Medium 199, w: 2,7 mM stabiele glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO₃, w: EBSS

Medium 199 is een veelzijdig en veelgebruikt celkweekmedium dat speciaal is samengesteld voor de kweek van primaire explantaten. Dit uitgebreide medium combineert essentiële vitamines, aminozuren en andere factoren om een volledig gedefinieerde voedingsbron te bieden voor een breed scala aan celtypen. Het is met name geschikt voor niet-getransformeerde cellen, waardoor het een onmisbaar hulpmiddel is voor biologisch onderzoek.

Medium 199 biedt een breed scala aan toepassingen in de praktijk. Het kan het cumulus-oöcytencomplex (COC) effectief in stand houden en de in-vitrorijping van oöcyten ondersteunen. Daarnaast wordt het gebruikt voor het spoelen van aspiratieleidingen tijdens de eicelverzameling bij Duitse Holstein-koeien. Bovendien dient Medium 199 als een uitstekend medium voor de kweek van hartendotheelcellen afkomstig van ratten. Deze toepassingen tonen de veelzijdigheid en het aanpassingsvermogen van Medium 199 aan verschillende experimentele behoeften aan.

Geschiedenis

De ontwikkeling van Medium 199 in de jaren vijftig betekende een belangrijke vooruitgang op het gebied van weefselkweekmedia. Vóór de introductie ervan waren veel kweekmedia afhankelijk van dierlijke producten en weefselextracten. Morgan en zijn collega’s brachten echter een revolutie teweeg in het vakgebied door een volledig gedefinieerde voedingsbron voor celculturen te ontwikkelen. Door middel van hun experimenten met verschillende combinaties van vitamines, aminozuren en andere factoren ontdekten zij de uitzonderlijke groeibevorderende eigenschappen van Medium 199.

Kwaliteitscontrole

• pH = 7,2 ± 0,02 bij 20–25 °C. 
• Elke partij is getest op steriliteit en de afwezigheid van mycoplasma en bacteriën.

Bewaring  

• In het donker gekoeld bewaren bij +2 °C tot +8 °C. Invriezen en opwarmen tot +37 °C tasten de kwaliteit van het product aan. 
• Verwarm het medium niet tot meer dan 37 °C en gebruik geen oncontroleerbare warmtebronnen (bijv. magnetrons). 
• Als slechts een deel van het medium wordt gebruikt, neem dan deze hoeveelheid uit de fles en breng deze op kamertemperatuur.
• De houdbaarheid van alle media, met uitzondering van het basismedium, bedraagt 8 weken vanaf de productiedatum.

Samenstelling

	Bestanddelen	mg/l
Anorganische zouten	Calciumchloride x 2H₂O	264,92
	IJzer(III)nitraat x 9H₂O	0,72
	Magnesiumsulfaat	97,67
	Kaliumchloride	400,00
	Natriumacetaat x 3H₂O	82,95
	Natriumchloride	6.800,00
	Natriumdihydrogeenfosfaat x H₂O	140,00
Overige bestanddelen	Adeninesulfaat	10,00
	AMP	0,20
	ATP	1,00
	Cholesterol	0,20
	2'-Deoxyribose	0,50
	D(+)-Glucose, watervrij	1.000,00
	Glutathion (gereduceerd)	0,05
	Guanine x HCl	0,30
	Hypoxanthine	0,30
	Fenolrood	10,00
	D-ribose	0,50
	Thymine	0,30
	Tween 80	4,90
	Uracil	0,30
	Xanthine	0,30
	NaHCO₃	2.200,00
Aminozuren	L-alanine	25,00
	L-arginine x HCl	70,00
	L-asparaginezuur	30,00
	L-cysteïne x HCl x H₂O	0,10
	L-cystine	20,00
	L-Glutamine stabiel	149,00
	L-glutaminezuur	67,00
	Glycine	50,00
	L-histidine x HCl x H₂O	21,88
	L-hydroxyproline	10,00
	L-isoleucine	20,00
	L-leucine	60,00
	L-lysine x HCl	70,00
	L-methionine	15,00
	L-fenylalanine	25,00
	L-proline	40,00
	L-serine	25,00
	L-threonine	30,00
	L-tryptofaan	10,00
	L-tyrosine	40,00
	L-valine	25,00
Vitaminen	4-Aminobenzoëzuur	0,05
	Ascorbinezuur	0,05
	D(+)-Biotine	0,01
	Calciferol	0,10
	D-Calciumpantothenaat	0,01
	Cholinechloride	0,50
	Foliumzuur	0,01
	myo-inositol	0,05
	Menadion	0,01
	Nicotinezuur	0,025
	Nicotinamide	0,025
	Pyridoxal x HCl	0,025
	Pyridoxol x HCl	0,025
	Riboflavine	0,01
	DL-α-tocoferolfosfaat-dinatriumzout	0,01
	Thiamine x HCl	0,01
	Vitamine A-acetaat	0,14