HT-1197

La HT-1197 es una línea celular de carcinoma urotelial humano establecida a partir de un carcinoma de células transicionales de alto grado de la vejiga en un paciente adulto de sexo masculino. Esta línea se derivó de un tumor recurrente tras múltiples resecciones quirúrgicas y mostró un comportamiento clínico agresivo con metástasis generalizadas antes del fallecimiento del paciente. Morfológicamente, las células HT-1197 presentan características epiteliales, incluyendo la presencia de microvellosidades, tonofibrillas y desmosomas, tal como se observa bajo microscopía electrónica, lo que indica su origen epitelial urotelial. Estas células presentan un cariotipo distintivo con cromosomas marcadores identificables y demuestran la capacidad de crecer en agar blando, un rasgo característico del crecimiento independiente del anclaje, y son tumorigénicas tanto en ratones desnudos como en hámsters inmunosuprimidos.

A nivel molecular, la línea HT-1197 alberga varias mutaciones oncogénicas clave comúnmente asociadas con el cáncer de vejiga. Presenta una mutación activadora S249C en FGFR3 y una mutación E545K en PIK3CA, ambas prevalentes en la patogénesis del carcinoma urotelial de vejiga. Además, la línea HT-1197 presenta una mutación Q61R en el gen NRAS y mutaciones en la región promotora de TERT, lo que sugiere una mayor capacidad proliferativa y actividad de la telomerasa. El estado del gen TP53 incluye una alteración c.1094A>G, lo que implica además una alteración del control del ciclo celular y de la estabilidad genómica. El perfil genómico indica que la línea HT-1197 pertenece a un subconjunto de líneas celulares de cáncer urotelial caracterizadas por una alta inestabilidad genómica y rasgos moleculares compatibles con el subtipo más agresivo e invasivo muscular del cáncer de vejiga.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.