Medium 199, w: 2,7 mM stabiles Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO₃, w: EBSS

Medium 199 ist ein vielseitiges und weit verbreitetes Zellkulturmedium, das speziell für die Kultivierung von Primärexplantaten entwickelt wurde. Dieses umfassende Medium kombiniert essentielle Vitamine, Aminosäuren und andere Faktoren und bietet so eine vollständig definierte Nährstoffquelle für eine Vielzahl von Zelltypen. Es eignet sich besonders für nicht transformierte Zellen und ist daher ein unschätzbares Hilfsmittel für die biologische Forschung.

Medium 199 bietet eine Reihe von Anwendungsmöglichkeiten in der Praxis. Es kann den Cumulus-Oozyten-Komplex (COC) effektiv erhalten und die In-vitro-Reifung von Oozyten unterstützen. Zudem wird es zum Spülen von Absaugschläuchen bei der Eizellentnahme von deutschen Holstein-Kühen eingesetzt. Darüber hinaus eignet sich Medium 199 hervorragend für die Kultivierung von Herzendothelzellen aus Ratten. Diese Anwendungsbereiche verdeutlichen die Vielseitigkeit und Anpassungsfähigkeit von Medium 199 an unterschiedliche experimentelle Anforderungen.

Geschichte

Die Entwicklung von Medium 199 in den 1950er Jahren stellte einen bedeutenden Fortschritt im Bereich der Gewebekulturmedien dar. Vor seiner Einführung basierten viele Kulturmedien auf tierischen Produkten und Gewebeextrakten. Morgan und seine Kollegen revolutionierten das Fachgebiet jedoch durch die Formulierung einer vollständig definierten Nährstoffquelle für Zellkulturen. Durch ihre Experimente mit verschiedenen Kombinationen aus Vitaminen, Aminosäuren und anderen Faktoren entdeckten sie die außergewöhnlichen wachstumsfördernden Eigenschaften von Medium 199.

Qualitätskontrolle

• pH-Wert = 7,2 ± 0,02 bei 20–25 °C. 
• Jede Charge wurde auf Sterilität sowie auf das Nichtvorhandensein von Mykoplasmen und Bakterien geprüft.

Lagerung  

• Im Dunkeln bei +2 °C bis +8 °C gekühlt lagern. Einfrieren und Erwärmen auf bis zu +37 °C beeinträchtigen die Qualität des Produkts. 
• Das Medium darf nicht auf über 37 °C erhitzt werden; zudem dürfen keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z. B. Mikrowellenherde) verwendet werden. 
• Soll nur ein Teil des Mediums verwendet werden, entnehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie auf Raumtemperatur.
• Die Haltbarkeit aller Medien mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab Herstellungsdatum.

Zusammensetzung

	Bestandteile	mg/L
Anorganische Salze	Calciumchlorid x 2H₂O	264,92
	Eisen(III)-nitrat x 9H₂O	0,72
	Magnesiumsulfat	97,67
	Kaliumchlorid	400,00
	Natriumacetat x 3H₂O	82,95
	Natriumchlorid	6.800,00
	Natriumdihydrogenphosphat x H₂O	140,00
Sonstige Bestandteile	Adeninsulfat	10,00
	AMP	0,20
	ATP	1,00
	Cholesterin	0,20
	2‘-Desoxyribose	0,50
	D(+)-Glukose, wasserfrei	1.000,00
	Glutathion (rot)	0,05
	Guanin x HCl	0,30
	Hypoxanthin	0,30
	Phenolrot	10,00
	D-Ribose	0,50
	Thymin	0,30
	Tween 80	4,90
	Uracil	0,30
	Xanthin	0,30
	NaHCO₃	2.200,00
Aminosäuren	L-Alanin	25,00
	L-Arginin x HCl	70,00
	L-Asparaginsäure	30,00
	L-Cystein x HCl x H₂O	0,10
	L-Cystin	20,00
	L-Glutamin, stabil	149,00
	L-Glutaminsäure	67,00
	Glycin	50,00
	L-Histidin x HCl x H₂O	21,88
	L-Hydroxyprolin	10,00
	L-Isoleucin	20,00
	L-Leucin	60,00
	L-Lysin x HCl	70,00
	L-Methionin	15,00
	L-Phenylalanin	25,00
	L-Prolin	40,00
	L-Serin	25,00
	L-Threonin	30,00
	L-Tryptophan	10,00
	L-Tyrosin	40,00
	L-Valin	25,00
Vitamine	4-Aminobenzoesäure	0,05
	Ascorbinsäure	0,05
	D(+)-Biotin	0,01
	Calciferol	0,10
	D-Calciumpantothenat	0,01
	Cholinchlorid	0,50
	Folsäure	0,01
	Myo-Inositol	0,05
	Menadion	0,01
	Nikotinsäure	0,025
	Nikotinamid	0,025
	Pyridoxal × HCl	0,025
	Pyridoxol × HCl	0,025
	Riboflavin	0,01
	DL-α-Tocopherolphosphat-Dinatriumsalz	0,01
	Thiamin x HCl	0,01
	Vitamin-A-Acetat	0,14