Terpė 199, sudėtis: 2,7 mM stabilaus glutamino, sudėtis: 2,2 g/l NaHCO₃, sudėtis: EBSS

„Medium 199“ – tai universali ir plačiai naudojama ląstelių kultūros terpė, specialiai sukurta pirminių eksplantatų auginimui. Ši visapusiška terpė apima būtinus vitaminus, amino rūgštis ir kitus veiksnius, kad įvairių tipų ląstelėms būtų užtikrintas visiškai apibrėžtas maistinių medžiagų šaltinis. Ji ypač tinka netransformuotoms ląstelėms, todėl yra neįkainojama biologinių tyrimų priemonė.

„Medium 199“ turi daugybę pritaikymo galimybių šioje srityje. Ji gali veiksmingai išlaikyti kumulius-oocitų kompleksą (COC) ir palaikyti oocitų brendimą in vitro. Be to, ji naudojama aspiracijos linijų skalavimui, renkant kiaušinėlius iš vokiečių holšteinų karvių. Taip pat terpė „Medium 199“ yra puiki terpė žiurkių širdies endotelio ląstelių kultūrai auginti. Šios taikymo sritys rodo terpės „Medium 199“ universalumą ir pritaikomumą įvairiems eksperimentiniams poreikiams.

Istorija

„Medium 199“ sukūrimas 1950-aisiais žymėjo reikšmingą pažangą audinių kultūros terpių srityje. Iki jo atsiradimo daugelis kultūros terpių buvo pagamintos iš gyvūninės kilmės produktų ir audinių ekstraktų. Tačiau Morganas ir jo kolegos sukėlė revoliuciją šioje srityje, suformulavę visiškai apibrėžtą maistinių medžiagų šaltinį ląstelių kultūroms. Atlikdami eksperimentus su įvairiais vitaminų, amino rūgščių ir kitų veiksnių deriniais, jie atrado išskirtines „Medium 199“ savybes, skatinančias augimą.

Kokybės kontrolė

• pH = 7,2 ± 0,02 esant 20–25 °C temperatūrai. 
• Kiekviena partija buvo ištirta dėl sterilumo ir mikoplazmų bei bakterijų nebuvimo.

Laikymas  

• Laikyti šaldytuve +2–+8 °C temperatūroje, tamsioje vietoje. Užšaldymas ir pašildymas iki +37 °C pablogina produkto kokybę. 
• Terpės negalima kaitinti aukštesnėje nei 37 °C temperatūroje arba naudoti nekontroliuojamų šilumos šaltinių (pvz., mikrobangų krosnelių). 
• Jei ketinate naudoti tik dalį terpės, išimkite reikiamą kiekį iš butelio ir pašildykite jį kambario temperatūroje.
• Visų terpių, išskyrus bazinę terpę, galiojimo laikas yra 8 savaitės nuo pagaminimo datos.

Sudėtis

	Komponentai	mg/l
Neorganinės druskos	Kalcio chloridas x 2H₂O	264,92
	Geležies (III) nitratas x 9H₂O	0,72
	Magnio sulfatas	97,67
	Kalio chloridas	400,00
	Natrio acetatas x 3H₂O	82,95
	Natrio chloridas	6 800,00
	Natrio dihidrogeno fosfatas x H₂O	140,00
Kiti komponentai	Adenino sulfatas	10,00
	AMP	0,20
	ATP	1,00
	Cholesterolis	0,20
	2‘-deoksiriboze	0,50
	D(+)-gliukozė bevandenė	1,000.00
	Glutationas (raudonasis)	0,05
	Guaninas x HCl	0,30
	Hipoksantinas	0,30
	Fenolio raudonasis	10,00
	D-ribozė	0,50
	Timinas	0,30
	Tween 80	4,90
	Uracilas	0,30
	Ksantinas	0,30
	NaHCO₃	2 200,00
Amino rūgštys	L-alaninas	25,00
	L-argininas x HCl	70,00
	L-asparto rūgštis	30,00
	L-cisteinas x HCl x H₂O	0,10
	L-cistinas	20,00
	Stabilus L-glutaminas	149,00
	L-glutamo rūgštis	67,00
	Glicinas	50,00
	L-histidinas x HCl x H₂O	21,88
	L-hidroksiprolinas	10,00
	L-izoleucinas	20,00
	L-leucinas	60,00
	L-lizinas x HCl	70,00
	L-metioninas	15,00
	L-fenilalaninas	25,00
	L-prolinas	40,00
	L-serinas	25,00
	L-treoninas	30,00
	L-triptofanas	10,00
	L-tirozinas	40,00
	L-valinas	25,00
Vitaminai	4-aminobenzoinė rūgštis	0,05
	Askorbo rūgštis	0,05
	D(+)-biotinas	0,01
	Kalciferolis	0,10
	D-kalcio pantotenatas	0,01
	Cholino chloridas	0,50
	Folio rūgštis	0,01
	mio-inozitolis	0,05
	Menadionas	0,01
	Nikotino rūgštis	0,025
	Nikotinamidas	0,025
	Piridoksalas x HCl	0,025
	Piridoksolis x HCl	0,025
	Riboflavinas	0,01
	DL-α-tokoferolio fosfato dinatrio druska	0,01
	Tiaminas x HCl	0,01
	Vitamino A acetatas	0,14