
- Tissue
- Pancréas
- Disease
- Adénocarcinome canalaire du pancréas
- Metastatic site
- Ascite
- Synonyms
- HPAF II, HPAFII, HPAF-2, HPAF2, HPAF/CD18, CD18/HPAF, HPAF-II/CD18, CD-18, CD18, CD 18
Documents
HPAF-II
Cell line · Product number 305088
HPAF-II is a human pancreatic adenocarcinoma cell line derived from an adult patient. This cell line is commonly used in cancer research due to its releva...
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01General information
- Description
HPAF-II est une lignée cellulaire d’adénocarcinome pancréatique humain dérivée d’un patient adulte. Cette lignée cellulaire est couramment utilisée dans la recherche sur le cancer en raison de sa pertinence pour l’étude du cancer du pancréas, une tumeur maligne très agressive et mortelle. Les cellules HPAF-II présentent une morphologie épithéliale et sont connues pour leur capacité à former des tumeurs lorsqu’elles sont xénogreffées chez des souris immunodéprimées, ce qui en fait un modèle précieux pour les études in vivo portant sur la croissance tumorale, les métastases et la réponse aux interventions thérapeutiques. Les chercheurs utilisent souvent les cellules HPAF-II pour étudier les mécanismes moléculaires sous-jacents à la progression du cancer du pancréas, notamment les altérations génétiques et épigénétiques, les voies de transduction du signal et les interactions avec le microenvironnement tumoral.
Les cellules HPAF-II se caractérisent par des mutations et des altérations génétiques spécifiques fréquemment observées dans les adénocarcinomes pancréatiques. Celles-ci comprennent des mutations du gène KRAS, qui joue un rôle essentiel dans la signalisation et la prolifération cellulaires, ainsi que des altérations de gènes suppresseurs de tumeurs tels que TP53 et CDKN2A. Cette lignée cellulaire présente également des niveaux élevés de production de mucine, une caractéristique qui contribue au caractère agressif des tumeurs pancréatiques. Les études menées à l’aide des cellules HPAF-II ont apporté des éclairages importants sur la biologie du cancer du pancréas et ont facilité l’élaboration de stratégies thérapeutiques potentielles visant à cibler les voies moléculaires clés impliquées dans la maladie.
- Tissue
- Pancréas
- Disease
- Adénocarcinome canalaire du pancréas
- Metastatic site
- Ascite
- Synonyms
- HPAF II
- HPAFII
- HPAF-2
- HPAF2
- HPAF/CD18
- CD18/HPAF
- HPAF-II/CD18
- CD-18
- CD18
- CD 18
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Épithélial
- Doubling time
- 26 heures
04Identifiers
- Citation
- HPAF-II (numéro de catalogue Cytion 305088)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0313
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 10 % de FBS et 1 % de NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
07Donor
- Donor age
- 44 ans
- Ethnicity
- européen
08Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes