B-LCL-HROC50

La lignée cellulaire B-LCL-HROC50 est une lignée de lymphoblastes B humains immortalisée par le virus d’Epstein-Barr (EBV), établie à partir de lymphocytes B isolés soit à partir de tissu tumoral, soit à partir du sang périphérique d’un patient adulte. Les cellules ont été générées par infection ex vivo avec un surnageant contenant l’EBV, dérivé de la lignée cellulaire de marmouset B95/8, en présence de cyclosporine A afin d’inhiber la prolifération des cellules T et des cellules NK. Après plusieurs semaines de culture, une prolifération stable de lymphoblastes a été obtenue, donnant lieu à une population de cellules B monoclonales ou oligoclonales en prolifération continue, adaptée à une expansion in vitro à long terme.

Sur le plan immunophénotypique, la B-LCL-HROC50 présente un profil de cellules B matures et activées, caractérisé par l’expression de CD19 et de CD20, ainsi que par des niveaux élevés de marqueurs d’activation et de maturation tels que CD23 et CD80. La forte expression des molécules du CMH de classe I et de classe II indique une capacité préservée de présentation des antigènes. Selon le clone individuel, on peut observer une expression variable de marqueurs associés à la différenciation, tels que le CD27, le CD38 ou le CD138, reflétant différents stades de maturation des cellules B. Les cellules sont négatives pour les marqueurs des cellules T, ce qui confirme la spécificité de la lignée.

Sur le plan fonctionnel, la LCL-B HROC50 sécrète une immunoglobuline d’un isotype défini (p. ex., IgG, IgM ou IgA), qui reste stable au cours d’une culture prolongée. Les anticorps sécrétés peuvent être recueillis à partir des surnageants de culture et utilisés pour des applications en aval, notamment des tests de liaison à des antigènes, des études sur la reconnaissance des cellules tumorales ou l’identification d’antigènes associés à des maladies. En tant que modèle de cellules B immortalisées par l’EBV, la lignée B-LCL-HROC50 offre une plateforme in vitro robuste pour l’étude des réponses immunitaires humorales, de l’activation et de la différenciation des cellules B, ainsi que des mécanismes médiés par les anticorps dans le contexte de l’immunologie tumorale ou des réponses immunitaires systémiques.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.