HT-1197

La lignée cellulaire HT-1197 est une lignée de cellules de carcinome urothélial humain issue d’un carcinome à cellules de transition de haut grade de la vessie chez un patient adulte de sexe masculin. Cette lignée a été obtenue à partir d’une tumeur récidivante après de multiples résections chirurgicales et a présenté un comportement clinique agressif avec des métastases étendues avant le décès du patient. Sur le plan morphologique, les cellules HT-1197 présentent des caractéristiques épithéliales, notamment la présence de microvillosités, de tonofibrilles et de desmosomes, comme l’a montré l’examen au microscope électronique, ce qui indique leur origine épithéliale urothéliale. Ces cellules présentent un caryotype distinct avec des chromosomes marqueurs identifiables; elles sont capables de se développer dans de l’agar mou, ce qui est une caractéristique de la croissance indépendante de l’ancrage, et sont tumorigènes tant chez les souris nues que chez les hamsters immunodéprimés.

Au niveau moléculaire, la lignée HT-1197 porte plusieurs mutations oncogéniques clés couramment associées au cancer de la vessie. Elle présente une mutation activatrice S249C dans le gène FGFR3 et une mutation E545K dans le gène PIK3CA, toutes deux fréquentes dans la pathogenèse du carcinome urothélial de la vessie. De plus, la lignée HT-1197 présente une mutation Q61R dans le gène NRAS ainsi que des mutations dans la région promotrice du gène TERT, ce qui suggère une capacité proliférative accrue et une activité télomérase renforcée. Le profil du gène TP53 comprend une altération c.1094A>G, ce qui implique davantage une perturbation du contrôle du cycle cellulaire et de la stabilité génomique. Le profilage génomique indique que la lignée HT-1197 appartient à un sous-ensemble de lignées cellulaires de cancer urothélial caractérisées par une instabilité génomique élevée et des caractéristiques moléculaires compatibles avec le sous-type de cancer de la vessie le plus agressif, à invasion musculaire.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.