Gå direkt till innehållet

Media och reagenser

40 produkter

Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

exkl. moms och frakt

Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€310.00

exkl. moms och frakt

Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

exkl. moms och frakt

DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/l NaHCO₃

DMEM:Ham’s F12 är ett allmänt erkänt och mycket använt basmedium inom cellodling för biologisk forskning. Det fungerar som en grundläggande näringskälla för tillväxten av olika däggdjurscellinjer, särskilt när det kompletteras med fetalt bovint serum (FBS). Denna unika sammansättning kombinerar Dulbeccos modifierade Eagle-medium (DMEM) och Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) i ett exakt förhållande på 1:1. Tillsatsen av L-glutamin förbättrar sammansättningen ytterligare. DMEM, som härstammar från Eagles Minimal Essential Medium (EMEM), erbjuder en högre koncentration av aminosyror och vitaminer jämfört med sin föregångare. Ham's F-12 är däremot baserat på Ham's F-10-medium och tillför en kompletterande uppsättning av väsentliga komponenter. För att främja optimal celltillväxt är det vanligt att komplettera DMEM:Ham's F12 med FBS i en typisk koncentration på 5–10 %. Detta tillskott är nödvändigt eftersom mediet saknar tillväxthormoner, lipider och proteiner som är avgörande för cellernas utveckling. DMEM:Ham's F12 innehåller ett pH-buffertsystem och kompletteras ofta med fenolrött, en pH-indikator. Odlade celler i DMEM:Ham's F12, eller vilket medium som helst som använder bikarbonatbuffertsystemet, kräver en kontrollerad CO₂-miljö på 5–10 % för att upprätthålla lämpliga pH-nivåer. Kvalitetskontroll • Sterilfiltrerat Förvaring och hållbarhet • Förvaras vid +2 °C till +8 °C, skyddat från ljus. • Efter öppnandet ska produkten förvaras vid 4 °C och användas inom 6–8 veckor. Transportvillkor • Rumstemperatur Förvaring • Förvara i kylskåp vid +2 °C till +8 °C i mörker. Undvik frysning och upprepade uppvärmningar till +37 °C, eftersom detta försämrar produktens kvalitet. • Värm inte mediet till över 37 °C och använd inte okontrollerade värmekällor, såsom mikrovågsugnar. • Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm den till rumstemperatur före användning. Sammansättning Kategori Beståndsdelar Koncentration (mg/l) Aminosyror Glycin 18,75 L-alanin 4,45 L-arginin-HCl 147,50 L-asparagin H₂O 7,50 L-asparaginsyra 6,65 L-cystein HCl H₂O 17,56 L-cystin-2-HCl 31,29 L-glutaminsyra 7,35 L-glutamin 365,00 L-histidin-HCl-H₂O 31,48 L-isoleucin 54,47 L-leucin 59,05 L-lysin-HCl 91,25 L-metionin 17,24 L-fenylalanin 35,48 L-prolin 17,25 L-serin 26,25 L-treonin 53,45 L-tryptofan 9,02 L-tyrosin 2 Na 2 H₂O 55,79 L-valin 52,85 Vitaminer D-biotin 0,0035 Kolin klorid 8,98 D-kalciumpantotenat 2,24 Folsyra 2,66 myo-inositol 12,60 Nikotinamid 2,02 Pyridoxin-HCl 0,031 Pyridoxal-HCl 2,00 Riboflavin 0,219 Tiamin-HCl 2,17 Vitamin B12 0,68 Oorganiska salter CaCl₂·2 H₂O 154,50 CuSO₄·5H₂O 0,0013 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,05 FeSO₄·7H₂O 0,417 KCl 311,80 MgCl₂·6 H₂O 61,20 MgSO₄·7 H₂O 100,00 NaCl 6996,00 NaHCO₃ 1200,00 Na₂HPO₄ 71,02 NaH₂PO₄·2 H₂O 70,87 ZnSO₄·7 H₂O 0,432 Övriga beståndsdelar D-glukos 3151,00 Hypoxantin 2,40 HEPES 3574,50 Linolsyra 0,042 Liponsyra 0,105 Fenolrött natriumsalt 8,63 Putrescin-2-HCl 0,081 Natriumpyruvat 55,00 Tymidin 0,365

€25.00

exkl. moms och frakt

DMEM, v: 4,5 g/l glukos, v: 4 mM L-glutamin, v: 3,7 g/l NaHCO₃, v: 1,0 mM natriumpyruvat

DMEM (Dulbeccos modifierade Eagle-medium) är ett mycket mångsidigt och allmänt använt basmedium som är utformat för att främja tillväxten av ett brett spektrum av däggdjursceller inom biologisk forskning. Det fungerar som ett idealiskt medium för odling av primära fibroblaster, neuroner, gliaceller, HUVEC-celler, glatta muskelceller samt populära cellinjer som HeLa, 293, Cos-7 och PC-12. Det som skiljer DMEM från andra medier är dess unika sammansättning. Det innehåller en imponerande fyrfaldig ökning av aminosyra- och vitaminkoncentrationen jämfört med det ursprungliga Eagle's Minimal Essential Medium. DMEM utvecklades ursprungligen med låg glukoshalt (1 g/l) och natriumpyruvat, men används ofta med högre glukosnivåer, antingen med eller utan natriumpyruvat. Det är värt att notera att DMEM inte innehåller proteiner, lipider eller tillväxtfaktorer, vilket kräver tillskott. För att uppnå optimal tillväxt är ett vanligt tillvägagångssätt att komplettera DMEM med 10 % fetalt bovint serum (FBS). Dessutom använder DMEM ett natriumbikarbonatbuffertsystem, vilket kräver en miljö med 5–10 % CO₂ för att upprätthålla ett fysiologiskt pH-värde. Dulbeccos modifierade Eagle-medium (DMEM) är högt ansett bland definierade medier för cell- och vävnadsodling och tillgodoser tillväxtbehoven hos olika fenotyper av vidhäftande celler. Det överträffar det ursprungliga Eagle's Medium, som utvecklades på 1950-talet för odling av kycklingceller, tack vare den förbättrade tillskottsformuleringen som kallas Dulbeccos modifiering. Denna modifiering höjer halten av utvalda aminosyror och vitaminer avsevärt, upp till fyra gånger jämfört med det ursprungliga mediet. Inom cellodling spelar DMEM en avgörande roll som tillväxtmedium för olika celltyper, däribland primära celler, stamceller och transformerade celler. Forskare använder även den modifierade versionen av DMEM för ett brett spektrum av forskningsändamål, såsom läkemedelsutveckling, vävnadsteknik och studier av cellsignaleringsvägar. Kvalitetskontroll • Sterilfiltrerat Förvaring och hållbarhet • Förvaras vid +2 °C till +8 °C, skyddat från ljus. • Efter öppnandet ska produkten förvaras vid 4 °C och användas inom 6–8 veckor. Transportvillkor • Rumstemperatur Förvaring • Förvara i kylskåp vid +2 °C till +8 °C i mörker. Undvik frysning och upprepade uppvärmningar till +37 °C, eftersom detta försämrar produktens kvalitet. • Värm inte mediet till över 37 °C och använd inte okontrollerade värmekällor såsom mikrovågsugnar. • Om endast en del av mediet ska användas, ta ut den mängd som behövs och värm den till rumstemperatur före användning. Sammansättning Kategori Beståndsdelar Koncentration (mg/l) Aminosyror Glycin 30,00 L-arginin-HCl 84,00 L-cystin-2-HCl 62,57 L-glutamin 584,00 L-histidin-HCl-H₂O 42,00 L-isoleucin 105,00 L-leucin 105,00 L-lysin-HCl 146,00 L-metionin 30,00 L-fenylalanin 66,00 L-serin 42,00 L-treonin 95,00 L-tryptofan 16,00 L-tyrosin 2 Na 2H₂O 103,79 L-valin 94,00 Vitaminer Kolin klorid 4,00 D-kalciumpantotenat 4,00 Folsyra 4,00 myo-inositol 7,20 Nikotinamid 4,00 Pyridoxal-HCl 4,00 Riboflavin 0,40 Tiamin-HCl 4,00 Oorganiska salter CaCl₂·2 H₂O 265,00 Fe(NO₃)₃·9 H₂O 0,10 KCl 400,00 MgSO₄·7H₂O 200,10 NaCl 6400,00 NaHCO₃ 3700,00 NaH₂PO₄·2H₂O 141,73 Övriga beståndsdelar D-glukos 4500,00 Fenolrött natriumsalt 15,90 Natriumpyruvat 110,00

€25.00

exkl. moms och frakt

EMEM (MEM Eagle), innehåller: 2 mM L-glutamin, innehåller: 2,2 g/L NaHCO₃, innehåller: EBSS

Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) är ett av de mest använda basmedierna för odling av ett brett spektrum av däggdjursceller, särskilt vidhäftande cellinjer. Denna klassiska formulering, som ursprungligen utvecklades av Harry Eagle, innehåller de essentiella aminosyrorna, vitaminerna och de oorganiska salterna som krävs för att stödja tillväxten av både primära celler och etablerade cellinjer under standardodlingsförhållanden. Denna färdigblandade, sterilt filtrerade flytande formulering är berikad med Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS), 2 mM L-glutamin, D-glukos (1,0 g/l) och 2,2 g/l natriumbikarbonat (NaHCO₃), vilket gör den lämplig för användning i en CO₂-kontrollerad inkubatoratmosfär (vanligtvis 5 % CO₂). Det medföljande fenolrött fungerar som en pH-indikator, vilket möjliggör enkel visuell övervakning av mediets tillstånd under cellodlingen. Viktiga egenskaper • Klassisk Eagles MEM-formulering med Earles balanserade saltlösning (EBSS) • Innehåller 2 mM L-glutamin – redo för omedelbar användning • 2,2 g/l natriumbikarbonat – buffrat för inkubation med 5 % CO₂ • Med D-glukos (1,0 g/l) som primär kolkälla • Med fenolrött som pH-indikator • Utan HEPES och utan natriumpyruvat • Sterilfiltrerat flytande medium, klart för användning • pH 7,0–7,6 Typiska tillämpningar EMEM lämpar sig för odling av en mängd olika däggdjurscellinjer, däribland HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 och många primärceller. Vanliga användningsområden är: • Rutinmässig underhållsodling och expansion av vidhäftande cellinjer • Arbetsflöden för virusförökning och vaccinproduktion • Cytotoxicitets- och bioassay-tillämpningar • Studier av transfektion och proteinexpression • Grundforskning inom cellbiologi och molekylärbiologi För optimal celltillväxt kompletteras EMEM vanligtvis med 5–10 % fetalt bovint serum (FBS) och, beroende på cellinjen, med icke-essentiella aminosyror (NEAA) och antibiotika såsom penicillin/streptomycin. Hantering och förvaring Förvara den oöppnade flaskan vid +2 °C till +8 °C, skyddad från ljus. Efter öppnandet ska produkten användas under aseptiska förhållanden. L-glutamin i lösning bryts gradvis ned – vi rekommenderar att mediet används inom 4 veckor efter öppnandet för bästa resultat, eller att det kompletteras med färskt L-glutamin före användning om det förvaras under längre perioder. Låt mediet värmas upp till 37 °C innan det tillsätts till cellerna. Kvalitet Tillverkat enligt strikta kvalitetsstandarder. Varje sats testas med avseende på sterilitet, pH, osmolalitet och endotoxinnivåer för att säkerställa jämn prestanda vid cellodling. Produktspecifikationer Specifikation Detalj ProdukttypMEM ProduktkategoriCellodlingsmedier FormatFlytande SteriltJa Storlek500 ml L-glutaminMed L-glutamin (2 mM) GlukosMed glukos (1,0 g/l) NatriumbikarbonatMed NaHCO₃ (2,2 g/L) HEPESUtan HEPES NatriumpyruvatUtan natriumpyruvat FenolröttMed fenolrött SaltlösningEarles balanserade saltlösning (EBSS) pH7,0 – 7,6 EndotoxinhaltEj angivet Förvaring+2 °C till +8 °C Sammansättning (per liter)

€25.00

exkl. moms och frakt

Frysmedel CM-1 – 100 ml

Cytions Freeze Medium CM-1 är ett toppmodernt kryokonserveringsmedium som är utformat för att säkerställa högsta möjliga cellviabilitet och funktionalitet efter upptining. Detta mångsidiga medium lämpar sig för ett brett spektrum av celltyper, inklusive både mänskliga och djurceller, vilket gör det till ett oumbärligt verktyg för en rad olika forskningstillämpningar. Freeze Medium CM-1 är sammansatt av en noggrant balanserad kombination av kryoskyddsmedel och viktiga näringsämnen, vilket minimerar bildningen av iskristaller och cellstress under frysningsprocessen och därmed bevarar cellernas integritet. Viktiga egenskaper hos Freeze Medium CM-1 är: • Bred kompatibilitet: Effektivt för ett brett spektrum av celltyper, inklusive primära celler, stamceller och etablerade cellinjer. • Hög livskraft: Optimerat för att maximera cellåtervinningen och livskraften efter upptining, vilket säkerställer tillförlitliga experimentella resultat. • Klar att använda: Bekvämt beredd och steriliserad för omedelbar användning, vilket minskar förberedelsetiden och risken för kontaminering. • Förbättrad stabilitet: Bibehåller jämn prestanda under standardförhållanden för kryokonservering, vilket säkerställer reproducerbara resultat. • Lång hållbarhet: CM-1 är ett serumhaltigt, färdigt kryokonserveringsmedium som kan förvaras i kylskåp i upp till ett år. Användning av CM-1 för frysning av celler Följ dessa steg för att använda CM-1 för frysning av både vidhäftande celler och celler i suspension: • För vidhäftande celler, tvätta och separera dem från odlingssubstratet. För suspensionsceller, gå direkt vidare till nästa steg. • Räkna cellerna för att säkerställa att de har rätt koncentration. • Centrifugera cellerna för att bilda en pellet och resuspendera dem sedan i CM-1-frysmediet. • Överför de resuspenderade cellerna till kryorör. • Använd en metod för långsam frysning innan cellerna överförs till långtidsförvaring. Metod Beskrivning Steg ❄️ Manuell frysning En steg-för-steg-metod som innebär en gradvis sänkning av temperaturen för att säkerställa cellernas livskraft. 1️⃣ Placera cellerna i frysmediet i en frys vid 4 °C i 40 minuter. 2️⃣ Flytta dem till en frys vid -80 °C i 24 timmar. 3️⃣ Förvara cellerna i flytande kväve för långvarig bevarande. ❄️ Användning av Mr. Frosty En praktisk anordning som möjliggör kontrollerade fryshastigheter utan el. 1️⃣ Förbered cellerna i kryorör med frysmedel. 2️⃣ Placera kryorören i Mr. Frosty-behållaren. 3️⃣ Förvara vid -80 °C i 24 timmar innan de överförs till flytande kväve. ❄️ Frys med kontrollerad fryshastighet En högprecisionsfrys från Thermo Fisher eller andra tillverkare, utformad för kontrollerad temperatursänkning. 1️⃣ Programmera enheten så att temperaturen sänks gradvis. 2️⃣ Placera de förberedda cellerna i frysen. 3️⃣ Efter fryscykeln överförs cellerna till flytande kväve. • Förvara kryorör vid temperaturer under -130 °C eller i flytande kväve för långtidsförvaring. Ingredienser • Innehåller FBS, DMSO, glukos, salter • Buffertkapacitet: pH = 7,2 till 7,6 Cytions frysmedium CM-1 erbjuder en pålitlig lösning för kryokonservering som säkerställer hög cellviabilitet och funktionalitet efter upptining för ett brett spektrum av forskningsändamål.

€99.00

exkl. moms och frakt

Frysmedel CM-1 – 50 ml

Cytions Freeze Medium CM-1 är ett toppmodernt kryokonserveringsmedium som är utformat för att säkerställa högsta möjliga cellviabilitet och funktionalitet efter upptining. Detta mångsidiga medium lämpar sig för ett brett spektrum av celltyper, inklusive både mänskliga och djurceller, vilket gör det till ett oumbärligt verktyg för en rad olika forskningstillämpningar. Freeze Medium CM-1 är sammansatt av en noggrant balanserad kombination av kryoskyddsmedel och viktiga näringsämnen, vilket minimerar bildningen av iskristaller och cellstress under frysningsprocessen och därmed bevarar cellernas integritet. Viktiga egenskaper hos Freeze Medium CM-1 är: • Bred kompatibilitet: Effektivt för ett brett spektrum av celltyper, inklusive primära celler, stamceller och etablerade cellinjer. • Hög livskraft: Optimerat för att maximera cellåtervinningen och livskraften efter upptining, vilket säkerställer tillförlitliga experimentresultat. • Klar att använda: Bekvämt beredd och steriliserad för omedelbar användning, vilket minskar förberedelsetiden och risken för kontaminering. • Förbättrad stabilitet: Bibehåller jämn prestanda under standardförhållanden för kryokonservering, vilket säkerställer reproducerbara resultat. • Lång hållbarhet: CM-1 är ett serumhaltigt, färdigt kryokonserveringsmedium som kan förvaras i kylskåp i upp till ett år. Användning av CM-1 för frysning av celler Följ dessa steg för att använda CM-1 för frysning av både vidhäftande celler och celler i suspension: • För vidhäftande celler, tvätta och separera dem från odlingssubstratet. För suspensionsceller, gå direkt vidare till nästa steg. • Räkna cellerna för att säkerställa att de har rätt koncentration. • Centrifugera cellerna för att bilda en pellet och resuspendera dem sedan i CM-1-frysmediet. • Överför de resuspenderade cellerna till kryorör. • Använd en metod för långsam frysning innan cellerna överförs till långtidsförvaring. Metod Beskrivning Steg ❄️ Manuell frysning En steg-för-steg-metod som innebär en gradvis sänkning av temperaturen för att säkerställa cellernas livskraft. 1️⃣ Placera cellerna i frysmediet i en frys vid 4 °C i 40 minuter. 2️⃣ Flytta dem till en frys vid -80 °C i 24 timmar. 3️⃣ Förvara cellerna i flytande kväve för långvarig bevarande. ❄️ Användning av Mr. Frosty En praktisk anordning som möjliggör kontrollerade fryshastigheter utan el. 1️⃣ Förbered cellerna i kryorör med frysmedel. 2️⃣ Placera kryorören i Mr. Frosty-behållaren. 3️⃣ Förvara vid -80 °C i 24 timmar innan du överför dem till flytande kväve. ❄️ Frys med kontrollerad fryshastighet En högprecisionsfrys från Thermo Fisher eller andra tillverkare, utformad för kontrollerad temperatursänkning. 1️⃣ Programmera enheten så att temperaturen sänks gradvis. 2️⃣ Placera de förberedda cellerna i frysen. 3️⃣ Efter fryscykeln överförs cellerna till flytande kväve. • Förvara kryorör vid temperaturer under -130 °C eller i flytande kväve för långtidsförvaring. Ingredienser • Innehåller FBS, DMSO, glukos, salter • Buffertkapacitet: pH = 7,2 till 7,6 Cytions frysmedium CM-1 erbjuder en pålitlig lösning för kryokonservering som säkerställer hög cellviabilitet och funktionalitet efter upptining för ett brett spektrum av forskningsändamål.

€59.00

exkl. moms och frakt

Ham's F12K Medium, innehåll: 2,0 mM L-glutamin, innehåll: 2,0 mM natriumpyruvat, innehåll: 2,5 g/L NaHCO₃

Vi presenterar Ham’s F-12K (Kaighn’s) Medium, en specialanpassad variant av Ham’s F-12-medium som är utformat för att uppfylla de unika kraven inom biologisk forskning. Detta avancerade medium erbjuder tydliga fördelar och förbättrar odlingen av primära humana hepatocyter samt leverceller från råtta och kyckling, särskilt under förhållanden med reducerad serumhalt. Ham's F-12K (Kaighn's) Medium är noggrant sammansatt för att optimera cellodlingsförhållandena. Det har en berikad sammansättning med förhöjda halter av väsentliga komponenter såsom aminosyror och natriumpyruvat, samt ytterligare ämnen som putrescin, tymidin, hypoxantin och zink. Dessa tillsatser gör det möjligt för forskare att komplettera mediet med minimala mängder serum eller definierade komponenter för specifika celltyper, vilket underlättar skapandet av exakta experimentella förhållanden. Det är värt att notera att Ham's F-12K (Kaighn's) Medium inte innehåller proteiner eller tillväxtfaktorer. Följaktligen är det ofta nödvändigt att komplettera med tillväxtfaktorer och fetalt bovint serum (FBS), vilket gör det möjligt för forskare att anpassa mediet efter kraven hos deras specifika cellinjer. För bästa resultat måste FBS-koncentrationen noggrant anpassas för varje cellinje, vilket säkerställer optimal tillväxt och funktion. För att upprätthålla ett fysiologiskt pH-värde använder Ham's F-12K (Kaighn's) Medium ett natriumbikarbonatbuffertsystem (2,5 g/l), vilket kräver en kontrollerad CO₂-miljö på 5–10 % under odlingen. Detta säkerställer att mediets pH-värde hålls inom det ideala intervallet för celltillväxt och livskraft. Kvalitetskontroll • pH = 7,2 ± 0,02 vid 20–25 °C. • Varje sats har testats med avseende på sterilitetskrav samt frånvaro av mykoplasma och bakterier. Förvaring • Förvaras i kylskåp vid +2–8 °C i mörker. Både frysning och uppvärmning till +37 °C försämrar produktens kvalitet. • Värm inte mediet till mer än 37 °C och använd inte okontrollerade värmekällor (t.ex. mikrovågsugnar). • Om endast en del av mediet ska användas, ta ut denna mängd ur flaskan och låt den nå rumstemperatur. • Hållbarhetstiden för alla medier utom basmediet är 8 veckor från tillverkningsdatum. Sammansättning Beståndsdelar mg/l Oorganiska salter Kalciumklorid x 2H₂O 135,24 Koppar(II)sulfat x 5H₂O 0,00 Järn(II)sulfat x 7H₂O 0,83 Magnesiumklorid x 6H₂O 105,72 Magnesiumsulfat x 7H₂O 394,49 Kaliumklorid 283,29 Kaliumdihydrogenfosfat 58,52 Natriumklorid 7597,20 vattenfritt dinatriumvätefosfat 115,02 Zinksulfat x 7H₂O 0,14 Övriga beståndsdelar D(+)-glukos, vattenfri 1260,00 Hypoxantin 4,08 DL-α-liponsyra 0,21 Fenolrött 3,00 Putrescin x 2HCl 0,32 Natriumpyruvat 220,00 NaHCO₃ 2500,00 Tymidin 0,73 Aminosyror L-alanin 17,82 L-arginin x HCl 421,40 L-asparagin x H₂O 30,02 L-asparaginsyra 26,62 L-cystein x HCl x H₂O 70,24 L-glutamin 292,20 L-glutaminsyra 29,42 Glycin 15,01 L-histidin x HCl x H₂O 41,92 L-isoleucin 7,87 L-leucin 26,24 L-lysin x HCl 73,04 L-metionin 8,95 L-fenylalanin 9,91 L-prolin 69,06 L-serin 21,02 L-treonin 23,82 L-tryptofan 4,08 L-tyrosin 10,87 L-valin 23,42 Vitaminer D(+)-biotin 0,07 D-kalciumpantotenat 0,48 Kolin klorid 13,96 Folsyra 1,32 myo-inositol 18,02 Nikotinamid 0,04 Pyridoxin x HCl 0,06 Riboflavin 0,04 Tiamin x HCl 0,34 Vitamin B12 1,36

€108.00

exkl. moms och frakt

Ham's F12 Medium, innehåll: 1,0 mM stabilt glutamin, innehåll: 1,0 mM natriumpyruvat, innehåll: 1,176 g/L NaHCO₃

Ham’s F-12 Medium, även känt som Ham’s F-12 Nutrient Mix, är ett allmänt använt basmedium som är särskilt utformat för cellodling. Det har använts i stor utsträckning för serumfri odling av enskilda celler av typen CHO-celler (Chinese Hamster Ovary), lungceller och L-celler från mus. Dessutom är Ham’s F-12 det medium som föredras för klonal toxicitetsanalys (CTA). En av dess framträdande fördelar är förmågan att stödja celltillväxt utan behov av serumpåfyllning. Detta eliminerar potentiell störning orsakad av serumkomponenter, vilket säkerställer konsekventa och tillförlitliga experimentella resultat. Genom att tillhandahålla en serumfri odlingsmiljö ger Ham's F-12-medium forskare större kontroll över sina undersökningar. En annan viktig egenskap hos Ham's F-12-medium är att det lämpar sig för odling av enskilda celler. Detta gör det till ett utmärkt val för en rad olika cellinjer, däribland CHO-celler, lungceller och L-celler från mus. Mediets optimerade näringssammansättning underlättar effektiv vidhäftning och tillväxt av enskilda celler, vilket möjliggör etablering av homogena cellkulturer med förbättrad reproducerbarhet. Dessutom har Ham's F-12-medium blivit erkänt som det föredragna mediet för Clonal Toxicity Assay (CTA). Detta test spelar en avgörande roll vid bedömningen av ämnens cytotoxiska effekter på celler. Genom att använda Ham's F-12-medium i CTA kan forskare noggrant utvärdera hur olika föreningar eller behandlingar påverkar enskilda celler, vilket ger värdefull insikt i toxikologiska profiler. Kvalitetskontroll • pH = 7,2 ± 0,02 vid 20–25 °C. • Varje sats har testats med avseende på sterilitetskrav samt frånvaro av mykoplasma och bakterier. Förvaring • Förvaras i kylskåp vid +2–8 °C i mörker. Frysning och uppvärmning till +37 °C försämrar produktens kvalitet. • Värm inte mediet till mer än 37 °C och använd inte okontrollerade värmekällor (t.ex. mikrovågsugnar). • Om endast en del av mediet ska användas, ta ut denna mängd ur flaskan och värm upp den till rumstemperatur. • Hållbarhetstiden för alla medier, med undantag för basmediet, är 8 veckor från tillverkningsdatum. Sammansättning Beståndsdelar mg/l Oorganiska salter Kalciumklorid x 2H₂O 44,00 Koppar(II)sulfat x 5H₂O 0,00 Järn(II)sulfat x 7H₂O 0,83 Magnesiumklorid x 6H₂O 122,00 Kaliumklorid 223,65 Natriumklorid 7599,00 vattenfritt dinatriumvätefosfat 142,04 Zinksulfat x 7H₂O 0,86 Övriga beståndsdelar D(+)-glukos, vattenfri 1801,60 Hypoxantin 4,08 Linolsyra 0,08 DL-α-liponsyra 0,21 Fenolrött 1,20 Putrescin x 2HCl 0,16 Natriumpyruvat 110,00 Tymidin 0,73 NaHCO₃ 1176,00 Aminosyror L-alanin 8,91 L-arginin x HCl 210,70 L-asparagin x H₂O 15,01 L-asparaginsyra 13,31 L-cystein x HCl x H₂O 35,12 L-Alanyl-L-glutamin 217,30 L-glutaminsyra 14,71 Glycin 7,51 L-histidin x HCl x H₂O 20,96 L-isoleucin 3,94 L-leucin 13,12 L-lysin x HCl 36,54 L-metionin 4,48 L-fenylalanin 4,96 L-prolin 34,53 L-serin 10,51 L-treonin 11,91 L-tryptofan 2,04 L-tyrosin 5,44 L-valin 11,71 Vitaminer D(+)-biotin 0,01 D-kalciumpantotenat 0,24 Kolin klorid 13,96 Folsyra 1,32 myo-inositol 18,02 Nikotinamid 0,04 Pyridoxin x HCl 0,06 Riboflavin 0,04 Tiamin x HCl 0,34 Vitamin B12 1,36

€25.00

exkl. moms och frakt

IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

exkl. moms och frakt

Cellodlingsmedier: En översikt

Inom biovetenskapen är cellodling en av de viktigaste metoderna. Med begreppet ”cellodling” avses uttag av celler, vävnader eller organ från ett djur eller en växt och den efterföljande implanteringen av dessa celler, vävnader eller organ i en artificiell miljö som främjar deras överlevnad och/eller tillväxt. De grundläggande miljökraven för optimal cellutveckling är kontrollerad temperatur, ett substrat för cellfästning, ett lämpligt odlingsmedium och en inkubator som upprätthåller optimalt pH och osmolalitet. Cellerna måste ha dessa förhållanden för att kunna växa till sin fulla potential.

Valet av ett lämpligt odlingsmedium för in vitro-odling är det steg i cellodlingen som är både det mest kritiska och det viktigaste. Ett odlingsmedium, även kallat odlingsmiljö, är en vätska eller gel som är sammansatt för att främja organismers utveckling på mikroskopisk, cellulär eller växtliknande nivå. Det medium som används för att odla celler innehåller ofta en tillräcklig tillförsel av energi och ämnen som reglerar cellcykeln. De viktigaste beståndsdelarna i ett odlingsmedium är aminosyror, vitaminer, oorganiska salter, glukos och serum. Serum tillsätts till mediet eftersom det fungerar som en källa till tillväxtfaktorer, hormoner och vidhäftningsfaktorer. Förutom att tillföra näringsämnen bidrar mediet också till att upprätthålla pH-värdet och osmolaliteten.

Typer av odlingsmedier som används vid cellodling

Både mänskliga och djurceller kan odlas i antingen ett artificiellt eller syntetiskt medium eller i ett helt naturligt medium som kompletteras med naturliga beståndsdelar. Nedan ger vi en översikt över de olika typer av odlingsmedier som finns tillgängliga idag.

Naturliga odlingsmedier

Naturliga medier innehåller endast biologiska vätskor som förekommer i sitt naturliga tillstånd. Naturliga medier är mycket användbara och lämpliga för odling av en bred variation av djurcelltyper. Bristen på kunskap om de exakta beståndsdelarna i naturliga medier är den främsta faktorn som bidrar till den låga repeterbarheten hos resultat som erhålls med naturliga medier.

Konstgjorda odlingsmedier

Framställningen av artificiella eller syntetiska odlingsmedier innebär tillsats av näringsämnen (både organiska och oorganiska), serumproteiner, kolhydrater, kofaktorer, vitaminer och salter, samt gasfaserna O₂ och CO₂ [1].

Olika typer av artificiella odlingsmedier har utvecklats för att uppfylla en eller flera av följande funktioner: 1) Omedelbar överlevnad (en balanserad saltlösning med exakt pH-värde och osmotiskt tryck). 2) Förlängd överlevnad (en balanserad saltlösning kompletterad med olika formuleringar av organiska kemikalier och/eller serum). 3) Utveckling under obegränsad tid. 4) Specialiserade funktioner.

Det finns fyra olika klassificeringar av artificiella odlingsmedier:

Seruminnehållande medier

Den vanligaste typen av tillskott i odlingsmedier för djurceller är fetalt bovint serum. Det tillsätts till odlingsmediet som ett kostnadseffektivt tillskott för att uppnå bästa möjliga tillväxtförhållanden. Förutom att fungera som transportör eller kelator för näringsämnen som är instabila eller vattenolösliga, hormoner och tillväxtfaktorer, proteasinhibitorer och andra ämnen, binder och neutraliserar serumet även skadliga molekyler.

Serumfria odlingsmedier

Förekomsten av serum i odlingsmediet har ett antal nackdelar och kan leda till allvarliga tolkningsfel inom immunologisk forskning [2, 3]. En rad olika serumfria odlingsmedier har tagits fram [4, 5]. Dessa odlingsmedier är i allmänhet specifikt framtagna för att stödja odling av en enda celltyp, såsom Knockout Serum Replacement och Knockout DMEM från Thermo Fisher Scientific, samt mTESR-mediet från Stem Cell Technologies [6], avsett för stamceller [7].

Dessutom innehåller dessa odlingsmedier definierade mängder av renade tillväxtfaktorer, lipoproteiner och andra proteiner, som annars vanligtvis tillförs via serumet [8]. Dessa odlingsmedier kallas ofta för ”definierade odlingsmedier”, eftersom de komponenter som ingår i dem är välkända.

Kemiskt definierade odlingsmedier

Dessa medier innehåller ultrarena oorganiska och organiska komponenter som inte har kontaminerats på något sätt. De kan även innehålla tillsatser av rena proteiner, såsom tillväxtfaktorer.

 Genetisk modifiering av bakterier eller jäst, tillsammans med tillsats av vissa fettsyror, vitaminer, kolesterol och aminosyror, leder till produktion av deras beståndsdelar [9].

Proteinfritt odlingsmedium

Proteinfritt odlingsmedium är sådant som inte innehåller något protein alls utan endast icke-proteinhaltiga beståndsdelar. Jämfört med odlingsmedium med tillsatt serum främjar användningen av odlingsmedium utan tillsatt protein större cellproliferation och proteinexpression samt underlättar reningen av eventuella produkter som genereras i en efterföljande process [10–12]. Protein ingår inte i formuleringar som MEM och RPMI-1640. Ett proteintillskott kan dock administreras om det är nödvändigt.

Odlingsmedier och deras grundläggande beståndsdelar

Kommersiella odlingsmedier kan köpas i pulver- eller flytande form och innehåller ofta en mängd olika näringsämnen, såsom aminosyror, glukos, salter, vitaminer och andra kosttillskott. 

Behovet av dessa komponenter varierar mellan olika cellinjer, och dessa variationer ligger till grund för det stora antalet olika mediesammansättningar. Varje komponent har en specifik funktion, som beskrivs i följande avsnitt:

Buffertsystem

För att upprätthålla optimala odlingsförhållanden måste pH-värdet regleras, vilket ofta sker med hjälp av ett av två buffertsystem:

Naturligt buffertsystem

Förhållandet mellan CO₂ och H₂CO₃ i atmosfären är detsamma som i odlingsmediet, vilket skapar en naturlig buffringsmekanism. För att bevara denna naturliga buffringsmekanism måste odlingarna hållas i en luftmiljö med 5–10 % CO₂, vilket ofta uppnås genom användning av en CO₂-inkubator. En av de största fördelarna med att använda en naturlig buffert är att den är både billig och säker.

HEPES

Kemisk buffring med hjälp av zwitterjonen HEPES har en större buffringsförmåga i pH-intervallet 7,2–7,4 och kräver ingen reglerad gasmiljö. För vissa celltyper kan en högre dos av HEPES vara skadlig. Medier som innehåller HEPES är dessutom betydligt mer känsliga för de fototoxiska effekterna av fluorescerande ljus [13].

Fenolrött

pH-indikatorn fenolrött ingår ofta i kommersiellt tillgängliga odlingsmedier, vilket möjliggör kontinuerlig övervakning av pH-värdet. När cellerna förökar sig orsakar de metaboliter som dessa celler producerar en förskjutning av pH-värdet och därmed en färgförändring i odlingsmediet. Fenolrött har en dubbel effekt på mediets färg: det blir gult vid surt pH och lila vid alkaliskt pH. Vid pH 7,4 – det optimala värdet för cellodling – får mediet en fluorescerande röd färg.

Men fenolrött har några nackdelar: För det första kan fenolrött efterlikna verkan hos ett antal steroidhormoner, främst östrogen [14]. Därför rekommenderas ett medium utan fenolrött vid studier av östrogenkänsliga celler, såsom bröstvävnad. Natrium-kaliumbalansen störs av förekomsten av fenolrött i flera serumfria formuleringar. Tillsats av serum eller bovint hypofyshormon till medierna kan motverka denna effekt [15]. För det tredje hindras detekteringen i flödescytometriska experiment av förekomsten av fenolrött.

Oorganiska salter

Medier som innehåller oorganiska salter, såsom natrium-, kalium- och kalciumjoner, bidrar till att upprätthålla osmotisk jämvikt och reglera membranpotentialen.

Aminosyror

Eftersom aminosyror är de grundläggande beståndsdelarna i protein är de en väsentlig komponent i varje enskilt cellodlingsmedium som någonsin har utvecklats. Eftersom celler inte kan producera vissa aminosyror på egen hand är det viktigt att odlingsmediet innehåller essentiella aminosyror. De är nödvändiga för cellernas förökning, och den koncentration i vilken de förekommer avgör den maximala celltäthet som kan uppnås. I synnerhet är L-glutamin, en essentiell aminosyra, särskilt viktig.

L-glutamin fungerar som en sekundär energikälla för ämnesomsättningen och tillför kväve till produktionen av NAD, NADPH och nukleotider. Eftersom L-glutamin är en instabil aminosyra som med tiden omvandlas till en form som cellerna inte kan utnyttja måste den tillföras odlingsmediet.

Dessutom kan icke-essentiella aminosyror tillföras odlingsmediet för att fylla på de som har förbrukats under tillväxtprocessen. Cellernas tillväxt stimuleras och deras livskraft ökar när odlingsmediet berikas med icke-essentiella aminosyror.

Kolhydrater

Kolhydrater i form av sockerarter är den huvudsakliga energikällan. Många odlingsmedier innehåller även maltos och fruktos utöver de vanligare sockerarterna glukos och galaktos.

Proteiner och peptider

Albumin, transferrin och fibronektin är de vanligaste proteinerna och peptiderna. De är särskilt viktiga i odlingsmedier som inte innehåller serum. Albumin, transferrin, aprotinin, fetuin och fibronektin är några av de proteiner som kan förekomma i serum, vilket är en rik proteinkälla.

Albumin är det dominerande proteinet i blodet och har till uppgift att binda och transportera olika ämnen, däribland vatten, salter, fria fettsyror, hormoner och vitaminer, mellan olika organ och celler. Albumins förmåga att binda till kemikalier gör det till ett effektivt medel för att avlägsna skadliga föreningar från det odlingsmedium där cellerna odlas.

Aprotinin är ett skyddsmedel i cellodlingssystem, eftersom det är stabilt vid neutralt och surt pH samt tål höga temperaturer och den nedbrytning som kan orsakas av proteolytiska enzymer. Det kan hämma ett antal serinproteaser, däribland trypsin.

Fetuin är ett glykoprotein som kan påvisas i högre halter i serum från foster och nyfödda djur jämfört med serum från vuxna. Dessutom fungerar det som en serinproteasinhibitor. Proteinet fibronektin är en väsentlig komponent i processen för celladhesion. Transferrin är ett protein som transporterar järn och ansvarar för att leverera järn till cellmembranen.

Fettsyror och lipider

De spelar en avgörande roll i serumfritt medium när serum saknas.

Vitaminer

Många vitaminer är nödvändiga för cellernas utveckling och förökning. Cellerna kan inte själva producera tillräckliga mängder av vitaminer, vilket gör att de är nödvändiga som kosttillskott vid vävnadsodling.

I cellodling är serum den primära källan till vitaminer; dock berikas odlingsmedierna även med olika vitaminer för att anpassa dem till en specifik celltyp. Vanligtvis används B-vitaminer för att stimulera tillväxten.

Spårämnen

Kemiska grundämnen som koppar, zink, selen och mellanprodukter av trikarbonsyror kallas spårämnen. Spårämnen tillsätts ofta i medier som inte innehåller serum för att ersätta de ämnen som vanligtvis finns i serum. Dessa ämnen är viktiga kemiska komponenter som krävs för en sund cellutveckling. Många biokemiska reaktioner är beroende av vissa mikronäringsämnen, till exempel enzymaktivitet.

Medietillskott

Det fullständiga odlingsmediet som rekommenderas för vissa cellinjer behöver extra komponenter som saknas i basmediet och serumet. Dessa kosttillskott stödjer celltillväxt och korrekt ämnesomsättning.

Även om hormoner, tillväxtfaktorer och signalmolekyler är nödvändiga för en korrekt proliferation av vissa cellinjer, bör följande försiktighetsåtgärder alltid vidtas: Eftersom tillsats av kosttillskott kan förändra osmolaliteten i det fullständiga odlingsmediet, vilket kan hämma cellutvecklingen, är det alltid tillrådligt att kontrollera osmolaliteten efter att kosttillskott har tillsatts. För de flesta cellinjer ligger den optimala osmolaliteten mellan 260 och 320 mOSM/kg.

Antibiotika

Antibiotika används ofta för att hämma tillväxten av bakterier och svampar [16], även om de inte är nödvändiga för celltillväxten. Eftersom antibiotika kan dölja kontaminering av mykoplasma och resistenta bakterier rekommenderas inte rutinmässig användning av dem vid cellodling [17, 18].

Dessutom kan antibiotika störa ämnesomsättningen hos överkänsliga celler. De penicillin-streptomycin-kombinationer som tillverkas av MilliporeSigma och Life Technologies används ofta. Plasmocin har använts vid odling av gliomcellinjerna TS603, TS516 och BT260 [19], och det har visat sig vara effektivt för att eliminera mykoplasmakontaminering (20).

Serum

Albuminer, tillväxtfaktorer och tillväxthämmare finns alla i serum. Serum är en av de viktigaste komponenterna i cellodlingsmedium eftersom det tillför aminosyror, proteiner, vitaminer (särskilt fettlösliga vitaminer som A, D, E och K), kolhydrater, lipider, hormoner, tillväxtfaktorer, mineraler och spårämnen.

Serum från foster och kalvar används ofta för att främja utvecklingen av odlade celler. Fosterserum är en rik källa till tillväxtfaktorer och lämpar sig för cellkloning och utveckling av känsliga celler. På grund av dess minskade tillväxtfrämjande egenskaper används kalvserum i kontaktinhibitionsförsök. Normala odlingsmedier innehåller ofta 2–10 % serum. Tillsatsen av serum till odlingsmediet tjänar följande syften [21]:

  • Serumet tillför cellerna nödvändiga näringsämnen (både i lösning och bundna till proteiner).

  • Serumet innehåller flera tillväxtfaktorer och hormoner som bidrar till tillväxtfrämjande och specialiserad cellaktivitet.

  • Det innehåller många bindande proteiner, såsom albumin och transferrin, som transporterar andra ämnen in i cellen. Albumin transporterar till exempel fetter, vitaminer, hormoner m.m. in i cellerna.

  • Det tillför även proteiner, såsom fibronektin, som ökar cellernas vidhäftning till substratet. Dessutom producerar det spridningsfaktorer som underlättar cellernas utbredning före celldelning.

  • Det tillför proteasinhibitorer som förhindrar proteolys i cellerna.

  • Det innehåller även mineraler såsom Na+, K+, Zn2+ och Fe2+.

  • Det ökar mediets viskositet och skyddar därmed cellerna från mekanisk skada under omrörning i suspensionskulturen.

  • Det fungerar även som en buffert.

Referenser

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Näring för djurceller i vävnadsodling; inledande studier av ett syntetiskt medium. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Snabb adsorption av en komponent i fosterkalvserum av däggdjursceller i odling. En potentiell källa till artefakter i studier av antiserum mot cellspecifika antigener. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. Tillsats av serum till det medium som används för beredning av cellsuspensioner som en möjlig källa till artefakter i cellmedierade reaktioner studerade med hjälp av poplitealt lymfkörteltest. J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Kommersiella serumfria odlingsmedier: hybridomtillväxt och produktion av monoklonala antikroppar. J Immunol Methods. 1991;145:175-83

[5] Barnes D, Sato G. Metoder för odling av celler i serumfritt medium. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O, m.fl. HSP70-chaperoner transporterar RNA-fritt TDP-43 in i anisotropa, intranukleära, flytande sfäriska skal. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, m.fl. Downsyndrom-inducerad senescens stör kärnarkitekturen hos neurala progenitorceller. Cell Stem Cell. 2022;29:116–130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Fullständig ersättning av serum med albumin, transferrin och sojalipid i odlingar av lipopolysackaridreaktiva B-lymfocyter. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Systematisk förbättring av ett kemiskt definierat proteinfritt medium för hybridomtillväxt och produktion av monoklonala antikroppar. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] Darfler F. Ett proteinfritt medium för odling av hybridomer och andra celler i immunsystemet. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Barnes D, Sato G. Serumfri cellodling: en enhetlig metod. Cell. 1980;22:649-55

[12] Hamilton W, Ham R. Klonal odling av cellinjer från kinesisk hamster i proteinfritt medium. In Vitro. 1977;13:537-47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Analys av de cytotoxiska effekterna av ljusexponerat HEPES-innehållande odlingsmedium. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Fenolrött i vävnadsodlingsmedier är ett svagt östrogen: implikationer för studien av östrogenresponsiva celler i odling. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] Karmiol S. Utveckling av serumfria medier. I: Master JRW, red. Animal Cell culture, 3:e uppl. Oxford: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Användning av antibiotika i cellodlingsmedier. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Spridning och bekämpning av mykoplasmainfektioner i cellkulturer. In Vitro. 1976;12:643-8

[18] Masters J, Stacey G. Byte av odlingsmedium och passering av cellinjer. Nat Protoc. 2007;2:2276–84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M, m.fl. Histondemetylaset KDM6A känner direkt av syre för att reglera kromatin och cellernas öde. Science. 2019;363:1217-1222

[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M, m.fl. Effektiviteten hos Plasmocin™ på olika däggdjurscellinjer infekterade av mollicutes jämfört med vanligt förekommande antibiotika i cellodling: en lokal erfarenhet. Cytotechnology. 2011;63:609-20

[21] Kragh Hansen U. Molekylära aspekter av ligandbindning till serumalbumin. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53