Перейти до вмісту
Клон NCTC № 1469
Тканина
Печінка
Синоніми
NCTC 1469, NCTC-1469, NCTC1469

Документи

Клон NCTC № 1469

Cell line · Номер товару 400300

Характерною особливістю цієї лінії є виділення життєздатних клітин у середовище, що призводить до помутніння середовища та створює загальне враження бактеріального забруднення...

€430.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Запаси на складі на межі вичерпання
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис
Для цієї лінії характерно скидати життєздатні клітини в середовище, що робить середовище каламутним і створює грубе враження бактеріального забруднення. Викинуті клітини є життєздатними і можуть бути використані для ініціації нових культур.
Тканина
Печінка
Синоніми
  • NCTC 1469
  • NCTC-1469
  • NCTC1469

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Ідентифікатори

Посилання
Клон NCTC 1469 (номер за каталогом Cytion 400300)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_3066

04Експресія та сприйнятливість

Експресія антигену
H-2k
Віруси
Тестування на вірус ектромелії (мишачої віспи) показало негативний результат.
Вразливість до вірусів
Везикулярний стоматит (Індіана)
Стійкість до вірусів
Поліовірус 1
Зворотна транскриптаза
Позитивно

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Порода / підвид
C3H/An
Вік донора
2 дні