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H-4-II-E
Gewebe
Leber
Krankheit
Hepatozelluläres Karzinom der Ratte
Synonyme
H-4-II-E, H4IIE

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H-4-II-E

Cell line · Artikelnummer 305204

The H-4-II-E cell line is a hepatoma-derived cell line, specifically developed from the liver tissue of an adult rat. This cell line is frequently utilize...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die H-4-II-E Zelllinie ist eine Hepatom-Zelllinie, die speziell aus dem Lebergewebe einer erwachsenen Ratte entwickelt wurde. Diese Zelllinie wird häufig in der Forschung auf dem Gebiet der Leberphysiologie und -pathologie eingesetzt, insbesondere in Studien zum hepatozellulären Karzinom und zum Leberstoffwechsel. Die H-4-II-E-Zellen haben eine epithelähnliche Morphologie und sind für ihre schnelle Wachstumsrate und hohe Zelldichte bekannt, was sie zu einem wertvollen Modell für Hochdurchsatz-Screening und toxikologische Studien macht.

Insbesondere weisen H-4-II-E-Zellen mehrere differenzierte Funktionen von Hepatozyten auf, darunter Albuminsekretion, Ammoniakproduktion und das Vorhandensein von Cytochrom-P450-Enzymen. Dies macht sie zu einem hervorragenden Instrument für die Untersuchung des Arzneimittelstoffwechsels, der Enzyminduktion und der Wechselwirkungen, die bei menschlichen Lebererkrankungen auftreten können. Darüber hinaus wurden diese Zellen zur Untersuchung der Mechanismen der Leberregeneration und der Krebsprogression verwendet, was Einblicke in die zellulären Reaktionen auf verschiedene Stimuli wie Zytokine und Wachstumsfaktoren ermöglicht.

Gewebe
Leber
Krankheit
Hepatozelluläres Karzinom der Ratte
Synonyme
  • H-4-II-E
  • H4IIE

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
H-4-II-E (Cytion Katalognummer 305204)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_0284

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
2 bis 4 x 104 Zellen/cm2
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
AxC