B-LCL-HROC50

B-LCL-HROC50 je lidská B lymfoblastoidní buněčná linie imortalizovaná virem Epstein-Barr (EBV), vytvořená z B lymfocytů izolovaných z nádorové tkáně nebo periferní krve dospělého pacienta. Buňky byly generovány ex vivo infekcí supernatantu obsahujícím EBV, který byl získán z buněčné linie B95/8 marmoset v přítomnosti cyklosporinu A za účelem potlačení růstu T- a NK-buněk. Po několika týdnech kultivace bylo dosaženo stabilního růstu lymfoblastoidních buněk, což vedlo k vytvoření kontinuálně se množiací monoklonální nebo oligoklonální populace B-buněk vhodné pro dlouhodobou in vitro expanzi.

Imunofenotypicky vykazuje B-LCL-HROC50 profil zralých a aktivovaných B-buněk charakterizovaný expresí CD19 a CD20 spolu s vysokými hladinami markerů aktivace a zrání, jako jsou CD23 a CD80. Silná exprese molekul MHC třídy I a třídy II naznačuje zachovanou schopnost prezentace antigenu. V závislosti na jednotlivém klonu lze pozorovat variabilní expresi markerů spojených s diferenciací, jako jsou CD27, CD38 nebo CD138, což odráží různé stadia zrání B-buněk. Buňky jsou negativní na markery T-buněk, což potvrzuje specifitu linie.

Funkčně B-LCL-HROC50 sekretuje imunoglobulin definovaného izotypu (např. IgG, IgM nebo IgA), který zůstává stabilní během dlouhodobé kultivace. Sekretované protilátky lze sbírat z kultivačních supernatantů a použít pro následné aplikace, včetně testů vazby antigenů, studií rozpoznávání nádorových buněk nebo identifikace antigenů spojených s onemocněním. Jako model B-buněk imortalizovaných EBV poskytuje B-LCL-HROC50 robustní in vitro platformu pro zkoumání humorálních imunitních odpovědí, aktivace a diferenciace B-buněk a mechanismů zprostředkovaných protilátkami v kontextu nádorové imunologie nebo systémových imunitních odpovědí.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení