Перейти до вмісту
B-LCL-HROC112
Тканина
Периферична кров
Хвороба
Карцинома
Місце метастазування
Не застосовується (B-LCL, трансформована вірусом ЕБВ, від пацієнта з колоректальним раком; суспензійна культура)
Синоніми
B-LCL CO112, Bc HROC112

Документи

B-LCL-HROC112

Cell line · Номер товару 302023

B-LCL-HROC112 is an Epstein-Barr virus (EBV)-immortalized human B lymphoblastoid cell line established from B lymphocytes isolated from either tumor tissu...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

B-LCL-HROC112 — це імунізована вірусом Епштейна-Барра (EBV) лінія клітин B-лімфобластоїдів людини, створена з B-лімфоцитів, виділених з пухлинної тканини або периферичної крові дорослого пацієнта. Клітини були отримані шляхом ex vivo інфікування супернатантом, що містив EBV, отриманим з клітинної лінії B95/8 мармозетки в присутності циклоспорину А для пригнічення росту Т- та NK-клітин. Після декількох тижнів культивування було досягнуто стабільного росту лімфобластоїдних клітин, що призвело до утворення постійно проліферуючої популяції моноклональних або олігоклональних В-клітин, придатної для довготривалого розширення in vitro.

Імунофенотипічно B-LCL-HROC112 виявляє зрілий та активований профіль В-клітин, що характеризується експресією CD19 та CD20, а також високим рівнем маркерів активації та дозрівання, таких як CD23 та CD80. Сильна експресія молекул MHC класу I та класу II вказує на збережену здатність до презентації антигену. Залежно від індивідуального клону, може спостерігатися змінна експресія маркерів, пов'язаних з диференціацією, таких як CD27, CD38 або CD138, що відображає різні стадії дозрівання В-клітин. Клітини є негативними щодо маркерів Т-клітин, що підтверджує специфічність лінійного походження.

Функціонально B-LCL-HROC112 секретує імуноглобулін певного ізотипу (наприклад, IgG, IgM або IgA), який залишається стабільним під час тривалого культивування. Секретовані антитіла можна збирати з культуральних супернатантів і використовувати для подальших застосувань, включаючи аналізи зв'язування антигенів, дослідження розпізнавання пухлинних клітин або ідентифікацію антигенів, пов'язаних із захворюваннями. Як модель В-клітин, імунізованих вірусом Епштейна-Барра, B-LCL-HROC112 забезпечує надійну платформу in vitro для дослідження гуморальних імунних реакцій, активації та диференціації В-клітин, а також механізмів, опосередкованих антитілами, в контексті імунології пухлин або системних імунних реакцій.

Тканина
Периферична кров
Хвороба
Карцинома
Місце метастазування
Не застосовується (B-LCL, трансформована вірусом ЕБВ, від пацієнта з колоректальним раком; суспензійна культура)
Застосування
Аналізи Т-клітин та NK-клітин; визначення типу HLA; дослідження презентації антигенів; клітини-мішені для аналізу цитотоксичних Т-клітин (CTL); імунологія колоректального раку; дослідження біобанку HROC, підібраного під конкретного пацієнта
Синоніми
  • B-LCL CO112
  • Bc HROC112

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Підвіска
Статус ГМО
GMO-S2
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as risk group 2; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
2

03Характеристики

Морфологія
Круглі клітини
Тип клітини
Лімфобласт В

04Ідентифікатори

Посилання
B-LCL-HROC112 (номер за каталогом Cytion 302023)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
Not assigned

05Експресія та сприйнятливість

Віруси
Трансформер: EBV

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Пересадка в нове середовище
Акуратно гомогенізуйте суспензію клітин у колбі, піпетуючи її вгору і вниз, а потім візьміть репрезентативну пробу для визначення щільності клітин на мл. Розведіть суспензію свіжим культуральним середовищем до концентрації 1 x 105 клітин/мл і розлийте відрегульовану суспензію в нові колби для подальшого культивування.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
80 років
Етнічна приналежність
Кавказець