Przejdź do treści
ogniwa 2427T
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak płaskonabłonkowy płuc

Dokumenty

ogniwa 2427T

Cell line · Numer produktu 300167

Pochodzący z guza pierwotnego u 64-letniej pacjentki rasy kaukaskiej, u której zdiagnozowano płaskonabłonkowego raka płuca, szczep 2427T stanowi cenne źródło in vitro...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Pochodzący z guza pierwotnego 64-letniej kobiety rasy kaukaskiej, u której zdiagnozowano raka płaskonabłonkowego płuc, 2427T stanowi cenny model in vitro, który odtwarza cechy morfologiczne pierwotnej tkanki nowotworowej. Charakteryzujące się charakterystycznym małym, okrągłym kształtem i skłonnością do łączenia się w skupiska, komórki 2427T wykazują kluczowe cechy morfologiczne typowe dla raka płaskonabłonkowego (SCC).

Cechą charakterystyczną linii komórkowej 2427T jest ekspresja cytokeratyny 5/6 (CK5/6), markera wskazującego na pochodzenie SCC. Niejednorodna ekspresja CK5/6 wskazuje na obecność różnych subpopulacji komórek w hodowli 2427T, co stanowi okazję do dalszego badania heterogeniczności wewnątrznowotworowej.

Immunofenotypowanie 2427T ujawniło jego unikalny profil, w tym brak markera CK7 związanego z gruczolakorakiem, markera progenitorowego hemato-endotelialnego CD34 i markera leukocytów CD45, wzmacniając jego klasyfikację w linii płaskonabłonkowej. Co ciekawe, podczas gdy linia komórkowa generalnie wykazuje negatywność dla markerów neuroendokrynnych, takich jak CD56, synaptofizyna (SYP), enolaza specyficzna dla neuronów (NSE) i chromogranina A (CHGA), ekspresja SYP w podzbiorze komórek sugeruje pewien stopień heterogeniczności markerów neuroendokrynnych.

Co najważniejsze, linia komórkowa 2427T nie zawiera mutacji EGF-R ani k-ras, co odróżnia ją od innych modeli i podkreśla jej potencjał jako nowego źródła do badania biologii i podatności terapeutycznej płaskonabłonkowego niedrobnokomórkowego raka płuca (NSCLC). Ten brak powszechnych mutacji onkogennych pozycjonuje 2427T jako nieocenione narzędzie do badań mających na celu odkrycie podstawowych mechanizmów patogenezy i progresji raka płaskonabłonkowego.

Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak płaskonabłonkowy płuc

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik

03Cechy charakterystyczne

Nowotworotwórczy
Wysoka aktywność nowotworowa u nagich myszy.

04Identyfikatory

Źródło
2427T (numer katalogowy Cytion 300167)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_M070

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Synaptofizyna (SYP)
Ekspresja antygenu
Częściowa ekspresja CK5/6

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 50% pożywki podstawowej + 40% FBS + 10% DMSO lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
64 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski