Mine otse sisu juurde
CAL-51
Kude
Rind
Haigus
Kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
CAL 51, CAL51, Cal51, Centre Antoine Lacassagne-51

Dokumendid

CAL-51

Cell line · Toote number 305530

The CAL-51 cell line is a human breast adenocarcinoma model established from a malignant pleural effusion of a patient with advanced breast cancer. Charac...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

CAL-51 rakuliin on inimese rinnavähi adenokartsinoomi mudel, mis on loodud kaugelearenenud rinnavähiga patsiendi pahaloomulisest pleuraefusioonist. CAL-51 iseloomustab epiteelמורfoloogia ja normaalne diploidsed kromosoomid ning see on eriti märkimisväärne oma kolmekordselt negatiivse rinnavähi (TNBC) profiili poolest, millel puudub östrogeeniretseptor (ER), progesterooniretseptor (PR) ja HER2 ekspressioon. Nende markerite puudumine, mida tavaliselt kasutatakse ravieesmärkidena, teeb CAL-51-st väärtusliku mudeli TNBC uurimiseks, mis on agressiivne rinnavähi alatüüp, mille ravivõimalused on piiratud. CAL-51 tuumorigeensus immuunpuudulikkusega hiirtel ja kasv pehmes agaris näitab selle pahaloomulist potentsiaali, mis muudab selle sobivaks in vitro ja in vivo vähiuuringuteks.

CAL-51 on osutunud kasulikuks ka SARS-CoV-2 infektsioonimehhanismide uurimisel. Rakuliste sisenemisfaktorite ACE2 ja TMPRSS2 kõrge ekspressioon koos neuropilin-1 (NRP1)ga muudab CAL-51 SARS-CoV-2 suhtes vastuvõtlikuks, hõlbustades viiruse sisenemist ja replikatsiooni rakukultuuris. See teeb CAL-51 sobivaks mudeliks viirusliku patogeneesi uurimiseks, samuti SARS-CoV-2-le suunatud viirusevastaste ühendite ja neutraliseerivate antikehade testimiseks. Eksperimendid näitavad, et terapeutilised antikehad võivad tõhusalt blokeerida SARS-CoV-2 sisenemist CAL-51 rakkudesse, rõhutades selle olulisust COVID-19 uuringute ja potentsiaalse terapeutilise hindamise mudelisüsteemina.

Vähktõve uuringutes on CAL-51 eriti kasulik kasvaja heterogeensuse uurimiseks, eriti selle tüvirakkudele sarnaste vähirakkude alarühmade kaudu, mida tuntakse kui kõrvalpopulatsioonid (SP) ja mis ekspresseerivad kõrgel tasemel ABCG2 transportaatorit. CAL-51 SP-rakud näitavad suurenenud ravimresistentsust ja potentsiaalset eneseuuenemist, mis on olulised omadused vähirakkude käitumise ja raviresistentsuse uuringutes. Seega on CAL-51 mitmekülgne mudel, mis aitab kaasa nii vähi- kui ka viirusinfektsioonide uuringutele, toetades uurimistööd keerulistes terapeutilistes valdkondades, nagu TNBC ja SARS-CoV-2.

Kude
Rind
Haigus
Kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • CAL 51
  • CAL51
  • Cal51
  • Centre Antoine Lacassagne-51

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
CAL-51 (Cytioni katalooginumber 305530)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1110

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1,25 x 104 rakku/cm2
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
45 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia