Mine otse sisu juurde

Mükoplasma testimine

Mükoplasma saastumise usaldusväärne tuvastamine

Kaitske oma kultuure varjatud saastumise eest

Mükoplasmad on väikesed prokarüootsed organismid, mis on mikroskoobis nägemiseks liiga väikesed ja mida tavaliste antibiootikumidega ei ole võimalik kõrvaldada. Need võivad mõjutada rakuliinide kasvu, vohamist ja morfoloogiat, mis võib viia ebausaldusväärsete katsetulemusteni.

Ligikaudu 15 kuni 35 % pidevatest rakuliinidest on mükoplasmaga saastunud1,2. Seetõttu on mükoplasmavaba keskkonna tagamiseks soovitatav sage kontroll.

Cell culture work in the Cytion laboratory

Kaks testimisvõimalust

Cytion pakub nii lühi- kui ka pikaajalist testimist

Mükoplasma kiirtest
Lühiajaline test. Teie proove testitakse kohe pärast saabumist
Mükoplasma Premium-test
Pikaajaline test. Algatatakse rakukultuur ja rakke testitakse pärast 14-päevast antibiootikumivaba kultiveerimist

Analüüsimeetodid

Kolorimeetriline reporteranalüüs

See test on rakupõhine kolorimeetriline analüüs. Mükoplasma juuresolekul indutseerib reporter-rakuliin signaalikaskaadi, mis muudab söötme värvi punasest siniseks. Analüüs tehakse 96-well plaatidel ja loetakse mikroplaadi spektrofotomeetris 620 kuni 655 nm juures. Tuvastatakse kõik mükoplasma ja aholeplasma liigid ning ka muud bakteriaalsed saasteained rakukultuuris.

Isotermiline amplifikatsioon

Kiire ja usaldusväärne test, mis põhineb mükoplasmaspetsiifilise DNA isotermilisel amplifikatsioonil koos reaalajas tuvastamisega DNA-ga interkaleeruva värvaine abil. See tuvastab kuus kõige levinumat liiki, mis moodustavad enam kui 95 % saastumistest: M. orale, M. hyorhinis, M. arginini, M. fermentans, M. hominis ja A. laidlawii. Järjestuste homoloogia tõttu tuvastatakse ka teisi liike (M. pneumoniae, M. gallisepticum ja M. synoviae). Positiivseid ja negatiivseid proove eristatakse sulamistemperatuuri (Tm) järgi.

Proovid

Kiirtest
Vähemalt 50 µl rakususpensiooni, mis sisaldab 50,000 rakku. Suspensiooni saab saata ümbritseva keskkonna temperatuuril
Premium-test
Vähemalt 1 miljon rakku sobivas külmutussöötmes, et tagada vastupidav ja terve kultuur. Palun saatke proovid kuivjääl

Palun täitke mükoplasma testimise proovivorm ja lisage see oma proovi saadetisele.

Laadige alla proovivorm

Taotlege konsultatsiooni

Rääkige meile oma projektist

Esimeseks sammuks piisab mõnest üksikasjast. Meie teadusmeeskond vaatab Teie päringu üle ja võtab Teiega ühendust.

Jannes Steinmann
TEIE KONTAKTISIK
Jannes Steinmann
Rakubioloogia juht
Taotlege konsultatsiooni
ALLIKAD
  1. Uphoff CC, Drexler HG. Comparative PCR analysis for detection of mycoplasma infections in continuous cell lines. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2002;38(2):79–85. doi:10.1290/1071-2690(2002)038<0079:CPAFDO>2.0.CO;2
  2. Drexler HG, Uphoff CC. Mycoplasma contamination of cell cultures: incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention. Cytotechnology. 2002;39(2):75–90. doi:10.1023/A:1022913015916