y sales • Capacidad tampón: pH = 7,2 a 7,6 El medio de congelación CM-1 de Cytion ofrece una solución fiable para la crioconservación, garantizando una alta viabilidad celular y funcionalidad tras la descongelación para una amplia gama de aplicaciones de investigación.

€59.00

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Medio F12K de Ham, con: 2,0 mM de L-glutamina, con: 2,0 mM de piruvato de sodio, con: 2,5 g/L de NaHCO₃

Presentamos el medio Ham's F-12K (Kaighn's), una modificación especializada del medio Ham's F-12 diseñada para satisfacer los requisitos específicos de la investigación biológica. Este medio avanzado ofrece ventajas distintivas, ya que mejora el cultivo de hepatocitos humanos primarios, así como de células hepáticas de rata y pollo, especialmente en condiciones de bajo contenido en suero. El medio Ham's F-12K (Kaighn's) ha sido cuidadosamente formulado para optimizar las condiciones de cultivo celular. Presenta una composición enriquecida, que aporta niveles elevados de componentes esenciales, como aminoácidos y piruvato de sodio, así como elementos adicionales como putrescina, timidina, hipoxantina y zinc. Estas adiciones permiten a los investigadores complementar el medio con una cantidad mínima de suero o con componentes definidos para tipos celulares específicos, lo que facilita la creación de condiciones experimentales precisas. Cabe destacar que el medio F-12K (Kaighn) de Ham no contiene proteínas ni factores de crecimiento. Por consiguiente, a menudo es necesario añadir factores de crecimiento y suero fetal bovino (FBS), lo que permite a los investigadores adaptar el medio a los requisitos de sus líneas celulares específicas. Para obtener un rendimiento óptimo, la concentración de FBS debe ajustarse cuidadosamente para cada línea celular, garantizando así un crecimiento y una funcionalidad óptimos. Para mantener el pH fisiológico, el medio F-12K (Kaighn) de Ham emplea un sistema tampón de bicarbonato sódico (2,5 g/l), lo que requiere un entorno con un nivel controlado de CO₂ del 5-10 % durante el cultivo. Esto garantiza que el pH del medio se mantenga dentro del rango ideal para el crecimiento y la viabilidad celular. Control de calidad • pH = 7,2 ± 0,02 a 20-25 °C. • Se ha comprobado la esterilidad de cada lote, así como la ausencia de micoplasmas y bacterias. Conservación • Conservar refrigerado a una temperatura de +2 °C a +8 °C, al abrigo de la luz. Tanto la congelación como el calentamiento hasta +37 °C reducen la calidad del producto. • No caliente el medio a más de 37 °C ni utilice fuentes de calor incontrolables (por ejemplo, microondas). • Si solo se va a utilizar una parte del medio, extraiga dicha cantidad del frasco y caliéntela a temperatura ambiente. • El plazo de conservación de cualquier medio, salvo el medio básico, es de 8 semanas a partir de la fecha de fabricación. Composición Componentes mg/L Sales inorgánicas Cloruro de calcio x 2H₂O 135,24 Sulfato de cobre (II) x 5H₂O 0,00 Sulfato de hierro (II) x 7H₂O 0,83 Cloruro de magnesio x 6H₂O 105,72 Sulfato de magnesio x 7H₂O 394,49 Cloruro de potasio 283,29 Dihidrogenofosfato de potasio 58,52 Cloruro de sodio 7597,20 Hidrogenofosfato disódico anhidro 115,02 Sulfato de zinc x 7H₂O 0,14 Otros componentes D(+)-glucosa anhidra 1260,00 Hipoxantina 4,08 Ácido DL-α-lipoico 0,21 Rojo de fenol 3,00 Putrescina x 2HCl 0,32 Piruvato de sodio 220,00 NaHCO₃ 2500,00 Timidina 0,73 Aminoácidos L-alanina 17,82 L-arginina x HCl 421,40 L-asparagina x H₂O 30,02 Ácido L-aspártico 26,62 L-cisteína x HCl x H₂O 70,24 L-glutamina 292,20 Ácido L-glutámico 29,42 Glicina 15,01 L-histidina x HCl x H₂O 41,92 L-isoleucina 7,87 L-leucina 26,24 L-lisina x HCl 73,04 L-metionina 8,95 L-fenilalanina 9,91 L-prolina 69,06 L-serina 21,02 L-treonina 23,82 L-triptófano 4,08 L-tirosina 10,87 L-valina 23,42 Vitaminas D(+)-biotina 0,07 D-pantotenato de calcio 0,48 Cloruro de colina 13,96 Ácido fólico 1,32 mio-inositol 18,02 Nicotinamida 0,04 Piridoxina x HCl 0,06 Riboflavina 0,04 Tiamina x clorhidrato 0,34 Vitamina B12 1,36

€108.00

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Ham's F12 Medium, con: 1,0 mM de glutamina estable, con: 1,0 mM de piruvato de sodio, con: 1,176 g/L de NaHCO₃

El medio F-12 de Ham, también conocido como «mezcla de nutrientes F-12 de Ham», es un medio basal muy utilizado, diseñado específicamente para el cultivo celular. Se ha empleado ampliamente para el cultivo en placa de células individuales y sin suero de células de ovario de hámster chino (CHO), células pulmonares y células L de ratón. Además, el Ham’s F-12 es el medio de elección para el ensayo de toxicidad clonal (CTA). Una de sus ventajas más destacadas es su capacidad para favorecer el crecimiento celular sin necesidad de añadir suero. Esto elimina posibles interferencias causadas por los componentes del suero, lo que garantiza resultados experimentales consistentes y fiables. Al proporcionar un entorno de cultivo sin suero, el medio Ham's F-12 ofrece a los investigadores un mayor control sobre sus investigaciones. Otra característica clave del medio Ham’s F-12 es su idoneidad para el sembrado de células individuales. Esto lo convierte en una excelente opción para una gran variedad de líneas celulares, incluidas las células CHO, las células pulmonares y las células L de ratón. La composición nutricional optimizada del medio facilita la adhesión y el crecimiento eficaces de células individuales, lo que permite establecer cultivos celulares homogéneos con una reproducibilidad mejorada. Además, el medio F-12 de Ham ha ganado reconocimiento como el medio preferido para el ensayo de toxicidad clonal (CTA). Este ensayo desempeña un papel fundamental en la evaluación de los efectos citotóxicos de las sustancias sobre las células. Al utilizar el medio F-12 de Ham en el CTA, los investigadores pueden evaluar con precisión el impacto de diversos compuestos o tratamientos sobre células individuales, lo que proporciona información valiosa sobre los perfiles toxicológicos. Control de calidad • pH = 7,2 ± 0,02 a 20-25 °C. • Se ha comprobado la esterilidad de cada lote, así como la ausencia de micoplasmas y bacterias. Conservación • Conservar refrigerado a una temperatura comprendida entre +2 °C y +8 °C, al abrigo de la luz. La congelación y el calentamiento hasta +37 °C reducen la calidad del producto. • No caliente el medio a más de 37 °C ni utilice fuentes de calor incontrolables (por ejemplo, microondas). • Si solo se va a utilizar una parte del medio, extraiga dicha cantidad del frasco y caliéntela a temperatura ambiente. • El plazo de conservación de cualquier medio, excepto el medio básico, es de 8 semanas a partir de la fecha de fabricación. Composición Componentes mg/L Sales inorgánicas Cloruro de calcio x 2H₂O 44,00 Sulfato de cobre (II) x 5H₂O 0,00 Sulfato de hierro (II) x 7H₂O 0,83 Cloruro de magnesio x 6H₂O 122,00 Cloruro de potasio 223,65 Cloruro de sodio 7599,00 hidrogenofosfato disódico anhidro 142,04 Sulfato de zinc x 7H₂O 0,86 Otros componentes D(+)-glucosa anhidra 1801,60 Hipoxantina 4,08 Ácido linoleico 0,08 Ácido DL-α-lipoico 0,21 Rojo de fenol 1,20 Putrescina x 2HCl 0,16 Piruvato de sodio 110,00 Timidina 0,73 NaHCO₃ 1176,00 Aminoácidos L-alanina 8,91 L-arginina x HCl 210,70 L-asparagina x H₂O 15,01 Ácido L-aspártico 13,31 L-cisteína x HCl x H₂O 35,12 L-alanil-L-glutamina 217,30 Ácido L-glutámico 14,71 Glicina 7,51 L-histidina x HCl x H₂O 20,96 L-isoleucina 3,94 L-leucina 13,12 L-lisina x HCl 36,54 L-metionina 4,48 L-fenilalanina 4,96 L-prolina 34,53 L-serina 10,51 L-treonina 11,91 L-triptófano 2,04 L-tirosina 5,44 L-valina 11,71 Vitaminas D(+)-biotina 0,01 D-pantotenato cálcico 0,24 Cloruro de colina 13,96 Ácido fólico 1,32 mio-inositol 18,02 Nicotinamida 0,04 Piridoxina x HCl 0,06 Riboflavina 0,04 Tiamina x clorhidrato 0,34 Vitamina B12 1,36

€25.00

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HEPES Buffer Solution (1M)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered HEPES Buffer Solution (1 M), also known as N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid, is a zwitterionic organic buffering agent widely used in cell culture media. It is designed to maintain stable pH conditions in the physiological range of 6.7 to 8.6, supporting optimal cellular function during in vitro applications. Application and Benefits HEPES provides reliable buffering capacity in cell culture systems, particularly when cells are handled outside a CO₂ incubator. The addition of 10–25 mM HEPES to culture media offers enhanced pH stability during extended manipulation periods, helping to maintain consistent experimental conditions. This buffer is membrane-impermeable, has minimal interference with biochemical reactions, and demonstrates strong chemical and enzymatic stability. These properties make it suitable for a wide range of cell culture and biochemical applications. Formulation and Usage The solution is supplied as a 1 M concentrate prepared in cell culture–grade water and is sterile-filtered for use in contamination-sensitive environments. It can be diluted to the desired working concentration depending on application requirements. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to preserve product integrity. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

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IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

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Medios de cultivo celular: una visión general

En el ámbito de las ciencias de la vida, una de las metodologías más importantes es el cultivo celular. El término «cultivo celular» hace referencia a la extracción de células, tejidos u órganos de un animal o una planta y a su posterior implantación en un entorno artificial que favorezca su supervivencia y/o crecimiento. Las necesidades ambientales fundamentales para un desarrollo celular óptimo son una temperatura controlada, un sustrato para la adhesión celular, un medio de cultivo adecuado y una incubadora que mantenga el pH y la osmolalidad óptimos. Las células deben contar con estas condiciones para crecer hasta alcanzar su máximo potencial.

La selección de un medio de crecimiento adecuado para el cultivo in vitro es la etapa del cultivo celular que resulta a la vez la más crítica y la más vital. Un medio de crecimiento, también conocido como medio de cultivo, es un líquido o gel formulado para favorecer el desarrollo de organismos a escala microscópica, celular o vegetal. El medio utilizado para cultivar células suele contener un aporte adecuado de energía y sustancias que regulan el ciclo celular. Los componentes principales de un medio de cultivo incluyen aminoácidos, vitaminas, sales inorgánicas, glucosa y suero. El suero se añade al medio porque actúa como fuente de factores de crecimiento, hormonas y factores de adhesión. Además de proporcionar nutrientes, el medio también contribuye al mantenimiento de los niveles de pH y osmolalidad.

Tipos de medio utilizados en el cultivo celular

Tanto las células humanas como las animales pueden cultivarse en un medio artificial o sintético, o bien en un medio totalmente natural complementado con elementos naturales. A continuación, te ofrecemos una visión general de los diferentes tipos de medios disponibles en la actualidad.

Medios naturales

En los medios naturales solo se encuentran fluidos biológicos que existen en su estado natural. Los medios naturales son muy útiles y fáciles de utilizar para el cultivo de una amplia variedad de tipos de células animales. La falta de conocimiento sobre los componentes exactos que conforman los medios naturales es el principal factor que contribuye a la baja repetibilidad de los resultados obtenidos con ellos.

Medios artificiales

La preparación de medios artificiales o sintéticos implica la adición de nutrientes (tanto orgánicos como inorgánicos), proteínas séricas, hidratos de carbono, cofactores, vitaminas y sales, así como las fases gaseosas de O₂ y CO₂ [1].

Se han desarrollado diversos tipos de medios artificiales con el fin de cumplir una o varias de las siguientes funciones: 1) Supervivencia inmediata (una solución salina equilibrada con un pH y una presión osmótica precisos). 2) Supervivencia prolongada (una solución salina equilibrada suplementada con diferentes formulaciones de compuestos orgánicos y/o suero). 3) Desarrollo indefinido. 4) Funciones especializadas.

Existen cuatro clasificaciones distintas de los medios artificiales:

Medios que contienen suero

El tipo de suplemento más frecuente en los medios utilizados para el cultivo de células animales es el suero fetal bovino. Se añade al medio de cultivo como suplemento de bajo coste con el fin de lograr las mejores condiciones de crecimiento posibles. Además de actuar como transportador o quelante de nutrientes inestables o insolubles en agua, hormonas y factores de crecimiento, inhibidores de proteasas y otras sustancias, el suero también se une a las moléculas nocivas y las neutraliza.

Medios sin suero

La presencia de suero en los medios presenta una serie de desventajas y puede dar lugar a errores importantes de interpretación en la investigación inmunológica [2, 3]. Se han creado diversos medios sin suero [4, 5]. Estos medios suelen estar formulados específicamente para favorecer el cultivo de un único tipo de célula, como el Knockout Serum Replacement y el Knockout DMEM de Thermo Fisher Scientific, y el medio mTESR de Stem Cell Technologies [6], destinados a células madre [7].

Además, estos medios incorporan cantidades definidas de factores de crecimiento purificados, lipoproteínas y otras proteínas, que, de otro modo, suelen ser aportadas por el suero [8]. A menudo se hace referencia a estos medios como «medios de cultivo definidos», ya que se conocen bien los componentes que los conforman.

Medios químicamente definidos

Estos medios incluyen componentes inorgánicos y orgánicos ultrapuros que no han sufrido ningún tipo de contaminación. También pueden incluir adiciones de proteínas puras, como los factores de crecimiento.

La modificación genética de bacterias o levaduras, junto con la adición de determinados ácidos grasos, vitaminas, colesterol y aminoácidos, da lugar a la producción de sus componentes [9].

Medios sin proteínas

Los medios sin proteínas son aquellos que no contienen ninguna proteína y, en su lugar, solo incluyen elementos no proteicos. En comparación con los medios con suero añadido, el uso de medios sin proteínas añadidas favorece una mayor proliferación celular y expresión proteica, y facilita la purificación de cualquier producto generado en un proceso posterior [10-12]. Las proteínas no se incluyen en formulaciones como el MEM y el RPMI-1640. No obstante, se puede administrar un suplemento proteico si fuera necesario.

Medios de cultivo y sus componentes básicos

Los medios de cultivo comerciales pueden adquirirse en forma de polvo o de líquido y suelen incluir una variedad de nutrientes, como aminoácidos, glucosa, sales, vitaminas y otros suplementos dietéticos.

Las necesidades de estos componentes varían según cada línea celular, y estas variaciones son las responsables de la gran variedad de formulaciones de medios existentes. Cada componente desempeña una función determinada, que se describirá en los párrafos siguientes:

Sistemas tampón

Para mantener unas condiciones de crecimiento óptimas, es necesario controlar el pH, lo que suele hacerse mediante uno de estos dos sistemas tampón:

Sistema tampón natural

La proporción de CO₂/H₂CO₃ en la atmósfera es igual a la del medio, lo que crea un mecanismo tampón natural. Para preservar este mecanismo tampón natural, los cultivos deben mantenerse en un ambiente con un 5-10 % de CO₂, lo que suele conseguirse utilizando una incubadora de CO₂. Una de las principales ventajas de utilizar un tampón natural es su bajo coste y su seguridad.

HEPES

El tampón químico que utiliza el ión zwiteriónico HEPES tiene una mayor capacidad tampón en el rango de pH de 7,2-7,4 y no requiere un entorno gaseoso regulado. Para determinados tipos de células, una dosis elevada de HEPES puede resultar perjudicial. Los medios que contienen HEPES son, asimismo, mucho más susceptibles a los efectos fototóxicos de la luz fluorescente [13].

Rojo de fenol

El indicador de pH rojo de fenol suele incluirse en los medios de cultivo disponibles en el mercado, lo que permite un control continuo del pH. A medida que las células se multiplican, los metabolitos que producen provocan un cambio en el pH y, por lo tanto, un cambio de color del medio. El rojo de fenol tiene un doble efecto sobre el color del medio: lo tiñe de amarillo a pH ácido y de púrpura a pH alcalino. Un pH de 7,4, el valor óptimo para el cultivo celular, hace que el medio adquiera un color rojo fluorescente.

Sin embargo, el rojo de fenol presenta algunos inconvenientes: en primer lugar, es capaz de simular la acción de varias hormonas esteroides, principalmente el estrógeno [14]. Por lo tanto, al estudiar células sensibles al estrógeno, como el tejido mamario, se recomienda utilizar un medio sin rojo de fenol. La presencia de rojo de fenol en varias formulaciones sin suero altera el equilibrio sodio-potasio. La adición de suero o de hormona hipofisaria bovina a los medios puede contrarrestar este efecto [15]. En tercer lugar, la presencia de rojo de fenol dificulta la detección en los experimentos de citometría de flujo.

Sales inorgánicas

Los medios que contienen sales inorgánicas, como iones de sodio, potasio y calcio, ayudan a mantener el equilibrio osmótico y a regular el potencial de membrana.

Aminoácidos

Dado que los aminoácidos son los componentes fundamentales de las proteínas, constituyen un componente esencial de todos y cada uno de los medios de cultivo celular que se han concebido. Dado que las células son incapaces de producir ciertos aminoácidos por sí mismas, es importante que el medio de cultivo incluya aminoácidos esenciales. Son necesarios para la proliferación celular, y la concentración en la que están presentes determina la densidad celular máxima que se puede alcanzar. En particular, la L-glutamina, un aminoácido esencial, es especialmente crucial.

La L-glutamina actúa como fuente secundaria de energía para el metabolismo y aporta nitrógeno para la producción de NAD, NADPH y nucleótidos. Dado que la L-glutamina es un aminoácido inestable que, con el tiempo, se transforma en una forma que las células no pueden utilizar, debe añadirse al medio.

Además, se pueden añadir aminoácidos no esenciales al medio para reponer aquellos que se han consumido durante el proceso de crecimiento. El crecimiento de las células se potencia y su viabilidad aumenta cuando el medio de cultivo se complementa con aminoácidos no esenciales.

Hidratos de carbono

Los hidratos de carbono en forma de azúcares son la principal fuente de energía. Muchos de los medios también incluyen maltosa y fructosa, además de los azúcares más comunes, como la glucosa y la galactosa.

Proteínas y péptidos

La albúmina, la transferrina y la fibronectina son las proteínas y los péptidos más utilizados. Son especialmente importantes en los medios que no contienen suero. La albúmina, la transferrina, la aprotinina, la fetuina y la fibronectina son algunas de las proteínas que pueden encontrarse en el suero, que constituye una rica fuente de proteínas.

La albúmina es la principal proteína presente en la sangre, y su función consiste en unir y transportar diversas sustancias —como agua, sales, ácidos grasos libres, hormonas y vitaminas— entre los distintos órganos y células. La capacidad de la albúmina para unirse a sustancias químicas la convierte en una opción eficaz para eliminar compuestos nocivos del medio en el que se cultivan las células.

La aprotinina es un agente protector en los sistemas de cultivo celular, ya que es estable a pH neutro y ácido, además de resistente a las altas temperaturas y a la destrucción que pueden causar las enzimas proteolíticas. Es capaz de inhibir varias proteasas de serina, entre ellas la tripsina, entre otras.

La fetuina es una glicoproteína que puede detectarse en cantidades mayores en el suero de animales fetales y recién nacidos en comparación con el suero de adultos. Además, actúa como inhibidor de las proteasas de serina. La proteína fibronectina es un componente esencial en el proceso de adhesión celular. La transferrina es una proteína que transporta hierro y se encarga de suministrarlo a las membranas celulares.

Ácidos grasos y lípidos

Desempeñan un papel crucial en los medios sin suero cuando este no está presente.

Vitaminas

Son necesarias numerosas vitaminas para el desarrollo y la proliferación celular. Las células no pueden producir vitaminas en cantidades suficientes, por lo que son esenciales en el cultivo de tejidos como suplementos dietéticos.

En el cultivo celular, el suero es la principal fuente de vitaminas; sin embargo, los medios también se enriquecen con diversas vitaminas para adaptarlos a un tipo específico de célula. Lo más habitual es que se utilicen las vitaminas del grupo B para estimular el crecimiento.

Oligoelementos

Los elementos químicos como el cobre, el zinc, el selenio y los intermedios del ciclo del ácido tricarboxílico se conocen como oligoelementos. A menudo se añaden oligoelementos a los medios que no contienen suero para sustituir a los que suelen estar presentes en este. Estos elementos son componentes químicos importantes que se requieren para un desarrollo celular saludable. Muchas reacciones bioquímicas dependen de determinados micronutrientes, como la actividad enzimática.

Suplementos para los medios de cultivo

El medio de crecimiento completo recomendado para determinadas líneas celulares requiere componentes adicionales que no están presentes en los medios de referencia ni en el suero. Estos suplementos dietéticos favorecen el crecimiento celular y el funcionamiento metabólico adecuado.

Aunque las hormonas, los factores de crecimiento y las moléculas de señalización son esenciales para la proliferación adecuada de determinadas líneas celulares, siempre deben tomarse las siguientes precauciones: dado que la adición de suplementos podría alterar la osmolalidad del medio de crecimiento completo, lo que puede inhibir el desarrollo celular, siempre es recomendable verificar la osmolalidad tras añadir los suplementos. Para la mayoría de las líneas celulares, la osmolalidad óptima oscila entre 260 y 320 mOSM/kg.

Antibióticos

Los antibióticos se emplean a menudo para inhibir el desarrollo de contaminantes bacterianos y fúngicos [16], aunque no son esenciales para el crecimiento celular. Dado que los antibióticos podrían enmascarar la contaminación por micoplasmas y bacterias resistentes, no se recomienda su uso rutinario en el cultivo celular [17, 18].

Además, los antibióticos pueden alterar el metabolismo de las células hipersensibles. Se suelen utilizar las combinaciones de penicilina y estreptomicina fabricadas por MilliporeSigma y Life Technologies. La plasmocina se ha utilizado en el cultivo de las líneas celulares de glioma TS603, TS516 y BT260 [19], y se ha demostrado su eficacia para eliminar la contaminación por micoplasmas (20).

Suero

En el suero se encuentran albúminas, factores de crecimiento e inhibidores del crecimiento. El suero es uno de los componentes más importantes del medio de cultivo celular, ya que aporta aminoácidos, proteínas, vitaminas (especialmente las liposolubles, como la A, la D, la E y la K), hidratos de carbono, lípidos, hormonas, factores de crecimiento, minerales y oligoelementos.

A menudo se utiliza suero de origen fetal y de ternera para favorecer el desarrollo de las células en cultivo. El suero fetal es una fuente abundante de factores de crecimiento y resulta adecuado para la clonación celular y el desarrollo de células sensibles. Debido a su menor capacidad para promover el crecimiento, el suero de ternera se emplea en experimentos de inhibición por contacto. Los medios de cultivo normales suelen contener entre un 2 % y un 10 % de suero. La adición de suero al medio de cultivo tiene los siguientes fines [21]:

El suero aporta los nutrientes esenciales para las células (tanto en solución como unidos a proteínas).
El suero contiene varios factores de crecimiento y hormonas que intervienen en la promoción del crecimiento y en la actividad celular especializada.
Aporta numerosas proteínas de unión, como la albúmina y la transferrina, que transportan otras sustancias químicas al interior de la célula. Por ejemplo, la albúmina transporta grasas, vitaminas, hormonas, etc., a las células.
También aporta proteínas, como la fibronectina, que aumentan la adhesión celular al sustrato. Además, produce elementos de extensión que favorecen la expansión celular antes de la división.
Aporta inhibidores de proteasas que impiden la proteólisis en las células.
También contiene minerales como Na+, K+, Zn2+ y Fe2+.
Aumenta la viscosidad del medio, protegiendo así a las células de lesiones mecánicas durante la agitación del cultivo en suspensión.
Además, actúa como tampón.

Referencias

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Nutrición de células animales en cultivo tisular; estudios iniciales sobre un medio sintético. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Rápida adsorción de un componente del suero fetal bovino por parte de células de mamíferos en cultivo. Una posible fuente de artefactos en los estudios de antisueros contra antígenos específicos de células. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. La adición de suero al medio utilizado para la preparación de suspensiones celulares como posible fuente de artefactos en reacciones mediadas por células estudiadas mediante la prueba del ganglio linfático poplíteo. J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Medios comerciales sin suero: crecimiento de hibridomas y producción de anticuerpos monoclonales. J Immunol Methods. 1991;145:175-83

[5] Barnes D, Sato G. Métodos para el crecimiento de células en cultivo en medio sin suero. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vázquez Sánchez S, Tapia O, et al. Las proteínas chaperonas HSP70 transportan la TDP-43, libre de ARN, a caparazones esféricas líquidas intranucleares anisotrópicas. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, et al. La senescencia inducida por el síndrome de Down altera la arquitectura nuclear de los progenitores neurales. Cell Stem Cell. 2022;29:116-130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Sustitución completa del suero por albúmina, transferrina y lípidos de soja en cultivos de linfocitos B reactivos a lipopolisacáridos. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Mejora sistemática de un medio químicamente definido y libre de proteínas para el crecimiento de hibridomas y la producción de anticuerpos monoclonales. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] Darfler F. Un medio libre de proteínas para el crecimiento de hibridomas y otras células del sistema inmunitario. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Barnes D, Sato G. Cultivo celular sin suero: un enfoque unificador. Cell. 1980;22:649-55

[12] Hamilton W, Ham R. Crecimiento clonal de líneas celulares de hámster chino en medios sin proteínas. In Vitro. 1977;13:537-47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Análisis de los efectos citotóxicos de un medio de cultivo que contiene HEPES expuesto a la luz. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. El rojo de fenol presente en los medios de cultivo tisular es un estrógeno débil: implicaciones para el estudio de células sensibles a los estrógenos en cultivo. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] Karmiol S. Desarrollo de medios sin suero. En: Master JRW, editor. Cultivo de células animales, 3.ª ed. Oxford: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Uso de antibióticos en los medios de cultivo celular. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Propagación y control de la infección por micoplasmas en cultivos celulares. In Vitro. 1976;12:643-8

[18] Masters J, Stacey G. Cambio de medio y pases de líneas celulares. Nat Protoc. 2007;2:2276-84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M, et al. La desmetilasa de histonas KDM6A detecta directamente el oxígeno para controlar la cromatina y el destino celular. Science. 2019;363:1217-1222

[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M, et al. Eficacia de Plasmocin™ en diversas líneas celulares de mamíferos infectadas por mollicutes en comparación con los antibióticos de uso habitual en cultivos celulares: una experiencia local. Cytotechnology. 2011;63:609-20

[21] Kragh Hansen U. Aspectos moleculares de la unión de ligandos a la albúmina sérica. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53