Ga naar de inhoud
B-LCL-HROC43
Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Carcinoom
Synoniemen
Bc HROC43

Documenten

B-LCL-HROC43

Cell line · Productnummer 302067

B-LCL-HROC43 is een door het Epstein-Barr-virus (EBV) onsterfelijk gemaakte menselijke B-lymfoblastoïde cellijn, die is opgezet uit B-lymfocyten die zijn geïsoleerd uit tumorweefsel...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Weinig op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
1

01Algemene informatie

Beschrijving

B-LCL-HROC43 is een door het Epstein-Barr-virus (EBV) geïmmortaliseerde menselijke B-lymfoblastoïde cellijn die is opgezet uit B-lymfocyten die zijn geïsoleerd uit tumorweefsel of perifeer bloed van een volwassen patiënt. De cellen werden gegenereerd door ex vivo infectie met EBV-bevattend supernatant afkomstig van de B95/8 marmoset-cellijn in aanwezigheid van cyclosporine A om de groei van T- en NK-cellen te onderdrukken. Na enkele weken kweken werd een stabiele lymfoblastoïde groei bereikt, wat resulteerde in een continu prolifererende monoklonale of oligoklonale B-celpopulatie die geschikt is voor langdurige in vitro expansie.

Immunofenotypisch vertoont B-LCL-HROC43 een volwassen en geactiveerd B-celprofiel dat wordt gekenmerkt door expressie van CD19 en CD20, samen met hoge niveaus van activerings- en rijpingsmarkers zoals CD23 en CD80. Sterke expressie van MHC klasse I- en klasse II-moleculen duidt op een behouden antigeenpresentatiecapaciteit. Afhankelijk van de individuele kloon kan variabele expressie van differentiatie-geassocieerde markers zoals CD27, CD38 of CD138 worden waargenomen, wat verschillende stadia van B-celrijping weerspiegelt. De cellen zijn negatief voor T-celmarkers, wat de lijnspecifiekheid bevestigt.

Functioneel gezien scheidt B-LCL-HROC43 immunoglobuline van een bepaald isotype (bijv. IgG, IgM of IgA) af, dat stabiel blijft tijdens langdurige kweek. De uitgescheiden antilichamen kunnen worden verzameld uit kweeksupernatanten en worden gebruikt voor downstreamtoepassingen, waaronder antigeenbindende assays, tumorcelherkenningsstudies of identificatie van ziektegerelateerde antigenen. Als een EBV-geïmmortaliseerd B-celmodel biedt B-LCL-HROC43 een robuust in-vitroplatform voor het onderzoeken van humorale immuunresponsen, B-celactivering en -differentiatie, en antilichaamgemedieerde mechanismen in de context van tumorimmunologie of systemische immuunresponsen.

Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Carcinoom
Synoniemen
  • Bc HROC43

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Ronde cellen
Celtype
B lymfoblast

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
B-LCL-HROC43 (Cytion catalogusnummer 302067)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_A7UN

05Expressie en vatbaarheid

Oppervlakte-antigenen
CD19
Virussen
Transformant: EBV

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% hitte-geïnactiveerde FBS
Heruitplanten
Homogeniseer de celsuspensie in de kolf voorzichtig door op en neer te pipetteren en neem vervolgens een representatief monster om de celdichtheid per ml te bepalen. Verdun de suspensie tot een celconcentratie van 1 x 105 cellen/ml met vers kweekmedium en verdeel de aangepaste suspensie in nieuwe kolven voor verdere kweek.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
72 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch