Премини към съдържанието

Медии и реагенти

40 продукти

Insulin, Human recombinant, Solution (5 mg/ml)

Volume: 5 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin Human Recombinant Solution is a chemically defined supplement commonly used for the cultivation of mammalian cell lines, including Chinese Hamster Ovary (CHO) cells. This cell culture–grade solution contains recombinant human insulin expressed in Saccharomyces cerevisiae, ensuring high purity and consistent performance in research applications. Application and Benefits Insulin is routinely added to serum-free and chemically defined media to promote cell growth and productivity. As a key regulatory hormone, insulin supports cellular uptake, utilization, and storage of glucose, amino acids, and fatty acids. It also inhibits the breakdown of glycogen, proteins, and lipids, thereby contributing to improved cell viability and metabolic stability in culture systems. The chemically defined formulation supports reproducibility and minimizes variability in sensitive cell culture workflows. Biological Properties and Usage Insulin is a two-chain polypeptide hormone naturally produced by the β-cells of the pancreatic islets. It has a molecular weight of approximately 5,800 Da. The α- and β-chains are linked by two interchain disulfide bonds, and the α-chain contains one intrachain disulfide bond. For cell culture applications, the solution should be handled under aseptic conditions and stored at +2°C to +8°C to maintain stability and performance. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€109.00

без ДДС и доставка

Insulin-Transferrin-Selenium (ITS), Solution 100x

Volume: 10 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) Solution (100x) is a chemically defined supplement designed for a wide range of cell culture applications. It is most commonly used as an additive to basal cell culture media to support cell growth under reduced-serum or serum-free conditions. Application and Benefits Our ITS supplement provides essential components required for the optimal performance of serum-free media. By supplementing conventional nutrient media with ITS, the fetal bovine serum (FBS) requirement for the routine maintenance of many cell lines can be significantly reduced. This helps minimize variability associated with serum use while maintaining consistent cell growth and viability. Insulin supports cellular uptake and metabolism of key nutrients, transferrin facilitates iron transport, and selenium contributes to antioxidant defense and enzymatic activity. Together, these components promote balanced cell metabolism and improved reproducibility in defined culture systems. Formulation and Usage Insulin-Transferrin-Selenium (ITS) is supplied as a 100x concentrated solution in Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) without phenol red. For standard applications, dilute 1:100 into the appropriate basal medium to achieve the recommended working concentration. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to maintain product stability and sterility. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€59.00

без ДДС и доставка

McCoys 5A среда (модифицирана), съдържание: 3,0 г/л глюкоза, съдържание: стабилен глутамин, съдържание: 2,0 мМ натриев пируват, съдържание: 2,2 г/л NaHCO₃

Средата „McCoy's 5A Medium“ е силно препоръчвана и специализирана среда, предназначена да улеснява растежа и размножаването на вируси в първични клетъчни култури. Тя е получила значително признание за изключителната си ефективност в различни приложения в областта на биологичните изследвания. Едно от най-известните приложения на средата McCoy's 5A е използването ѝ при култивирането на клетъчни линии на човешки колоректален карцином. По-конкретно, тя е била използвана при изследването на G-протеин-свързания рецептор, съдържащ богати на левцин повторения (LGR5), и неговата роля в метастазирането на рака на дебелото черво. Тази среда е била ефективно използвана при култивирането на няколко клетъчни линии на карцином на дебелото черво, включително HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b и TENN, което позволява на изследователите да проучат по-задълбочено механизмите, лежащи в основата на метастазирането на рака на дебелото черво. В допълнение към приложението ѝ в изследванията на рака, средата McCoy's 5A се е оказала незаменима при изследването на остеобластите. Изследователи, изучаващи йонната реактивност на хидроксиапатит с дефицит на калций в стандартни среди за клетъчна култура, са използвали тази среда за култивиране на остеобласти. Това приложение е допринесло за по-доброто разбиране на взаимодействията между остеобластите и хидроксиапатита с дефицит на калций, като е допринесло за напредъка в областта на изследванията на костната тъкан. Средата „McCoy's 5A“ е била внимателно формулирана чрез модифициране на аминокиселините, съдържащи се в „Basal Medium Eagle“, за да осигури оптимална подкрепа за туморните клетки на черния дроб. Тази обогатена формула я прави подходяща за широк спектър от установени клетъчни линии, както и за първични клетки, което допълнително повишава нейната универсалност и приложимост в различни изследователски условия. Средата „McCoy's 5A“ разширява своите биохимични и физиологични ефекти отвъд туморните клетки на черния дроб. Тя е била успешно използвана за подпомагане на растежа в първични култури от костен мозък, кожа, венци, бъбреци, омент, надбъбречни жлези, бели дробове, далак, ембриони на плъхове и други видове клетки. Този широк спектър от приложения свидетелства за широката полезност на средата McCoy's 5A за подпомагане на растежа и поддържането на различни видове клетки за всестранни биологични изследвания. Състав Тази среда McCoy's 5A (модифицирана) съдържа 3,0 g/L глюкоза, стабилен глутамин, 2,0 mM натриев пируват и 2,2 g/L NaHCO3. Контрол на качеството • pH = 7,2 ± 0,02 при 20–25 °C. • Всяка партида е тествана за стерилност и липса на микоплазма и бактерии. Съхранение • Съхранявайте в хладилник при температура от +2 °C до +8 °C на тъмно. Замразяването и загряването до +37 °C намаляват качеството на продукта. • Не загрявайте средата до температура над 37 °C и не използвайте неконтролируеми източници на топлина (например микровълнови печки). • Ако ще се използва само част от средата, извадете това количество от бутилката и го затоплете до стайна температура. • Срокът на годност на всички среди, с изключение на основната среда, е от 6 до 8 седмици от датата на отваряне. Състав Съставки mg/L Неорганични солиКалциев хлорид x 2H₂O132,00 Магнезиев сулфат97,67 Калиев хлорид400,00 Натриев хлорид6 460,00 Динатриев хидрогенфосфат (безводен)504,00 Други съставкиD(+)-глюкоза (безводна)3 000,00 Глутатион (редуциран)0,50 Месен пептон600,00 Натриева сол на фенол червено11,00 АминокиселиниL-аланин13,36 L-аргинин x HCl42,14 L-аспарагин x H₂O45,03 L-аспарагинова киселина19,97 L-цистеин x HCl x H₂O31,75 L-глутамин (стабилен)219,15 L-глутаминова киселина22,07 Глицин7,51 L-хистидин × HCl × H₂O20,96 L-хидроксипролин19,67 L-изолевцин39,36 L-лейцин39,36 L-лизин x HCl36,54 L-метионин14,92 L-фенилаланин16,52 L-пролин17,27 L-серин26,28 L-треонин17,87 L-триптофан3,06 L-тирозин динатриева сол26,10 L-валин17,57 Витаминип-аминобензоена киселина1,00 Аскорбинова киселина0,56 D(+)-биотин0,20 D-калциев пантотенат0,20 Холин хлорид5,00 Фолиева киселина10,00 мио-инозитол36,00 Никотинамид0,50 Никотинова киселина0,50 Пиридоксал HCl0,50 Пиридоксин HCl0,50 Рибофлавин0,20 Тиамин HCl0,20 Витамин В122,00

€30.00

без ДДС и доставка

Среда 199, съдържание: 2,7 mM стабилен глутамин, съдържание: 2,2 g/L NaHCO₃, съдържание: EBSS

Medium 199 е универсална и широко използвана среда за клетъчна култура, специално разработена за отглеждане на първични експланти. Тази комплексна среда съчетава основни витамини, аминокиселини и други фактори, за да осигури напълно дефиниран източник на хранителни вещества за разнообразни видове клетки. Тя е особено подходяща за нетрансформирани клетки, което я превръща в безценен инструмент за биологични изследвания. Среда 199 предлага широк спектър от приложения в тази област. Тя може ефективно да поддържа кумулус-ооцитен комплекс (COC) и да подпомага in vitro съзряването на ооцитите. Освен това се използва за промиване на аспирационните тръби при събиране на яйцеклетки от крави от породата „Германска Холщайн“. Също така, средата 199 служи като отлична среда за култивиране на сърдечни ендотелиални клетки, получени от плъхове. Тези приложения демонстрират многофункционалността и адаптивността на средата 199 към различни експериментални нужди. История Разработването на Medium 199 през 50-те години на миналия век бележи значителен напредък в областта на средите за тъканни култури. Преди въвеждането му много културални среди разчитаха на продукти от животински произход и тъканни екстракти. Морган и колегите му обаче революционизираха областта, като създадоха напълно дефиниран хранителен източник за клетъчни култури. Чрез своите експерименти с различни комбинации от витамини, аминокиселини и други фактори те откриха изключителните свойства на среда 199 за стимулиране на растежа. Контрол на качеството • pH = 7,2 ± 0,02 при 20–25 °C. • Всяка партида е тествана за стерилност и липса на микоплазма и бактерии. Съхранение • Съхранявайте в хладилник при температура от +2°C до +8°C на тъмно. Замразяването и затоплянето до +37°C намаляват качеството на продукта. • Не загрявайте средата до температура над 37°C и не използвайте неконтролируеми източници на топлина (например микровълнови печки). • Ако ще се използва само част от средата, извадете това количество от бутилката и го затоплете до стайна температура. • Срокът на годност за всички среди, с изключение на основната среда, е 8 седмици от датата на производство. Състав Съставки mg/L Неорганични соли Калциев хлорид x 2H₂O 264,92 Железен (III) нитрат x 9H₂O 0,72 Магнезиев сулфат 97,67 Калиев хлорид 400,00 Натриев ацетат х 3H₂O 82,95 Натриев хлорид 6 800,00 Натриев дихидрогенфосфат x H₂O 140,00 Други съставки Аденин сулфат 10,00 AMP 0,20 АТФ 1,00 Холестерол 0,20 2'-Дезоксирибоза 0,50 D(+)-глюкоза безводна 1,000.00 Глутатион (ред.) 0,05 Гуанин х HCl 0,30 Хипоксантин 0,30 Фенол червено 10,00 D-рибоза 0,50 Тимин 0,30 Tween 80 4,90 Урацил 0,30 Ксантин 0,30 NaHCO₃ 2 200,00 Аминокиселини L-аланин 25,00 L-аргинин x HCl 70,00 L-аспарагинова киселина 30,00 L-цистеин x HCl x H₂O 0,10 L-цистин 20,00 Стабилен L-глутамин 149,00 L-глутаминова киселина 67,00 Глицин 50,00 L-хистидин x HCl x H2O 21,88 L-хидроксипролин 10,00 L-изолевцин 20,00 L-лейцин 60,00 L-лизин x HCl 70,00 L-метионин 15,00 L-фенилаланин 25,00 L-пролин 40,00 L-серин 25,00 L-треонин 30,00 L-триптофан 10,00 L-тирозин 40,00 L-валин 25,00 Витамини 4-аминобензоена киселина 0,05 Аскорбинова киселина 0,05 D(+)-биотин 0,01 Калциферол 0,10 D-калциев пантотенат 0,01 Холин хлорид 0,50 Фолиева киселина 0,01 мио-инозитол 0,05 Менадион 0,01 Никотинова киселина 0,025 Никотинамид 0,025 Пиридоксал х HCl 0,025 Пиридоксол х HCl 0,025 Рибофлавин 0,01 DL-α-токоферол фосфат, динатриева сол 0,01 Тиамин х HCl 0,01 Витамин А ацетат 0,14

€40.00

без ДДС и доставка

Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850013

Среда за растеж на микросъдови ендотелни клетки

Средата за растеж на микросъдови ендотелни клетки се използва за култивиране на човешки микросъдови ендотелни клетки, например от дермата, белия дроб или сърцето. Пълната среда съдържа фетално телешко серум, L-глутамин, ECGS/H (добавка за растеж на ендотелни клетки с хепарин), EGF и хидрокортизон. За дефинирани рекомбинантни растежни фактори, включително VEGF, изберете усъвършенстваната среда за растеж на микросъдови ендотелиални клетки. Предлагаме средата като 500 мл базова среда, самостоятелно или заедно с добавките, като отделни компоненти или като предварително смесена добавка (Supplement-Mix). Отделните компоненти позволяват отделните фактори да бъдат коригирани или изключени, докато „Supplement-Mix“ се добавя в една единствена стъпка. Базовата среда се предлага и без фенол червено в същите формати, което предотвратява интерференция с флуоресцентни и колориметрични измервания, както и слабата естрогенподобна активност на фенол червеното. Добавките са необходими за употреба, като и двата формата на добавките се предлагат и поотделно. След добавянето им пълната среда съдържа 5 % FCS (25 мл на 500 мл базова среда).

€180.00

без ДДС и доставка

Среда за клетъчен растеж NCI-H295R

Открийте усъвършенстваната среда за клетъчен растеж NCI-H295R – експертно разработен хранителен разтвор, специално предназначен да подпомага растежа и поддържането на клетъчни линии от бозайници, включително специализираните клетки NCI-H295R. Тази среда се отличава с уникалната си комбинация от модифицирана среда на Дълбеко (DMEM) и F-12 на Хам (Nutrient Mixture F-12) в точно съотношение 1:1, обогатена с незаменими добавки, за да отговори на сложните нужди на клетъчната култура. Подобрена формула за превъзходни резултати при клетъчната култура • Допълнена базова основа: Основната среда вече е богата, като съчетава високите концентрации на аминокиселини и витамини в DMEM с разнообразните хранителни вещества на Ham’s F-12. Към тази мощна смес сме добавили 5% фетално телешко серум (FBS), което осигурява жизненоважни растежни фактори, хормони и протеини. • Специално подбрани добавки: Освен FBS, тази среда е обогатена с критично важни добавки, включително инсулин, трансферин, телешки серумен албумин, селенонова киселина и линоленова киселина. Тези добавки отговарят на специфичните клетъчни изисквания, като насърчават засиления клетъчен растеж, метаболитните функции и цялостното здраве. • Допълнителен приток на L-глутамин: Наличието на L-глутамин допълнително усилва ефективността на средата, като подпомага жизненоважни метаболитни процеси и стимулира интензивна клетъчна пролиферация. Оптимизирана за клетъчна култура • Среда с контролирано pH: Благодарение на включената бикарбонатна буферна система и индикатора фенол червено, средата осигурява стабилна среда с pH. Тя е оптимизирана за атмосфера с 5% CO₂, което позволява прецизно наблюдение и регулиране на pH. • Качество и чистота: Всяка партида от основната среда преминава през строги тестове за стерилност, микоплазма и бактерии, което гарантира целостта на средата. С среда с поддържано pH можете да разчитате на постоянното качество и ефективност на тази среда. Работа и съхранение Поддържайте качеството на средата, като я съхранявате в хладилник при температура от +2 °C до +8 °C, на място, защитено от светлина. Избягвайте екстремни условия, като замръзване или прегряване, за да запазите нейната ефективност. При частично използване леко затоплете необходимото количество до стайна температура, като се уверите, че средата е доведена до подходящо състояние, без да се нарушават нейните компоненти. Срок на годност С срок на годност от 8 седмици от датата на производство, средата за клетъчен растеж NCI-H295R е надежден избор за вашите нужди в областта на клетъчните култури, като гарантира жизнеността и продуктивността на вашите изследвания.

€150.00

без ДДС и доставка

PBS

Фосфатно-буферираният физиологичен разтвор (PBS) е широко използван буферен разтвор в биологичните и химическите изследвания. Той играе ключова роля за поддържането на pH-баланса и осмоларността по време на различни експериментални процедури, включително обработката на тъкани и клетъчните култури. Нашият PBS разтвор е внимателно формулиран с високочисти съставки, за да се гарантира стабилност и надеждност при всеки експеримент. Осмоларността и концентрациите на йони в нашия PBS много точно наподобяват тези в човешкото тяло, което го прави изотоничен и нетоксичен за повечето клетки. Състав на нашия PBS разтвор Нашият PBS разтвор е смес с регулирано pH от фосфатни буфери с ултрачистота и физиологични разтвори. При работна концентрация 1X той съдържа: • 8000 mg/L натриев хлорид (NaCl) • 200 mg/L калиев хлорид (KCl) • 1150 mg/L безводен двуосновен натриев фосфат (Na₂HPO₄) • 200 mg/L безводен моноосновен калиев фосфат (KH₂PO₄) Този състав осигурява оптимално pH и йонен баланс, подходящ за широк спектър от биологични приложения. Приложения на нашия PBS разтвор Нашият PBS разтвор е идеален за различни приложения в биологичните изследвания. Неговите изотонични и нетоксични свойства го правят подходящ за разреждане на вещества и изплакване на съдове за клетки. PBS разтворите, съдържащи EDTA, са ефективни за отделяне на прилепнали и слепени клетки. Въпреки това, двувалентни метали като цинк не трябва да се добавят към PBS, тъй като това може да доведе до утаяване. В такива случаи се препоръчват буферите на Good. Освен това нашият PBS разтвор е приемлива алтернатива на средата за транспортиране на вируси за транспортиране и съхранение на РНК вируси, включително SARS-CoV-2. Контрол на качеството • Стерилно филтриран Съхранение и срок на годност • Съхранявайте при температура от +2 °C до +25 °C, защитено от светлина. • След отваряне съхранявайте при температура от 2 °C до 25 °C и използвайте в рамките на 24 месеца. Условия за транспортиране • Околна температура Съхранение • Съхранявайте в хладилник при температура от +2 °C до +8 °C на тъмно. Избягвайте замразяване и често затопляне до +37 °C, тъй като това намалява качеството на продукта. • Не загрявайте средата над 37 °C и не използвайте неконтролирани източници на топлина, като например микровълнови печки. • Ако ще се използва само част от средата, извадете необходимото количество и го затоплете до стайна температура преди употреба. Състав Категория Съставки Концентрация (mg/L) Соли Калиев хлорид 200 Монобазичен безводен калиев фосфат 200 Натриев хлорид 8000 Двуосновен натриев фосфат, безводен 1150

€20.00

без ДДС и доставка

RPMI 1640, съдържащ 2,0 mM стабилен глутамин, съдържащ 2,0 g/L NaHCO₃

Средата RPMI 1640, известна още като среда RPMI, е изключително универсална среда за клетъчна култура, широко използвана в биологичните изследвания за отглеждане на различни клетки от бозайници. Разработена от Джордж Е. Мур, Робърт Е. Гърнър и Х. Адисън Франклин през 1966 г. в прочутия Комплексен онкологичен център „Розуел Парк“, тази среда е получила името си от мястото на своето създаване – Мемориалния институт „Розуел Парк“ (RPMI). Първоначално създадена да подпомага растежа на човешки левкемични клетки както в суспензионни, така и в монослойни култури, средата RPMI 1640 е претърпяла редица модификации от страна на изследователи и търговски доставчици, за да стане подходяща за широк спектър от клетки на бозайници. Тя е изключително съвместима с клетъчни линии като HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, астроцити и карциноми. Средата RPMI 1640 се отличава от другите среди за клетъчни култури благодарение на уникалния си състав. Тя съдържа значително количество фосфати, аминокиселини и витамини. По-специално, тя включва биотин, витамин В12 и PABA, които липсват в минималната есенциална среда на Игъл (Eagle's Minimal Essential Medium) или в модифицираната среда на Дълбеко (Dulbecco's Modified Eagle Medium). Освен това средата RPMI 1640 се характеризира със значително повишени концентрации на витамините инозитол и холин. Тя обаче не съдържа протеини, липиди или растежни фактори. Поради това обикновено се налага добавянето на 10% фетално телешко серум (FBS), за да се осигурят оптимални условия за клетъчен растеж. Буферната система на средата RPMI 1640 се основава на натриев бикарбонат и изисква среда с 5–10% CO₂, за да се поддържа физиологично подходящо pH. Включването на редуциращия агент глутатион допълнително отличава тази среда от останалите. Контрол на качеството • Стерилно филтрирана Съхранение и срок на годност • Съхранявайте при температура от +2 °C до +8 °C, защитена от светлина. • След отваряне съхранявайте при 4 °C и използвайте в рамките на 6–8 седмици. Условия за транспортиране • Околна температура Съхранение • Съхранявайте в хладилник при температура от +2 °C до +8 °C на тъмно. Избягвайте замразяване и често затопляне до +37 °C, тъй като това намалява качеството на продукта. • Не загрявайте средата над 37 °C и не използвайте неконтролирани източници на топлина, като например микровълнови печки. • Ако ще се използва само част от средата, извадете необходимото количество и го затоплете до стайна температура преди употреба. Състав Категория Съставки Концентрация (mg/L) Аминокиселини Глицин 10,00 L-аланил-L-глутамин 434,40 L-аргинин 200,00 L-аспарагинH2O 56,82 L-аспарагинова киселина 20,00 L-цистин 2HCl 65,20 L-глутаминова киселина 20,00 L-хистидин HClH₂O 20,27 L-хидрокси-L-пролин 20,00 L-изолевцин 50,00 L-лейцин 50,00 L-лизин HCl 40,00 L-метионин 15,00 L-фенилаланин 15,00 L-пролин 20,00 L-серин 30,00 L-треонин 20,00 L-триптофан 5,00 L-тирозин 2Na2H2O 28,83 L-валин 20,00 Витамини п-аминобензоена киселина 1,00 D-биотин 0,20 Холин хлорид 3,00 D-калциев пантотенат 0,25 Фолиева киселина 1,00 мио-инозитол 35,00 Никотинамид 1,00 Пиридоксин HCl 1,00 Рибофлавин 0,20 Тиамин HCl 1,00 ВитаминВ12 0,005 Неорганични соли Ca(NO₃)₂4H₂O 100,00 KCl 400,00 MgSO₄7H₂O 100,00 NaCl 6000,00 NaHCO₃ 2000,00 Na₂HPO₄ 800,00 Други съставки D-глюкоза 2000,00 L-глутатион (редуциран) 1,00 Фенол червено натриева сол 5,30

€25.00

без ДДС и доставка

Cytion Skeletal muscle cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850082

Среда за растеж на скелетни мускулни клетки

Средата за растеж на скелетни мускулни клетки поддържа пролиферацията на човешките скелетни миобласти и предотвратява преждевременното им сливане, което позволява размножаването на клетките преди диференциацията. Пълната среда съдържа фетално телешко серум, L-глутамин, фетуин, EGF, bFGF, човешки рекомбинантен инсулин и дексаметазон. За сливане в миотуби преминавайте към среда за диференциация на скелетни мускулни клетки. Предлагаме средата като 500 мл базова среда, самостоятелно или заедно с добавките, като отделни компоненти или като предварително смесена добавка (Supplement-Mix). Отделните компоненти позволяват отделните фактори да бъдат коригирани или изключени, докато „Supplement-Mix“ се добавя в една стъпка. Добавките са необходими за употреба, като и двата формата на добавките се предлагат и поотделно. След добавянето на добавките пълната среда съдържа 5 % FCS (25 мл на 500 мл базова среда).

€210.00

без ДДС и доставка

Cytion Smooth muscle cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850075

Среда за растеж на гладкомускулни клетки

Средата за растеж на гладкомускулни клетки се използва за култивиране на човешки гладкомускулни клетки от съдови и несъдови тъкани, като аорта, коронарна и белодробна артерия, бронхи, трахея и пикочен мехур. Пълната среда съдържа фетално телешко серум, L-глутамин, EGF, bFGF и човешки рекомбинантен инсулин. Предлагаме средата като 500 мл базова среда, самостоятелно или заедно с добавките, като отделни компоненти или като предварително смесена „Supplement-Mix“. Отделните компоненти позволяват отделните фактори да бъдат регулирани или изключени, докато „Supplement-Mix“ се добавя в една стъпка. Базовата среда се предлага и без фенол червено в същите формати, което предотвратява смущения при флуоресцентни и колориметрични измервания, както и слабата естрогенподобна активност на фенол червеното. Добавките са необходими за употреба, като и двата формата на добавките се предлагат и поотделно. След добавяне на добавките пълната среда съдържа 5 % FCS (25 мл на 500 мл базова среда).

€240.00

без ДДС и доставка

Stable Glutamin (200mM), L-Alanyl-L-Glutamine Solution

Volume: 100 ml Storage: ≤ –15°C Sterility: Sterile-filtered Stable Glutamine Solution (L-Alanyl-L-Glutamine, 200 mM) is a highly stable dipeptide form of L-glutamine designed as a direct replacement for conventional L-glutamine in cell culture media. L-glutamine is an essential amino acid and a major energy source for cultured cells, playing a critical role in cell growth, metabolism, and protein synthesis. Application and Benefits In standard liquid media, L-glutamine degrades relatively quickly at 37°C, leading to the formation of toxic byproducts such as ammonium ions that can negatively affect cell viability and experimental outcomes. Stable glutamine overcomes this limitation by providing a non-degrading dipeptide form that remains intact in culture conditions. Cells enzymatically cleave the dipeptide bond to release L-glutamine as needed, ensuring a continuous fresh supply while preventing the accumulation of harmful waste products. This makes the solution particularly advantageous for long-term cell cultures and high-density growth systems. Formulation and Usage The L-Alanyl-L-Glutamine solution is prepared in cell culture–grade water at a concentration of 200 mM and is sterile-filtered for contamination-sensitive applications. It can be diluted directly into complete media according to experimental requirements. Store at ≤ –15°C and avoid repeated freeze-thaw cycles to maintain product stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

без ДДС и доставка

Среди за клетъчни култури: Общ преглед

В областта на биологичните науки една от най-важните методики е клетъчната култура. Под „клетъчна култура“ се разбира извличането на клетки, тъкани или органи от животно или растение и последващото им имплантиране в изкуствена среда, благоприятна за тяхното оцеляване и/или растеж. Основните изисквания към средата за оптимално развитие на клетките са контролирана температура, субстрат за прикрепване на клетките, подходяща среда за растеж и инкубатор, който поддържа оптималното pH и осмолалност. Клетките трябва да разполагат с тези условия, за да могат да се развият до пълния си потенциал.

Изборът на подходяща среда за растеж за култивиране in vitro е етапът в клетъчната култура, който е едновременно най-критичен и най-важен. Средата за растеж, известна още като културална среда, е течност или гел, формулиран така, че да стимулира развитието на организмите на микроскопично, клетъчно или растително ниво. Средата, използвана за култивиране на клетки, често съдържа достатъчно количество енергия и вещества, които регулират клетъчния цикъл. Основните компоненти на културалната среда включват аминокиселини, витамини, неорганични соли, глюкоза и серум. Серумът се добавя към средата, тъй като действа като източник на растежни фактори, хормони и фактори за прикрепване. Освен че осигурява хранителни вещества, средата допринася и за поддържането на нивата на рН и осмолалността.

Видове среди, използвани в клетъчната култура

Както човешките, така и животинските клетки могат да се отглеждат както в изкуствена или синтетична среда, така и в изцяло естествена среда, допълнена с природни елементи. По-долу ще ви представим обзор на различните видове среди, които са налични към момента.

Естествени среди

В естествените среди се срещат само биологични течности, които съществуват в естественото си състояние. Естествените среди са много полезни и лесни за култивирането на широка гама от видове животински клетки. Липсата на разбиране за точните компоненти, съставляващи естествените среди, е основният фактор, допринасящ за ниската повторяемост на резултатите, получени при използването на естествени среди.

Изкуствени среди

Приготвянето на изкуствени или синтетични среди включва добавянето на хранителни вещества (както органични, така и неорганични), серумни протеини, въглехидрати, кофактори, витамини и соли, както и газови фази на O₂ и CO₂ [1].

Разработени са различни видове изкуствени среди, за да изпълняват една или повече от следните функции: 1) Незабавно оцеляване (балансиран солев разтвор с точно определено рН и осмотично налягане). 2) Продължително оцеляване (балансиран солев разтвор, допълнен с различни състави от органични химикали и/или серум). 3) Неограничено развитие. 4) Специализирани функции.

Съществуват четири различни класификации на изкуствените среди:

Среди, съдържащи серум

Най-често срещаният вид добавка в средите, използвани за отглеждане на животински клетки, е фетално телешко серум. То се добавя към културалната среда като евтина добавка, за да се постигнат възможно най-добрите условия за растеж. Освен че действа като преносител или хелатор на нестабилни или неразтворими във вода хранителни вещества, хормони и растежни фактори, инхибитори на протеази и други вещества, серумът също така свързва и неутрализира вредни молекули.

Среда без серум

Наличието на серум в средите има редица недостатъци и може да доведе до сериозни грешки при интерпретацията на резултатите в имунологичните изследвания [2, 3]. Създадени са различни видове безсерумни среди [4, 5]. Тези среди обикновено са специално формулирани, за да поддържат култивирането на един-единствен тип клетки, като например Knockout Serum Replacement и Knockout DMEM от Thermo Fisher Scientific, както и средата mTESR от Stem Cell Technologies [6], предназначена за стволови клетки [7].

Освен това тези среди съдържат определени количества пречистени растежни фактори, липопротеини и други протеини, които иначе обикновено се осигуряват от серума [8]. Тези среди често се наричат „дефинирани културални среди“, тъй като съставните им компоненти са добре изучени.

Химически дефинирани среди

Тези среди включват ултрачисти неорганични и органични компоненти, които не са били замърсени по никакъв начин. Те могат да включват и добавки от чисти протеини, като например растежни фактори.

 Генетичната модификация на бактерии или дрожди, заедно с добавянето на определени мастни киселини, витамини, холестерол и аминокиселини, води до производството на техните съставни части [9].

Среди без протеини

Безпротеиновите среди са тези, които изобщо не съдържат протеини, а вместо това включват само непротеинови елементи. В сравнение със средите с добавен серум, използването на среди без добавени протеини спомага за по-голяма клетъчна пролиферация и протеинова експресия и улеснява пречистването на всеки продукт, получен в последващ процес [10–12]. Протеинът не се включва в формулировки като MEM и RPMI-1640. При необходимост обаче може да се добави протеинова добавка.

Културални среди и техните основни компоненти

Търговските културални среди могат да се закупят под формата на прах или течност и често съдържат разнообразни хранителни вещества, като аминокиселини, глюкоза, соли, витамини и други хранителни добавки. 

Нуждите от тези компоненти са различни за всяка клетъчна линия, а тези различия са причината за голямото разнообразие от формулировки на среди. Всеки компонент отговаря за определена функция, която ще бъде описана в следващите параграфи:

Буферни системи

За да се поддържат оптимални условия за растеж, pH трябва да се контролира, което често се извършва чрез една от двете буферни системи:

Естествена буферна система

Съотношението CO₂/H₂CO₃ в атмосферата е равно на това в средата, което създава естествен буферен механизъм. За да се запази този естествен буферен механизъм, културите трябва да се поддържат във въздушна среда с 5–10% CO₂, което често се постига чрез използване на CO₂ инкубатор. Едно от най-големите предимства на използването на естествен буфер е, че той е евтин и безопасен.

HEPES

Химичното буфериране с помощта на цвитериона HEPES има по-голяма буферна способност в диапазона на pH 7,2–7,4 и не изисква регулирана газова среда. За определени видове клетки по-голяма доза HEPES може да бъде вредна. Средите, съдържащи HEPES, са също така много по-податливи на фототоксичните ефекти на флуоресцентната светлина [13].

Фенол червено

Индикаторът за рН фенол червено често се включва в търговски достъпните културални среди, което позволява непрекъснато наблюдение на рН. При размножаването на клетките метаболитите, произвеждани от тях, предизвикват промяна в рН и съответно промяна в цвета на средата. Фенол червено оказва двоен ефект върху цвета на средата, като я оцветява в жълто при кисело pH и в лилаво при алкално pH. pH 7,4, оптималната стойност за клетъчна култура, кара средата да изглежда флуоресцентно червена.

Фенол червено обаче има няколко недостатъка: Първо, фенол червено може да имитира действието на редица стероидни хормони, предимно естроген [14]. Поради това при изследване на естроген-чувствителни клетки, като например тъкан от млечната жлеза, се препоръчва среда без фенол червено. Натриево-калиевият баланс се нарушава от присъствието на фенол червено в няколко безсерумни формулировки. Добавянето на серум или говежди хипофизен хормон към средите може да неутрализира този ефект [15]. На трето място, откриването при експерименти с проточна цитометрия се затруднява от присъствието на фенол червено.

Неорганични соли

Средите, съдържащи неорганични соли, като натриеви, калиеви и калциеви йони, спомагат за поддържането на осмотичното равновесие и регулират мембранния потенциал.

Аминокиселини

Тъй като аминокиселините са основните съставни части на протеините, те са незаменим компонент на всяка културална среда за клетъчен растеж, която някога е била създадена. Тъй като клетките не са в състояние сами да произвеждат определени аминокиселини, е важно културалната среда да съдържа незаменими аминокиселини. Те са необходими за пролиферацията на клетките, а концентрацията, в която се съдържат, определя максималната клетъчна плътност, която може да бъде постигната. По-специално, L-глутаминът, една незаменима аминокиселина, е от особено голямо значение.

L-глутаминът функционира като вторичен източник на енергия за метаболизма и доставя азот за производството на NAD, NADPH и нуклеотиди. Тъй като L-глутаминът е нестабилна аминокиселина, която с времето се превръща във форма, която клетките не могат да усвоят, той трябва да се добавя към средата.

Освен това в средата могат да се добавят неесенциални аминокиселини, за да се възстановят тези, които са били изразходвани по време на процеса на растеж. Растежът на клетките се ускорява, а жизнеспособността им се повишава, когато средата за растеж се допълва с неесенциални аминокиселини.

Въглехидрати

Въглехидратите под формата на захари са основният източник на енергия. Много от средите съдържат също малтоза и фруктоза, в допълнение към по-разпространените захари – глюкоза и галактоза.

Протеини и пептиди

Албуминът, трансферинът и фибронектинът са най-често използваните протеини и пептиди. Те са особено важни в среди, които не съдържат серум. Албуминът, трансферинът, апротининът, фетуинът и фибронектинът са някои от протеините, които могат да се открият в серума, който е богат източник на протеини.

Албуминът е основният протеин в кръвта и неговата функция е да свързва и транспортира различни вещества, включително вода, соли, свободни мастни киселини, хормони и витамини, между различните органи и клетки. Способността на албумина да се свързва с химични вещества го прави ефективен кандидат за отстраняване на вредни съединения от средата, в която се култивират клетките.

Апротининът е защитен агент в системите за клетъчна култура, тъй като е стабилен при неутрално и кисело рН, както и устойчив на високи температури и на разрушаването, което може да бъде причинено от протеолитични ензими. Той е способен да инхибира редица серинови протеази, включително трипсин, наред с други.

Фетуинът е гликопротеин, който може да бъде открит в по-големи количества в серума на плода и новородените животни в сравнение със серума на възрастните. В допълнение към това той действа като инхибитор на сериновите протеази. Протеинът фибронектин е основен компонент в процеса на клетъчната адхезия. Трансферинът е протеин, който транспортира желязо и отговаря за доставянето на желязо до клетъчните мембрани.

Мастни киселини и липиди

Те играят решаваща роля в безсерумната среда, когато липсва серум.

Витамини

Многобройни витамини са необходими за развитието и пролиферацията на клетките. Витамините не могат да се произвеждат в достатъчни количества от клетките и затова са незаменими в тъканните култури като хранителни добавки.

При клетъчната култура серумът е основният източник на витамини; обаче средите се обогатяват и с различни витамини, за да бъдат подходящи за конкретен тип клетки. Най-често витамините от група В се използват за стимулиране на растежа.

Микроелементи

Химични елементи като мед, цинк, селен и междинни съединения на трикарбоксилната киселина са известни като микроелементи. Микроелементите често се добавят към среди, които не съдържат серум, за да заменят тези, които обикновено се съдържат в серума. Тези елементи са важни химични компоненти, необходими за здравословното развитие на клетките. Много биохимични реакции зависят от определени микроелементи, като например ензимната активност.

Добавки към средата

Пълната среда за растеж, препоръчвана за определени клетъчни линии, се нуждае от допълнителни компоненти, които липсват в базовите среди и серума. Тези хранителни добавки подпомагат клетъчния растеж и нормалната метаболитна функция.

Въпреки че хормоните, растежните фактори и сигналните молекули са от съществено значение за правилното размножаване на конкретни клетъчни линии, винаги трябва да се спазват следните предпазни мерки: Тъй като добавянето на добавки може да промени осмолалността на пълната среда за растеж, което може да попречи на развитието на клетките, винаги е препоръчително да се провери осмолалността след добавянето на добавки. За по-голямата част от клетъчните линии оптималната осмолалност варира между 260 и 320 mOSM/kg.

Антибиотици

Антибиотиците често се използват за потискане на развитието на бактериални и гъбични замърсители [16], въпреки че не са необходими за клетъчния растеж. Тъй като антибиотиците могат да прикрият замърсяване с микоплазма и резистентни бактерии, рутинното им използване не се препоръчва при клетъчни култури [17, 18].

Освен това антибиотиците могат да нарушат метаболизма на свръхчувствителните клетки. Често се използват комбинациите от пеницилин и стрептомицин, произведени от MilliporeSigma и Life Technologies. Плазмоцин е бил използван при култивирането на глиомните клетъчни линии TS603, TS516 и BT260 [19] и е доказано, че е ефективен при отстраняването на микоплазмена контаминация (20).

Серум

В серума се съдържат албумини, растежни фактори и инхибитори на растежа. Серумът е един от най-важните компоненти на средата за клетъчна култура, тъй като осигурява аминокиселини, протеини, витамини (особено мастноразтворими витамини като А, D, Е и К), въглехидрати, липиди, хормони, растежни фактори, минерали и микроелементи.

Често се използва серум от фетални и телешки източници, за да се стимулира развитието на култивираните клетки. Феталният серум е богат източник на растежни фактори и е подходящ за клониране на клетки и развитието на чувствителни клетки. Поради намалените си способности за стимулиране на растежа телешкият серум се използва в експерименти за контактна инхибиция. Обикновено културалните среди съдържат от 2% до 10% серум. Добавянето на серум към културалната среда служи за следните цели [21]:

  • Серумът доставя необходимите за клетките хранителни вещества (както в разтвор, така и свързани с протеини).

  • В серума са включени няколко растежни фактори и хормони, участващи в стимулирането на растежа и специализираната клетъчна активност.

  • То предоставя много свързващи протеини, като албумин и трансферин, които транспортират други химични вещества в клетката. Например, албуминът доставя мазнини, витамини, хормони и др. в клетките.

  • То осигурява също така протеини, като фибронектин, които увеличават клетъчната адхезия към субстрата. Освен това, то произвежда елементи за разпространение, които подпомагат разширяването на клетките преди деленето.

  • То доставя инхибитори на протеазите, които предотвратяват протеолизата в клетките.

  • Съдържа също минерали като Na+, K+, Zn2+ и Fe2+.

  • Той повишава вискозитета на средата, като по този начин предпазва клетките от механични увреждания по време на разбъркването на суспензионната култура.

  • Той действа и като буфер.

Източници

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Хранене на животински клетки в тъканна култура; първоначални проучвания върху синтетична среда. Proc Soc Exp Biol Med. 1950;73:1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Бърза адсорбция на компонент от фетално телешко серум от клетки на бозайници в култура. Потенциален източник на артефакти в проучванията на антисера срещу клетъчно-специфични антигени. Immunology. 1976;31:881-91

[3] Сула К., Драбер П., Нуза К. Добавянето на серум към средата, използвана за приготвяне на клетъчни суспензии, като възможен източник на артефакти при клетъчно-медиирани реакции, изследвани посредством теста с поплитеалния лимфен възел. J Immunogenet. 1980;7:483-9

[4] Мариани Е., Мариани А., Монако М., Лали Е., Витале М., Факини А. Търговски безсерумни среди: растеж на хибридоми и производство на моноклонални антитела. J Immunol Methods. 1991;145:175-83

[5] Barnes D, Sato G. Методи за отглеждане на култивирани клетки в безсерумна среда. Anal Biochem. 1980;102:255-70

[6] Ю Х., Лу С., Гасиор К., Сингх Д., Васкес Санчес С., Тапиа О. и др. Шапероните HSP70 пренасят TDP-43 без РНК в анизотропни интрануклеарни течни сферични обвивки. Science. 2021;371:

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, и др. Стареенето, предизвикано от синдрома на Даун, нарушава ядрената архитектура на невронните предшественици. Cell Stem Cell. 2022;29:116-130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Пълно заместване на серума с албумин, трансферин и соеви липиди в култури от В-лимфоцити, реагиращи на липополизахариди. J Exp Med. 1978;147:923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Систематично усъвършенстване на химически дефинирана среда без протеини за растеж на хибридоми и производство на моноклонални антитела. J Biotechnol. 1996;45:111-23

[10] Darfler F. Среда без протеини за растеж на хибридоми и други клетки на имунната система. In Vitro Cell Dev Biol. 1990;26:769-78

[11] Barnes D, Sato G. Клетъчна култура без серум: обединяващ подход. Cell. 1980;22:649-55

[12] Hamilton W, Ham R. Клонален растеж на клетъчни линии от китайски хамстер в безпротеинови среди. In Vitro. 1977;13:537-47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Анализ на цитотоксичните ефекти на изложена на светлина културална среда, съдържаща HEPES. In Vitro Cell Dev Biol. 1985;21:282-7

[14] Бертоа И., Каценеленбоген Ж., Каценеленбоген Б. Фенол червено в средите за тъканни култури е слаб естроген: последствия за изследването на естроген-чувствителни клетки в култура. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986;83:2496-500

[15] Karmiol S. Разработване на безсерумни среди. В: Master JRW, редактор. Клетъчна култура на животни, 3-то изд. Оксфорд: Oxford University Press; 2000.

[16] Perlman D. Използване на антибиотици в среди за клетъчни култури. Methods Enzymol. 1979;58:110-6

[17] McGarrity G. Разпространение и контрол на микоплазмена инфекция в клетъчни култури. In Vitro. 1976;12:643-8

[18] Мастърс Дж., Стейси Г. Смяна на средата и пасажиране на клетъчни линии. Nat Protoc. 2007;2:2276-84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M и др. Хистоновата деметилаза KDM6A директно усеща кислорода, за да контролира хроматина и съдбата на клетката. Science. 2019;363:1217-1222

[20] Мола Каземиха В., Азари С., Аманзаде А., Бонакдар С., Шоджаеи Могадам М., Хабиби Анбухи М. и др. Ефективност на Plasmocin™ върху различни клетъчни линии на бозайници, инфектирани с моликути, в сравнение с често използвани антибиотици в клетъчни култури: местен опит. Cytotechnology. 2011;63:609-20

[21] Краг Хансен У. Молекулни аспекти на свързването на лиганда със серумния албумин. Pharmacol Rev. 1981;33:17-53